抗核抗体和抗核抗体谱联合检测诊断自身免疫性疾病的临床价值

陈利琼，刘玉平，李陈林

克拉玛依市中心医院检验科，新疆克拉玛依 834000

自身免疫性疾病（AID）是指因人体自身存在的具 有免疫效应的物质或细胞对人体自身产生的过度免疫应答，从而发生一系列的组织损伤与机体功能障碍[1]。AID可累及皮肤、关节、神经、肾脏等多种器官、组织与系统，症状复杂多变，对患者的身心健康具有严重不良影响。抗核抗体检测与抗核抗体谱检测是目前对疑似AID患者进行进一步诊断的常用检验方法，对于AID患者的病情监测、预后评估等内容具有重要价值[2]。越来越多的研究证实[3]，采用酶联免疫吸附测定法检测ANA，对辅助诊断AID具有重要的意义，而ANAs检测对AID的诊断同样具有重要价值。但何种检测方法对于AID的诊断效果更佳，目前研究数据尚不足，故该文以该院在2017年1月—2019年12月期间收诊的97例自身免疫性疾病患者作为研究对象，探讨和分析ANA检测和ANAs检测对于AID的诊断价值。报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

方便选取该院收诊的97例自身免疫性疾病患者作为研究对象，其中男性患者35例，女性患者62例；年龄6～81岁不等，平均年龄为（47.78±15.36）岁；其中32例患者为类风湿性关节炎，31例患者为系统性红斑狼疮，12例患者为干燥综合征，11例患者为混合性结缔组织病，6例患者为硬皮病，5例患者为过敏性紫癜。实验组所有入选患者均符合美国风湿病学会的诊断标准。该实验经该医院伦理委员会批准同意施行。患者及其家属知情并同意。以上患者在一般资料数据对比上差异无统计学意义（P>0.05）。具有可比性。

1.2 方法

ANA检测仪器：瑞士HAMILTON全自动酶免分析仪。方法：研究对象清晨空腹状态下抽取肘静脉血3～5 mL，安静放置30 min后，置于离心机内以3 500 r/min的速度离心5 min，离心后取上层清液，如不能及时检测需保存在-20℃冰箱中，检测时选用酶联免疫吸附法（ELISA法）进行检测[4]。严格按照操作说明书进行检测：取待测血清，使用稀释液按1∶80的比例稀释后加入至ELISA板孔内，试验中设空白对照孔、阴性对照孔、阳性对照孔、临介对照孔等，温育60 min，温育后使用专用洗液洗涤6次，再加入酶结合物进行第二次温育，时间30 min，温育后洗涤6次，加底物和底物缓冲液进行第三次温育显色，时间15 min，最后加终止液终止反应后使用酶标仪450 nm和630 nm双波长比色，测反应板的吸光度(OD)值。判断结果的阴阳性，若滴度≥1:80，则为阳性。阳性者检测抗体分成4个滴度：1∶5 120、1∶2 560、1∶1 280、1∶320。

ANAs检测：德国胡曼生化诊断有限公司生产的抗核抗体谱测定试剂盒。标本采集与ANA一致，选用线性免疫印迹法进行检测[4]，记录抗SmD1、抗dsDNA、UISnRNP、抗核糖体P蛋白、抗组蛋白、抗SS-B、抗SS-A、抗核小体、抗Jo-1、抗Scl-70、抗-CNEP-B等IgG类抗体，根据AID确诊结果，统计ANA准确率与ANAs准确率[5]。

1.3 统计方法

实验所涉及的资料及数据均运用SPSS 21.0统计学软件进行分析，用（%）表示百分数，百分数和例数用χ2检验，P＜0.05差异有统计学意义。

2 结果

2.1 ANA和ANAs阳性率的比较

女性患者各项检出的阳性率ANA（75.81%）、Ul-SnRNP（8.06%）、抗SSA（37.10%）、抗SSB（20.97%）、抗核小体（30.65%）和抗组蛋白（37.10%），明显高于男性患者，均差异有统计学意义（P＜0.05）。抗ds-DNA、抗SmDl、抗Jo-1、抗Scl-70、抗CNEP-B、抗PM-Scl、抗核糖体P蛋白在不同性别间比较，均差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。

表1 不同性别组ANA和ANAs阳性率的比较[n(%)]

2.2 不同检测方法检测准确率情况的比较

经酶联免疫吸附法得到的ANA阳性结果和经线性免疫印迹法得到的ANAs阳性结果与AID确诊情况对比，结果发现ANA检测的准确率为67.01%，ANAs检测的准确率为92.78%，ANAs检测与ANA检测结果对比，差异有统计学意义（χ2=20.058，P＜0.05）。见表2。

表2 不同检测方法检测准确率情况比较（n）

3 讨论

机体在发生AID时会产生一个重要的标志，即出现抗体，并且任何一种AID都具有其相对的抗体谱[6]。由于AID患者体内存在着与AID相关的高效价抗体，故临床可利用这一特征对AID进行诊断，目前检验科所应用的诊断AID的检验方法就是基于此理论进行的。与自身免疫性疾病关系较为密切的抗体包括抗核抗体，以及由抗ds-DNA、抗SmDl等抗体组成的抗核抗体谱。目前在临床中对AID进行诊断很大程度上也是从这两个方面展开检测，通常会使用抗核抗体检测和抗核抗体谱检测，其在检测中应用最广泛，并且具有较高的敏感性[7]。ELASA法检测ANA目前在检验科较为常用，近年来随着对免疫学研究的深入，自身特异性靶抗原受到重视，ELASA法能够检测的自身特异性抗体种类不断增加，灵敏度和特异性也得到显著提高，对于ANA检测采用ELASA试剂盒，操作简单，基本不受操作技师的个体影响，对于检测标准与检测质量具有良好的控制性[8]。ANA在多数AID患者中都能检出，但仍有很多AID患者ANA呈现阴性，而ANAs则很好的弥补了这一不足，ANAs由ANA、抗ds-DNA等多种抗体组成，相比于单纯的ANA来说，对AID的检测更加全面，在该研究中，女性患者各项阳性率：ANA（75.81%）、Ul-SnRNP（8.06%）、抗SSA（37.10%）、抗SSB（20.97%）、抗核小体（30.65%）和抗组蛋白（37.10%）明显高于男性患者（P＜0.05）。抗ds-DNA、抗SmDl、抗Jo-1、抗Scl-70、抗CNEP-B、抗PM-Scl、抗核糖体P蛋白在性别间对比差异无统计学意义（P>0.05）。该文的研究与其他学者研究结果相似，例如在周莲等人[9]的研究中，通过检测证明了AID患者中，在ANA、Ul-SnRNP、抗SSA、抗SSB、抗核小体和抗组蛋白等指标方面，女性阳性率分别为74.32%、7.73%、38.22%、19.32%、31.56%、36.84%，均高于男性（P＜0.05）。而在其他指标方面，性别差异不明显。另外，经不同检测方法与AID确诊情况对比，结果发现ANA检测的准确率67.01%低于ANAs检测的准确率92.78%（χ2=20.058，P＜0.05）。这与李春江等[10]研究结果类似，说明了AMAs联合检测的优越性。

综上所述，采用抗核抗体谱联合检测对自身免疫性疾病进行诊断，相比于单纯应用抗核抗体检测能够有效提高该病的诊断率，降低失误，对于AID的诊断和治疗具有重要价值。