三氧化聚合物MTA在年轻恒牙活髓保存术后的治疗效果及对牙髓干细胞体外增殖分化的影响

杨 光，尹雪莲，马东杰，王 鹏，王 敬，张海龙，苏哲君，霍 峰

（1.承德医学院附属医院口腔科，承德 067000；2.秦皇岛市中医医院手术室，秦皇岛 066002）

年轻恒牙主要指恒牙牙根压根发育未终止，常见发病原因包括龋病、牙外伤、发育畸形等原因引起的牙髓坏死［1］。治疗年轻恒牙牙龈炎或根尖周炎传统的方法为根尖诱导成形术，首先采用Ca（OH）2等药物诱导形成根尖钙化屏障，之后进行根管填充［2］。传统方法虽能解决由于根尖孔未形成导致的修复困难［3］，但是治疗周期长，患者需要进行多次就诊，而且治疗效果不稳定［4］。三氧化聚合物（minreal trioxide aggregate，MTA）是一种亲水性无机化合物能够在血液存在的潮湿环境下，4h内固化，其生物相容性良好，根管封闭性较高，并且具有一定组织修复的生物活性［5］。牙髓干细胞是牙髓织中具有增殖、分化潜能的成体干细胞，相关研究表明，MTA对牙龈干细胞诱导分化的作用，但其机制目前尚不明确［6］。因此，研究通过对比三氧化聚合物MTA与常规疗法对年轻恒牙的治疗效果及对牙髓干细胞体外增殖分化的影响，以期探讨三氧化聚合物MTA的作用机制及临床疗效。本次研究经我院医学伦理委员会批准，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 基本资料选取2015年9月～2016年9月于我院行年轻恒牙活髓保存术的患者作为本次研究对象。纳入标准：①经X线检查明确牙尖孔粗大；②压根长度超过10mm且牙根无根折；③牙体缺损不超过龈下2mm；④患者无牙周感染。本次研究中共34例患者，48颗年轻恒牙纳入研究。将患者按照随机数字表法分为观察组和对照组，其中观察组17例，共24颗牙，对照组17例，共24颗牙。观察组中男性8例，女性9例，患者年龄（9.31±1.61）岁；对照组中男性7例，女性10例，年龄（9.18±1.63）岁。两组患者性别、年龄相比差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法对照组患者采用根尖诱导成形术进行治疗，将钙糊剂敷在牙龈断面，采用玻璃离子进行冠部封闭，3个月后进行复诊，待钙化牙本质桥形成后取出根管内糊剂，清理根管后热牙胶根充，树脂永久充填。观察组患者首先备洞处理，清除牙髓腐败部分保留牙髓点部分，操作中避免损伤正常牙髓组织。清除腐败牙髓后进行开髓，采用生理盐水进行冲洗，对窝洞进行消毒后吹干。将MTA敷在牙髓点及牙髓近端部分，厚度0.3mm左右，之后进行盖髓处置，如渗出液过多时可以采用丁香油碘仿棉球进行处理。采用X线观察MTA是够填充充分，隔日后进行复诊。两组患者分别于治疗后6个月、12个月进行复查。

1.3 观察指标根据患者X线检查结果评定根尖周指数（periapical index，PAI），共分为5级［7］。其中1级：患者牙周膜间隙无明显增宽，骨质结构物无异常，牙齿硬骨板边界均匀、光滑；2级：根周膜出现轻度骨质结构紊乱及轻度骨小梁粗细不均匀，骨髓腔腔隙增大，根面可有吸收；3级：填充物或根尖处存在X线头社区中度增宽，骨质紊乱，透射区周围存在骨小梁环绕，根面可有吸收；4级：根尖上方存在明显增宽的X线透射区，骨小梁明显变细部分呈明显弓形、网状排列，根面可有吸收；5级：根尖周存在明显增大且不规则的X线透射区，边界模糊，骨小梁明显变细，骨髓腔明显变大，骨质紊乱明显，根面可有吸收。根据患者症状改善及PAI评分评估治疗效果，将治疗效果分为完全愈合、正在愈合、不确定三个标准。其中患者无明显不适，牙齿功能正常，经检查无明显异常，PAI评分2级以上为完全愈合；患者无明显主观不适，牙齿功能良好，PAI评分3级以上；不确定：患者存在不适感，PAI分级4～5级。其中完全愈合、正在愈合患者为治疗成功。

1.4 牙髓干细胞体外增值分化影响检测从患牙髓腔内取牙髓组织，并采用组织贴块法分离牙髓干细胞。将细胞于37℃、5%CO2培养箱内进行培养，每2～3d进行换液。细胞90%融合时消化收集细胞并进行传代。取第3代牙髓干细胞，并接种于96孔板，对照组不进行处置，观察组采用终浓度0.2g/LMTA浸提液处理1、3、5、7d。采用MTT染色法检测细胞存活情况。

1.5 统计学处理采用 SPSS 19.0 软件包进行统计学分析，计量数据以平均值±标准差表示，采用t检验进行比较；计数数据以［（n）］%表示，采用卡方检验。当P＜0.05时，认为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组治疗效果比较两组患者12个月成功率均高于6个月时，差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组相比6个月、12个月时观察组成功率均高于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组治疗效果比较

2.2 两组检测指标变化比较两组患者均完成随访，初诊时两组牙齿PAI分级均为2及以上，12个月随访时，观察组PAI≤2级牙齿数明显多于对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表2。

表2 两组12个月随访时PAI分级比较［例（%）］

2.3 两组牙髓干细胞体外增值分化影响培养第1天，两组患者牙髓干细胞体外增值吸光度差异无统计学意义，培养第3天，第5天，第7天，牙髓干细胞体外增值吸光度均较培养第一天明显升高（P＜0.05），且观察组明显高于对照组（P＜0.05），见表3。

表3 两组患者牙髓干细胞体外增值吸光度比较

3 讨论

年轻恒牙大多未形成根尖孔，直接采用根管充填会导致充填材料超出根尖孔，治疗效果较差［8］。采用药物诱导患牙根尖部牙压槽以及周围组织钙化形成根尖屏障是目前临床中常用的根尖诱导成形术，在年轻恒牙的修复治疗中具有重要地位［9］。凡是由于传统的根尖诱导成形术需要对根尖进行多次钙化诱导，治疗周期较长，很多患者难以坚持治疗，导致治疗失败［10］。

氢氧化钙是临床中常用的钙化诱导药物，在临床中取得效果良好，但是由于氢氧化钙是强碱性物质，能够造成接触的活髓表面细胞坏死，而且氢氧化钙形成的钙化桥存在较多空隙容易造成细菌滋生、渗漏，另外长期使用氢氧化钙进行诱导会增加牙齿折裂的发生；MTA是一种新型的生物材料，其主要成分包括硅酸三钙、铝酸三钙、氧化三钙、三氧化二铋、氧化硅等，其固化时间在48h左右，组织相容性较好，而且固化时间较短［11］。根据相关研究显示，MTA与牙髓组织及组织液接触后能够形成羟基磷灰石结晶，是年轻恒牙修敷过程中钙化节点的重要来源［12］。MTA能够形成较厚的牙本质壁，其治疗后牙髓炎、压碎坏死发生率较低，而且采用MTA进行患牙修复能够缩短治疗时间，同时又能避免氢氧化钙对牙本质的破坏［13］。本次研究中对照组患者采用传统的氢氧化钙根尖诱导成形术进行治疗，观察组患者采用MTA进行修复治疗。两组治疗成功率相比，6个月、12个月观察组均优于对照组，说明MTA进行修复治疗效果明显优于传统修复方式。根据赵鲁明等的研究，采用三氧化物凝聚体进行根尖屏障术治疗恒压牙开放性慢性根尖周炎有效率为95%，明显高于传统根尖诱导成形术（65%）［14］。对两组治疗后进行12个月随访，对患者牙齿PAI进行评级，其中观察组中PAI≤2级牙齿数明显高于对照组，结果说明采用MTA进行年轻恒牙修复牙齿修复效果更佳优良，经修复后骨质结构正常，无明显骨质紊乱现象。

MTA促进年轻恒牙修复的作用机制目前尚未完全清楚，根据相关研究显示，MTA能够释放Ca2+对牙本质修复具有明显作用，而且MTA具有良好的组织相容性，与活髓、根尖组织接触后能够保持组织活性，另外具有一定促进组织再生的能力［15］。牙髓干细胞是牙髓内具有增殖分化能力的成体干细胞，来源于神经嵴发育，MTA能够提高牙髓干细胞标志物DSP的表达增多，提示MTA能够促进牙髓干细胞的增殖，但其具体机制目前尚未明确［16］。根据俞琪等的研究显示，MTA能够提高牙髓干细胞碱性磷酸酯酶活性，表明MTA能够促进牙髓干细胞向成骨细胞的分化［17］。本次研究中，观察组牙髓干细胞采用MTA浸出液进行处理，与对照组相比，处理第3d、第5d、第7d MTT检测其吸光度明显高于对照组，结果说明MTA能够促进牙髓干细胞的增殖，能够保持牙髓干细胞活性。因此，我们认为MTA能够通过促进牙髓干细胞增殖，从而提高年轻恒牙的修复。此外，本次研究中纳入的的样本量较少，而且仅局限于本地区，因此具有一定局限性。

综上所述，三氧化物MTA应用于年轻恒牙牙髓保存术，其组织相容性良好，能够促进牙髓干细胞增值，增强治疗效果，修复效果优于氢氧化钙修复。