22q11.2微重复携带者的产前诊断策略*

黄宁，刘艳秋，邹永毅，王欣荣，吴翠婷

（江西省妇幼保健院 产前诊断中心，江西 南昌 330006）

22q11.2 微重复综合征是新近被学者们所熟知的一类综合征，遗传方式为常染色体显性遗传，其表型可呈现正常至不同程度的临床症状，异常临床表现为精神发育迟滞、学习障碍、精神运动发育迟缓、生长迟缓、肌张力减退等[1]。本文回顾性分析江西省妇幼保健院1 例22q11.2 微重复携带者的产前诊断，以期探讨其遗传咨询策略及生育指导。

1 资料与方法

1.1 一般资料

患者，女性，30 岁，孕18+周，G3P1A1，第1 胎足月顺产一女孩，体健；第2 胎无创产前检测提示为22 号染色体异常，于本院行羊水穿刺产前诊断，全基因组测序提示46,XN,dup（22q11.2）×3，引产；现再次怀孕要求行产前诊断。夫妇否认近亲结婚、孕期不良因素暴露史及家族遗传病史。经充分告知，孕妇签署产前诊断知情同意书，于本院实施羊膜腔穿刺术，进行羊水染色体核型分析和染色体微阵列分析。

1.2 方法

抽取夫妇外周血及孕妇羊水，行细胞培养，收获制片，G 显带染色体分析。同时提取夫妇外周血及羊水DNA 基因组DNA，采用Affymetrix Cytoscan 750K基因芯片试剂盒，随机引物法，利用cy3 和cy5 染料分别标记待检样本和对照样本DNA，经杂交、洗脱处理后，扫描分析。

2 结果

2.1 染色体核型分析结果

夫妇外周血染色体及羊水染色体核型分析均未见明显异常。见图1。

2.2 染色体微阵列分析

羊水染色体微阵列分析提示22q11.2（18 648 855-21 464 764）×3，存在2.81 Mb 微重复；母方提示22q11.2（18 631 364-21 460 641）×3，存在2.82 Mb微重复；父方未见异常。见图2。

图1 染色体核型

2.3 随访

该病例术后及产后均进行电话随访，现已足月顺产一男孩，出生时身高52 cm，体重3.9 kg，经体格及超声波检查各项发育指标未见明显异常。

图2 染色体微阵列分析

3 讨论

该疾病最初在2003年由ENSENAUER 等[2]报道，染色体22q11.2 区域基因富集，含有多个低拷贝重复序列（low copy repeats, LCR），被命名为LCR22s，分别为LCR1-LCR8。LCR 在减数分裂期间可以导致相邻DNA 片段发生不对称的同源重组，结果导致染色体的微缺失、微重复、插入、转位等。现已被证实22q11.2 区域的这些LCR22s 介导基因重排，从而导致一些基因组异常，例如DiGeorge/Velocardiofacial syndrome（DGS/VCFS）、猫眼综合征、der（22）综合征及22q11.2 微重复综合征[3]。理论上LCR 介导的基因重排发生重复的和缺失的比例是对等的，但实际上很少发生微重复，本文对1 例再次妊娠22q11.2 微重复综合征的孕妇进行产前诊断并进行了亲本溯源遗传分析。

该例孕妇因既往有22q11.2 微重复综合征妊娠史而来该院行产前诊断，对夫妇双方及胎儿同时进行染色体核型分析及染色体微阵列分析，提示胎儿及母方在22q11.2 均存在2.81 Mb 重复片段。母方通过体格检查及病史询问未见明显异常，2 次妊娠孕中期羊水产前诊断为22q11.2 微重复，第1 次夫妇未行进一步遗传背景检查而选择引产，此次妊娠明确了胎儿微重复片段遗传自表型正常的母亲，孕妇选择继续妊娠。22q11.2 微重复综合征的临床表型可呈现正常，如同此例孕妇，也可出现严重程度不一的临床症状，与DGS/VCFS 存在部分相同临床表现，可出现多系统功能异常，包括心血管、神经、精神、内分泌和免疫疾病[4-5]。文献查明22q11.2 微重复部分患者变异遗传来自正常表型的父母，该疾病具有外显不全，从而导致许多病例未得到临床诊断，这就给遗传咨询、再发风险评估及产前诊断带来很大挑战。ROSENFELD 等[6]对大样本人群数据进行贝叶斯分析，结果表明22q11.2 微重复其外显率存在外显不全，约为21.9%。在现有技术条件下，完全可以对22q11.2 微重复进行明确诊断，但确无法预测其临床表现。对本研究中此例孕妇，其后代将有50%的概率遗传22q11.2 微重复片段。本文中检出的22q11.2 微重复片段为2.81 Mb，非常接近CHRISTOPOULOU 等[7]报道的重复区域，当前研究表明外显率与重复片段大小之间并无关联[8]，对22q11.2微重复高风险人群有必要进行产前诊断或胚胎植入前遗传学诊断。

22q11.2 区域由于缺失或重复的片段较小，传统G 显带染色体核型分析难以诊断，只能检出一些大片段的染色体易位，额外的双着丝粒染色体（猫眼综合征）。该法操作简单，费用低廉，可以同时检测其他染色体异常，临床上常用作筛查手段。荧光原位杂交可以通过特异性的荧光标记DNA 探针与相对应的染色体区域结合，检测该区域有无重复或缺失。该方法敏感性强、特异性高，但正是由于DNA 探针的高度特异性导致1 种探针只能检测1 个位点，对于该探针位点以外的缺失可能存在漏诊[9]。多重连接探针扩增技术利用缺失重复区的多个微卫星标记、短串联重复序列等进行扩增，可以1 次反应中扩增多至50 个靶序列，快速，敏感，操作方便，检测成本低，缺点是有假阳性，某些点突变可能影响探针结合，影响结果判读[10]。染色体微阵列技术可以对众多基因探针的标记、杂交等过程在1 次实验过程中完成，自动化程度高，数据客观可靠，但操作要求高。本研究中采用染色体核型分析和染色体微阵列技术同时检测，既可以一览此家系成员全部染色体结构，又可以对微小拷贝数异常做出判断，从而可以对该家系进行个性化遗传指导及胎儿产前诊断分析。

回顾性分析本研究中该例孕妇，妊娠1 次22q11.2 微重复胎儿后，夫妇双方同时进行染色体核型分析和染色体微阵列检测意义重大，尤其在有再次生育需求时。有研究表明，70%的22q11.2 微重复遗传自表型正常和表型轻微的亲代，在明确亲本来源后再进行产前诊断，有利于对该家系进行科学的遗传咨询及生育指导[11]。对所有22q11.2 微重复病例进行家系调查分析，无论其临床表现严重与否，都是极其重要的，这样才能更好地理解导致异常表型的机制，从而提供更好的遗传咨询。遗憾的是，本例家系调查中夫妇拒绝对生育的第1 个表型正常女孩进行遗传检查，从而无法对其进行完整家系分析。考虑到随访时此例男婴才出生2 天，部分临床症状可能迟发或难以发现，研究人员仍将继续密切跟踪随访。