日常饮用水检验中的微生物检验方法对比研究

王丹 郝俊峰 王敏

【摘 要】研究日常饮用水检验中微生物的检验效果，本文研究分析了2018年1月—2018年12月不同时间逾地点的500份饮用水水样，其中250份应用多管发酵法检测（A组），250份水样采用滤膜法检测（B组），回顾并分析了两种方法检测结果。结果显示，A组检验合格率明显高于B组，P<0.05，差异有统计学意义。由此得出，在生活饮水检验中，多管发酵法比滤膜法的水质检测合格率更高。

【关键词】饮用水检验;微生物检验;饮用水微生物

【中图分类号】R123 【文献识别码】B 【文章编号】1002-8714（2020）01-0107-01

1 资料与方法

1.1一般资料

研究时间在2018年1—12月，研究对象为不同时间不同地点获取的500份饮用水水样，其中250份应用多管发酵法检测（A组），250份水样采用滤膜法检测（B组），A组与B组水样中均包括出厂水样100份、管网末梢水样100份、二次供水水样50份。A组、B组在水样数量、水样来源等方面满足可比性要求，P>0.05，差异无统计学意义。

1.2方法

不同水样均以微生物中的大肠杆菌检验为主，具体检验方法如下：

1.2.1A组

采取多管发酵法，不同水样样本量为10mL，然后将其加入双料乳糖蛋白胨培养液中，在10mL单料乳糖蛋白胨中加入上述1mL样本，量取1mL样本，将其加入到9mL无菌生理盐水中，再在10mL单料乳糖蛋白胨的培养液中加入1mL样本，不同稀释度均需设置5管;每日检测处理后的自来水，接种双料培养基，共5份，每份接种10mL，并将受污染水源确定为检测水源。接种期间：培养箱温度设置：35～37℃，培养时间：22～26h;培养完成后，阴性标准：乳糖蛋白胨培养管没有产酸与产气;阳性标准：培养管出现产酸、产气，此时需在伊红美蓝琼脂板上接种发酵管中的菌落，培养箱内培养。温度：35～37℃，培养时间：18～24h，观察培养基中的菌落变化，选取菌落，并进行革兰氏染色，通过显微镜进行菌落观察与分析。

1.2.2B组

采用滤膜法，使用0.45μm的微孔滤膜对水样进行过滤，整个检验过程如下：采用一次性无菌滤膜（47mm×0.45μm×600）完成水质监测，有多种孔径可满足不同微生物检测要求。本文选择的滤膜孔径为0.45μm，所有膜片均为无菌独立包装，表面有网格，便于菌落计数。使用前应详细阅读使用说明书，并使用无菌镊子夹取无菌滤膜，将其置于灭菌滤床上，放置位置合适后，固定过滤器，于过滤器中倒入100mL水样，打开过滤器闸门，抽滤条件为-0.05Pa。水样过滤后进行培养，取出的样品需要抽气，时间为5s，抽气过程中需要关闭闸门，并取出过滤器，整个操作需要使用无菌镊子完成，避免直接用水接触，然后将滤膜放置到品红亚硫酸钠培养基中。放置过程中滤膜需要放在细菌面，便于其与培养基有效接触，养殖期间避免残留气泡，放置完成后将滤膜倒入平皿并倒置，培养基培养温度为37℃，培养时间为22～26h。

1.3影响日常饮用水微生物检测的因素

1.3.1人员因素

对于微生物检测人员而言，要想保证相关检测工作的顺利开展，应保证其具有扎实的技术能力以及专业素养，如果检测人员的综合素养不能满足检测工作开展的具体要求，也必然会对检测工作的开展以及检测结果的有效性产生一定的影响。

1.3.2环境因素

在实际的微生物检测过程中，实验室环境应配备专门的微生物检验无菌操作室以及配套检测设备，并在试验开始之前对无菌操作间进行消毒处理，在进行消毒处理过程中，应做好相应的消毒方法选择工作。

1.3.3设备因素

对于微生物检测而言，其主要涉及到的设备主要包括干热灭菌锅、高压灭菌锅以及恒温培养箱等等，上述几类设备温度一定出现较大偏差，就极易给检测数据的准确性带来较大的影响。因此，在日常工作过程中，相关检测人员应对设备温度进行定期的校准。

1.4观察指标

观察不同方法对应的水样检验合格率。

1.5统计学方法

借助统计学软件SPSS21.0处理检验结果，检验结果为计数资料，用（n，%）表示，进行x2检验，差异有统计学意义，即P<0.05。

2 结果

见表1。

3 讨论

通过对日常饮用水微生物检验方法的研究，便于明确不同检验特点，进而更好地控制饮用水质量，保证饮水安全[1]。多管发酵法是常用的饮用水检验方法，该方法是在检验过程中依据稀释培养测数法对待测样品进行多重稀释，直到稀释液接种到无或者极少细菌生长繁殖的培养皿中。按照没有生长的最低稀释度、最高稀释度，依据“最大或然数”理论，得到样品单位体积中的细菌数。最初稀释期间的检测结果较大，但是随着反复稀释，最终结果趋近于真实值。实际应用期间需要根据具体情况合理确定检验要求数目。

本研究通过采取多管发酵法，可使应用水合格率达到98.00%。在饮用水检测期间，滤膜法通过滤膜过滤器对水样进行过滤，获取一定的细菌微生物，通过将滤膜在培养基上培养，膜上可逐渐生长出大肠菌群，便于直接进行计数。滤膜法在应用过程中具有操作简单、检测快速等优点，该方法在杂质较少的水样检测中应用较多，整个操作过程对无菌要求较为严格，很容易因为外界环境因素影响检测结果。综上所述，根据研究结果，多管发酵法的检验合格率（98.00%）高于滤膜法（80.80%）。虽然上述两种方法都能够用于生活饮用水的微生物检验，但多管发酵法检验的合格率更高，因而在生活饮用水微生物检验方面更具有价值[2]。

参考文献

[1] 薛秀萍.探究生活飲用水微生物检验方法及评价标准[J].世界最新医学信息文摘，2018，18（51）：258.

[2] 李慧.生活饮用水微生物检验方法和评价标准探讨[J].世界最新医学信息文摘，2018，18（13）：130+151.