前列腺癌诊断中BCL2与PSA表达情况及意义研究

黄岸豪，黎土轩，孟 磊，谢建兴

（广州中医药大学第一附属医院泌尿外科，广州 510405）

前列腺癌的发生发展，可以导致患者病死率的上升，并可以导致多器官功能衰竭或者远处转移的发生，临床预后较差。流行病学研究显示，前列腺癌的发病率可达0.6%～1.6%左右［1］，特别是部分地区的发病率更高。近年来基础领域的研究显示，细胞生物学因子的改变，可以通过影响到癌细胞的增殖、凋亡或者侵袭能力等，进而促进前列腺癌细胞对于临近组织的浸润，促进临床分期的进展。B淋巴细胞瘤-2（BCL2）是癌细胞凋亡的特异性抑制因子，BCL-2的上升可以显著促进癌细胞的增殖活性，前列腺特异性抗原（PSA）是癌细胞分化、侵袭的特异性分子［2，3］，为了进一步探讨BCL2和PSA在前列腺癌病情进展中的作用，本研究选取2014年2月～2015年12月在我院接受治疗的前列腺癌患者为研究对象，探讨了BCL2和PSA的异常表达及其与患者临床病理特征间的关系，报道如下。

1 资料与方法

1.1 患者一般资料选取2014年2月～2015年12月在我院接受治疗的前列腺癌患者为研究对象。纳入标准：（1）年龄≥50周岁；（2）经病理诊断确诊为前列腺癌者；（3）无其他系统严重疾病者；排除标准：（1）临床资料不全者；（2）合并其他部位原发肿瘤者；（3）不愿参与本项研究者。根据纳入排除标准共纳入研究对象110例，年龄52～72岁，平均62.24±3.18岁；前列腺增生组纳入排除标准：年龄≥50周岁；无肿瘤疾病者。两组患者在年龄等一般资料方面无明显差别，具有可比性。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且所有患者均知情同意。

1.2 检测方法采用石蜡切片脱蜡至水，切片厚度3mm，3%H2O2室温孵育 5 min，采用去离子水水冲洗3次，每次3min，采用浓度为10% 牛奶蛋白（1g蛋白加入100mL纯水）封闭，室温孵育 5min，加入BCL2和PSA抗体（鼠来源，南京碧云天生物科技有限公司），37 ℃ 孵育 2h，PBS缓冲液冲洗3次，每次5min，滴加HRP标记的二抗（兔来源，购自罗氏检测公司），37 ℃ 孵育 30 min，PBS 冲洗3次，每次5min，加入 NBT/BCIP色剂显色 5min，复染，脱水，透明，封片，镜下观察。OLIPICS电子显微镜购自上海精密仪器有限公司，配套试剂购自南京泰康生物科技有限公司。

1.3 评价指标观察两组患者BCL2和PSA阳性表达率，比较不同临床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的差异，分析影响BCL2和PSA阳性表达率的因素。

1.4 统计学处理数据录入后，采用SPSS 11.5软件进行分析。计数和计量资料分别采用例和均数±标准差表示。两组患者和不同临床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的的比较采用卡方检验进行分析，采用Logistic回归分析法分析影响BCL2和PSA阳性表达率的因素。P＜0.05：差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者BCL2和PSA阳性表达率的比较表1显示，前列腺癌组患者的BCL2和PSA阳性表达率均高于前列腺增生组（χ2值=49.107、147.468，P＜0.001）。

表1 两组患者BCL2和PSA阳性表达率的比较

2.2 不同临床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的比较表2显示，中低分化、有转移、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、有浸润的前列腺癌患者的BCL2和PSA阳性表达率较高（P＜0.05），而不同年龄的前列腺癌患者的BCL2和PSA阳性表达率无明显差别。

表2 不同临床病理特征前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的比较

2.3 影响前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的因素将单因素分析有意义的分化程度、转移情况、TNM分期和有无浸润作为自变量，将前列腺癌患者的BCL2和PSA阳性表达率作为因变量，进行多因素Logistic回归分析，结果有无转移和分化程度进入回归方程，说明转移情况和分化程度是影响前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的因素，见表3。

表3-1 影响前列腺癌患者BCL2阳性表达率的因素

表3-2 影响前列腺癌患者PSA阳性表达率的因素

3 讨论

前列腺癌的高危因素主要包括吸烟、高雄激素及遗传因素等，长期的发生发展过程中，前列腺癌病情的进展可以导致多器官转移、淋巴结或者临近正常组织的浸润等，增加不良临床预后的发生。临床随访研究可以发现，前列腺癌的中位生存时间不足32个月，五年生存率不足35%，临床治疗效果较为局限［4］。而通过对于前列腺癌发病过程中相关生物学机制的研究，可以为临床上前列腺癌的生物学治疗、靶向治疗等提供理论参考，并有利于进一步揭示疾病的发生机制。

PSA蛋白是肿瘤相关特异性抗原，其能够在影响前列腺移行上皮细胞膜表面的受体、前列腺细胞膜受体的雄激素敏感性等方面发挥作用，基础领域的研究显示PSA蛋白可以增加雄激素对于前列腺细胞的持续性刺激作用，导致前列腺病变的风险进一步增加［5，6］。同时，PSA蛋白羧基末端上包含了多个巯基结构，能够通过结合移行细胞膜表面的糖蛋白，进而诱导细胞早期恶变的发生［7，8］；BCL2是细胞凋亡抑制家族成员，其对于癌细胞的凋亡抑制作用，能够持续性促进癌细胞的扩增，导致癌细胞的侵袭能力的增强及对于临床正常组织的浸润［9，10］。本次研究在探讨了PSA或者BCL2在前列腺癌组织中的异常表达的同时，揭示了其与患者临床病理特征间的关系。

在本次研究中可以发现，前列腺癌组织中的BCL2和PSA的阳性表达率明显高于无恶性病变的前列腺组织，差异具有统计学意义，提示BCL2和PSA可能参与到了前列腺癌的发生发展过程中，BCL2和PSA的高表达可以通过影响到癌细胞的细胞周期的比例、促进癌细胞对于淋巴管内皮细胞的粘附能力，增强癌病灶对于临床正常组织的侵袭能力等方面发挥作用，进而促进了前列腺癌的病情进展。董忠等［11，12］研究者在寻找可靠的前列腺癌的临床预后指标的过程中发现，BCL2和PSA在预后较差的患者中表达阳性率较高，高于预后较好组，且患者的BCL2和PSA阳性率越高，患者的病情越为严重，这与本次研究得到的相关结论较为一致。在不同的年龄前列腺癌患者组织中，并未发现BCL2和PSA的表达差异，但可以发现在发生了淋巴结转移、癌细胞分化不良或者TNM分期较晚的患者中，相关指标的阳性率较高，从机制上考虑而者与前列腺癌淋巴结转移等的关系可能与下列因素有关［13］：（1）BCL2促进了癌细胞的增殖调控异常，影响到了癌相关信号通路NOTCH的表达，提高了G1/S期比例，导致其细胞在泌尿系统组织中的播散；（2）PSA的表达上升，影响到了前列腺癌细胞的早期分化调节障碍，导致癌细胞分化不良。但需要注意的是，谢赣生等［14］研究者的研究并未发现PSA的表达与患者细胞分化程度的关系，这与本研究得到的结论存在一定的差别，主要考虑可能与临床病例选择过程中纳入标准的不统一有关。最后，本研究发现转移情况和分化程度是影响前列腺癌患者BCL2和PSA阳性表达率的因素，进一步提示了BCL2和PSA与前列腺癌的关系。

综上所述，前列腺癌患者的BCL2和PSA阳性表达率较高，且与患者的分化程度和有无转移情况密切相关。但本研究对于二者的表达与患者远期生存预后的关系研究不足，存在一定的局限。