许春来
(江苏省建湖县人民医院检验科,江苏 盐城 224700)
细菌作为一种原核微生物,具有结构简单以及形态微小的特点,但是肉眼无法直接观察,因此,在临床的诊断和治疗过程中,细菌检验占据十分重要的作用。近年来,伴随细菌检验技术的发展不断成熟和完善,临床上对于细菌鉴定以及药敏结果的分析要求随之不断提高,目前,临床上对于细菌的鉴定方法和技术也相对较多,由于检验操作的过程并不相同,加之容易受到主观因素的影响,将会直接影响鉴定结果[1]。选取我院检验科所接收的264例阳性血液标本,分别采取常规药敏以及直接药敏的检验方法,观察鉴定结果和药敏结果的符合率。
抽取我院2018年10月~2019年10月检验科所接收的264例阳性血液标本,研究时间在,按照不同检验方法分为常规组和直接组。其中,男142例,女122例,年龄16~82岁,平均(46.52±2.47)岁。纳入标准:①患者自愿参与研究;②签署知情同意书。排除标准:①血液系统疾病;②采集血液样本48h内,并未用药或者接受其他治疗;③凝血功能障碍;④资料不全。
留取患者20 mL的血液样本,分别放置含溶血素厌氧菌以及含树脂需氧培养瓶中,并将其放置于全自动血液培养仪器中。对于培养阳性血标本分别采取以下两种方法进行检验。
常规组采取常规药敏试验的方法进行检验。将血液标本放置于血平板、巧克力平板以及麦康凯平板培养,分别放置于浓度为5%、温度为35摄氏度的CO2环境中进行培养,持续20h。取菌落涂片后,进行常规的革兰染色,并根据检验结果进行触酶或者氧化酶试验。利用微生物鉴定仪,进行细菌鉴定以及药敏试验。具体操作步骤如下:使用无菌棉签取菌落,并放置于鉴定管中,混合均匀后静置10 s,出现气泡则为鉴定失败。使用比浊仪将菌液浓度调整为0.5麦氏单位,菌液配置完成后需在60 s内完成操作。最后,将145 μL鉴定管菌悬液转入药敏管当中,充分混匀。药敏和鉴定板卡分别插入AST药敏管以及鉴定管中。输入最终鉴定以及药敏结果,并将药敏以及鉴定板放入仪器当中,关闭舱门,完成检验。
直接组则采取直接药敏试验的方法进行检验。使用无菌注射器抽取10 mL血液样本,将其放置于无菌试管中,使用密度梯度离心法,按照每分钟1500转进行离心处理,处理时间在5~10 min,收集上清液后,将其转移到全新的离心管中,随后按照每分钟3000转进行离心处理,处理时间15m in,去除上清液后,进行PBS洗涤和沉淀。此外,取20 μL悬液涂片进行革兰染色处理,将其倒置于显微镜下继续观察,鉴定细菌为阴性菌或者革兰染色阳性菌。最后,使用无菌棉签取沉淀物,并利用全自动细菌鉴定系统或者药敏系统进行细菌鉴定以及药敏检验。
分别采取以上两种检验方法后,比较两组细菌鉴定结果和药敏结果的符合率。
观察指标确定后,将两组研究对象的指标数据通过SPSS 19.0软件进行统计学进行测评,计数资料采用(n,%)进行统计描述,采用x2检验进行统计推断。当P值小于0.05时,表示两组数据结果有统计学参考价值。
所有血液标本经过检验,阳性检出率为251例(95.08%)。直接组对于革兰阳性球菌的检验符合率53例(20.08%),对于革兰阴性杆菌的检验符合率209例(79.17%),与常规组53例(20.08%)、209例(79.17%)相比并无明显差异,差异无统计学意义(P>0.05)。
直接组对于革兰阴性杆菌的检验敏感率257例(97.35%)以及耐药率256例(96.97%),对于革兰阳性球菌检验敏感率258例(97.73)以及耐药率259例(98.11%),与常规组256例(96.97%)、255例(96.59%)比较并无明显差异,差异无统计学意义(P>0.05)。
对于感染患者来说,体内将会带有耐药性的细菌,此时,若未进一步增强细菌的耐药性,将会导致患者病情加重,增加治疗难度。因此,临床上对于感染患者来说,进行血液细菌学以及耐药性的检验对于临床诊断和后续的用药治疗具有十分重要的作用。近年来,伴随抗生素滥用的问题十分普遍,细菌耐药性以及对于抗生素的敏感性随之发生了巨大的变化,将会导致细菌检验的难度增加,因此,临床上寻求一种有效而又快速的检验方法十分重要,进而提高检验质量,为临床的治疗提供可靠的数据支持[2-3]。
目前,临床上通常采取基因鉴定以及表型鉴定两种鉴定方法,表型鉴定法主要是根据生理变化、具体形态、蛋白质以及细胞组分等方面的变化进行细菌的鉴定,目前,对于大部分医院来说,由于医疗条件有限,难以全面开展基因型鉴定。对于药敏试验的检验方法相对较多,如:稀释法、扩散法以及抗生素浓度梯度法,但是不同检验方法的检验结果也各不相同[4-5]。
常规的检验方法对于阳性血液标本的检出率相对较高,但是药敏试验以及细菌鉴定的速度相对缓慢,难以满足临床诊断和治疗的需求[6]。经过研究,得出以下结果:所有血液标本经过检验,阳性检出率为251例(95.08%)。直接组对于革兰阳性球菌的检验符合率以及革兰阴性杆菌的检验符合率与常规组相比并无明显差异,直接组对于革兰阴性杆菌的检验敏感率以及耐药率以及革兰阳性球菌检验敏感率与常规组比较并无明显差异,差异无统计学意义(P>0.05)。因此可见,直接药敏试验的过程中,处于适当的温度下,对于抑菌环大小进行药敏试验,在此期间无需进行培菌培养,使得鉴定更加快捷和方便,能够为临床的诊断和后续的治疗提供有效的依据[7-10]。对于病情并不严重以及复杂的患者来说,短时间并不会威胁患者生命安全,则可进行常规检查,通常情况下直接进行药敏试验将可以达到检验要求,已经被广泛应用于临床当中。