复合微生态制剂对蛋鸡生产性能、蛋品质及抗氧化性能的影响

■戴 维 薛俊敬 班 博 李四元 方热军*

（1.湖南农业大学动物科学技术学院，湖南长沙410128；2.湖南畜禽安全生产协同创新中心，湖南长沙410128）

随着生活水平的改善，人们对畜禽产品质量的要求逐渐提高，品质优良、绿色、安全的畜禽产品越来越受到人们的关注与青睐。现代畜禽生产中通常使用抗生素、驱虫剂、促生长素等化学药品来促生长、防控疾病，但其过度使用导致药物残留和耐药菌株等问题，因此，寻找抗生素的替代品显得格外重要[1-3]。Lei 等[4]报道，基础饲粮中添加淀粉芽孢杆菌可使肉鸡生产性能显著提高，改善肠道菌群平衡以及提高其对营养物质的消化率。董水丽等[5]研究发现，用EM 菌饲喂肉鸡，具有促生长、提高成活率作用，且能显著降低肉鸡料重比，改善了鸡舍内的生存环境。Choi 等[6]通过试验证明，饲粮添加发酵益生菌可以调节肠道菌群平衡，促进断奶仔猪生长，提高饲料消化率。EM 菌作为一种复合微生态制剂，其能够通过调控畜禽消化道内环境，改善机体肠道菌群平衡，促进畜禽对营养物质的消化率来提高饲料报酬、生产性能和改善畜禽产品品质，此外还具有无残留、无毒副作用等特点[7-11]，其主要由乳酸菌、酵母菌、放线菌、光合细菌、双歧杆菌、醋酸杆菌及发酵系列的丝状菌等5 科10 属80 多种好氧性或厌氧性微生物组成的一种多功能复合微生态制剂[12]。本试验以26周龄罗曼粉壳蛋鸡为试验对象，旨在研究饲粮中添加不同比例的复合微生态制剂对蛋鸡生产性能、蛋品质以及抗氧化性能的影响，为复合微生态制剂在蛋鸡生产应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

复合微生态制剂为EM 菌：由湖南锦泰源农业科技有限公司提供，含乳酸菌（≥2×108CFU/kg）、酵母菌（≥3×107CFU/kg）。

1.2 试验动物及饲粮

选取体重相近的26 周龄健康罗曼粉壳蛋鸡240 只，由湖南鹏晖农牧有限公司提供，试验基础饲粮组成及营养水平见表1。

1.3 试验设计

采取单因子试验设计，将240 只健康、体重相近的26 周龄罗曼粉壳蛋鸡随机分为3 个处理，分别是对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组，每个处理5 个重复，每个重复16 只鸡。对照组饲喂基础日粮；试验Ⅰ组饲喂基础日粮+1.5%复合微生态制剂；试验Ⅱ组饲喂基础日粮+3%复合微生态制剂。预试期7 d，正试期42 d，分试验前期（0～21 d）和试验后期（22～42 d）。

1.4 饲养管理

本试验在湖南省益阳市安化县某蛋鸡场进行，三层立体笼养。试验期内每天上午和下午各饲喂1次，自由采食、饮水，每日捡蛋1 次，清粪2 次，恒定光照。每天监测鸡舍空气质量，并记录鸡舍内的温度、湿度；打扫鸡舍清洁卫生，并定期用百毒杀对鸡舍进行喷雾消毒；参照常规免疫程序进行免疫接种；试验期间时时观察鸡群的健康状况。

表1 基础饲粮组成及营养水平（风干基础）

1.5 样品采集

蛋样与血清样：试验期第21、42 d，以重复为单位随机收集鸡蛋6 枚，置于4 ℃冰箱保存，用于蛋品质测定。试验期结束空腹12 h 后每只蛋鸡进行翅静脉采血5 ml（每重复取2 只），自然凝固待血清析出后，3 000 r/min，离心10 min，取上清液分装到1.5 ml离心管后置于-80 ℃保存待测。

1.6 指标测定及方法

1.6.1 生产性能

自正试期起，每日以重复为单位记录当日所产蛋数、总蛋重，计算平均蛋重、产蛋量、产蛋率。每周定时称量饲料，以重复为单位计算平均日采食量和料蛋比，及时记录淘汰鸡、病死鸡死淘数。

产蛋率(%)=统计期内产蛋总数/(存栏鸡只数×统计期天数）×100

平均蛋重(g)=每组总蛋重/每组产蛋个数

平均采食量(g/d)=每组采食量总量/每组鸡存栏数

料蛋比=耗料量/总蛋重

1.6.2 蛋品质

对第21、42 d 蛋样进行蛋品质测定：①蛋壳强度：将完整的鸡蛋置于蛋壳强度分析仪（ESTG-01型，以色列ORKA 公司）进行检测；②用蛋品质分析仪（EA-01 型，以色列ORKA 公司）分别测定蛋重、蛋黄颜色、蛋白高度与哈氏单位；③蛋黄比例：清除蛋黄表面蛋白及系带，在分析天平上称量记录蛋黄重，与蛋重作比；公式：蛋黄比例=蛋黄重量/全蛋重；④蛋壳厚度：使用蛋壳厚度测定仪（NFN-380型，日本FHK 公司）测定蛋的锐端、钝端和中部3 部分的蛋壳厚度，取其平均值，精确到0.02 mm；⑤蛋形指数：使用电子数显游标卡尺（SH14100025 型，上海申韩量具有限公司），测定每枚鸡蛋横径与纵径，再行计算；公式：蛋形指数(%)=横径/纵径×100；⑥蛋黄指数：使用电子数显游标卡尺测定蛋黄高度与蛋黄直径。蛋黄指数=蛋黄高度/蛋黄直径，精确到0.02 mm。

1.6.3 血清生化指标测定

利用迈瑞BS-420全自动生化分析仪检测测定血清胆固醇（TC）、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)含量。

1.6.4 血液抗氧化指标测定

利用试剂盒测定总抗氧化能力（T-AOC）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（T-SOD）活性及丙二醛（MDA）含量。所有试剂盒均购自南京建成生物工程研究所，操作严格按照试剂盒说明书进行。

1.7 数据处理与分析

试验数据经Excel 2016 软件初步整理后，采用SPSS 21.0软件进行单因素方差分析(one-way Anova)，Duncan's 法进行多重比较，P＜0.05 表示表示显著，0.05＜P＜0.1 表示变化趋势。测定结果以“平均值±标准差”表示。

2 结果

2.1 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响

由表2 可知，各处理组间各阶段的平均蛋重无显著差异（P＞0.05）。在试验前期，与对照组和试验Ⅰ组相比，试验Ⅱ组料蛋比有降低的趋势（0.05＜P＜0.1）；在试验后期，与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组产蛋率均显著提高（P＜0.05），与对照组、试验Ⅰ组相比，试验Ⅱ组平均日采食量显著提高（P＜0.05），以及料蛋比极显著降低（P＜0.01）；在试验全期，与对照组、试验Ⅰ组相比，试验Ⅱ组平均日采食量显著提高（P＜0.05），和料蛋比均极显著降低（P＜0.01），与对照组相比，试验Ⅰ组、试验Ⅱ组均有提高蛋鸡产蛋率的趋势（0.05＜P＜0.1），其产蛋率分别提高了2.07%、2.56%。试验结果表明，随着时间的延长，试验组蛋鸡产蛋率明显高于对照组，添加3%比例的微生态制剂显著降低了蛋鸡平均日采食量及料蛋比。

表2 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响

2.2 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡常规蛋品质的影响

由表3 可知，在试验21 d 时，与对照组相比，试验Ⅰ组各检测指标均无明显差异，但试验Ⅱ组与对照组相比有提高蛋黄颜色、蛋壳厚度的趋势（0.05＜P＜0.1），其中蛋黄颜色和蛋壳厚度分别提高了12.19%和5.26%；在试验42 d 时，与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ组在蛋鸡蛋重、蛋黄指数、蛋白高度、蛋形指数、哈氏单位、蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋黄颜色方面均有不同程度的提高，其中试验II 组与对照组相比其蛋壳厚度显著提高（P＜0.05），但试验Ⅰ组与试验Ⅱ组之间各检测指标均无明显差异。由此说明蛋鸡基础饲粮中添加不同水平的复合微生态制剂均能改善蛋鸡的蛋品质，且3%添加水平的作用效果较好。

2.3 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡血清抗氧化性能的影响

由表4可知，与对照组相比，试验Ⅰ、Ⅱ组均可以不同程度提高蛋鸡血清总抗氧化能力，试验Ⅰ、Ⅱ组血清T-AOC 较对照组分别提高了58.22%、65.99%（P＜0.05），试验Ⅰ组与试验Ⅱ组之间无显著性差异（P＞0.05）。试验Ⅰ组血清MDA 较对照组降低了5.09%，但影响不显著（P＞0.05）；试验Ⅱ组血清MDA较对照组降低14.88%，差异显著（P＜0.05）。试验Ⅰ组与试验Ⅱ组之间无显著性差异（P＞0.05）。各试验组对蛋鸡血清GSH-Px 和T-SOD 影响均不大（P＞0.05），各处理组间差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响

复合微生态制剂对蛋鸡生产性能的影响已有相关报道，但由于蛋鸡品种、日龄以及菌种和菌种活性的不同，最适添加量也存在着较大差异。Asli等[13]报道，添加微生态制剂组对蛋重影响不显著。崔闯飞等[14]研究也发现，饲粮中添加400 mg/kg 和800 mg/kg 枯草芽孢杆菌对平均蛋重无显著影响。李晓丽等[15]研究表明，添加复合微生态制剂组的产蛋率、平均蛋重均高于对照组，但影响不显著，并且V2型微生态制剂显著降低蛋鸡料蛋比。本试验中，微生态制剂组虽然对蛋鸡全期产蛋率和平均蛋重的提高程度未达到显著水平，但后期研究表明，随着时间延长，试验组产蛋率均高于对照组，这表明微生态制剂在蛋鸡肠道区域可能需要一定时间稳定定植，建立优势菌群后而发挥益生作用，与Asli 等[13]、崔闯飞等[14]、李晓丽等[15]报道一致。李万军等[16]研究表明，用复合微生态制剂饲喂蛋鸡42 d，与对照组相比，0.15%复合微生态制剂添加组显著降低蛋鸡的日采食量和料蛋比。周岭等[17]研究表明，添加微生态制剂组蛋鸡的平均日采食量低于对照组。崔闯飞等[14]研究发现，饲粮中添加200、400 mg/kg 和800 mg/kg 枯草芽孢杆菌显著降低蛋鸡的平均日采食量与料蛋比。本试验的研究结果与上述学者研究结果基本一致，说明微生态制剂能显著降低蛋鸡的平均日采食量与料蛋比，提高了蛋鸡养殖的经济效益，饲喂3%微生态制剂达到显著水平。其原因可能包括2 个方面：本研究所用微生态制剂含有多种益生菌，研究认为，益生菌一方面产生挥发性脂肪酸和乳酸，降低肠道pH 值，提高肠内酸度，从而抑制有害菌的生长[18-20]；另一方面益生菌也可产生淀粉酶、蛋白酶、纤维素酶等多种消化酶，可与体内的酶发挥协同作用，促进其肠道对营养物质的利用率[21-23]。

表3 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡蛋品质的影响

表4 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡血清抗氧化指标的影响

3.2 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡常规蛋品质的影响

蛋壳厚度、蛋壳强度是用来评价蛋壳质量的常用指标。胡昌艳等[24]在罗曼蛋鸡饲粮中添加复合微生物制剂饲养30 d 后发现，饲粮中添加60 mg/kg 复合微生物制剂，能够显著提高鸡蛋的蛋壳厚度，添加90 mg/kg 复合微生物制剂在一定程度上可提高蛋黄颜色。Lei 等[25]发现饲料添加不同水平的地衣芽孢杆菌可通过增加蛋壳厚度来有效改善鸡蛋质量。白子金等[26]将微生物制剂按不同水平添加于海兰褐蛋鸡的日粮中，评价其对海兰褐蛋鸡蛋品质的影响，结果发现，中等添加量提高蛋壳厚度的效果最好，对蛋黄颜色具有很好的改善作用。刘爱君等[27]研究表明蛋鸡饲粮中添加乳酸菌类微生态制剂可显著提高蛋壳厚度，一定程度上改善了蛋黄颜色，但未达到显著水平。在本试验条件下，与对照组相比饲粮中添加3%复合微生物制剂显著增加了蛋壳厚度，对蛋黄颜色也有一定的改善作用，这与胡昌艳等[24]、Lei等[25]、白子金等[26]、刘爱君等[27]的报道相一致。复合微生态制剂可显著提高鸡蛋的蛋壳厚度的原因可能是复合微生态制剂为肠道创造了良好的消化环境，促进了钙、磷等矿物质的吸收利用[28-30]。对于蛋黄颜色而言，可能是复合微生态制剂促进了蛋鸡对饲料中固有色素的吸收、沉积；另外复合微生态制剂在代谢过程中可产生番茄红素等类胡萝卜素，从而加深蛋黄颜色[31-32]。

3.3 不同添加比例的复合微生态制剂对蛋鸡血清抗氧化性能的影响

GSH-Px和T-SOD是动物体内抗氧化系统的2种重要的抗氧化酶，起着清除超氧自由基、过氧化氢和过氧化物等活性氧自由基的作用。T-AOC 是反映机体的抗氧化能力的综合性指标。MDA是脂质过氧化的标志性产物，通过检测MDA 可间接判定膜系统的受损程度。赵梦迪等[33]研究发现，饲粮中使用酵母菌-红曲霉复合制剂对机体抗氧化能力有一定的调节作用，酵母菌-红曲霉复合制剂可显著提高蛋鸡血清、肝脏及蛋黄中T-AOC，显著降低MDA(丙二醛)的含量。孙玲等[34]研究发现，蛋鸡饲粮中添加微生态制剂可极显著提高血清T-AOC、降低MDA 含量。李嘉懿等[35]研究发现，在蛋鸡饲粮中添加100 mg/kg凝结芽孢杆菌可显著提高血清T-AOC 含量，并且在一定程度上降低MDA 含量。本试验结果表明，饲粮中添加1.5%、3%复合微生态制剂均显著增加了血清T-AOC，其中3%复合微生态制剂添加组显著降低了血清MAD 含量，与赵梦迪等[33]、孙玲等[34]、李嘉懿等[35]研究结果基本一致，表明复合微生态制剂在抗氧化过程中可消除机体自由基或减少活性氧的产生，保护蛋鸡免受氧化应激损伤，维持机体的健康状态[34，36-37]。陈家祥等[38]在麻羽肉鸡饲粮中添加50 mg/kg 的地衣芽孢杆菌，研究发现饲粮添加地衣芽孢杆菌能显著提高血清GSH-Px 及SOD 的活性。张鑫等[39]饲喂海兰褐蛋鸡不同微生态制剂发现，各试验组的血液中GSH-Px 与SOD均显著高于对照组。本试验与陈家祥等[38]、张鑫等[39]研究结果不完全一致，其原因可能与试验动物的品种、日龄以及微生态制剂的种类和添加量有一定关系，具体原因还有待进一步研究。

4 结论

综上所述，罗曼蛋鸡饲粮中添加1.5%的复合微生态制剂可显著提高蛋鸡血清T-AOC含量，添加3%的复合微生态制剂可显著提高血清T-AOC 含量，显著降低MDA 含量，在生产性能方面，饲粮中添加3%的复合微生态制剂可显著提高试验后期产蛋率，显著降低全期的平均日采食量、料蛋比，同时极显著提高了蛋壳厚度。蛋鸡饲粮中添加复合微生态制剂，3%添加组作用效果优于1.5%添加组。