流式细胞术免疫分型对多发性骨髓瘤的诊断价值分析

魏双羽

（西安交通大学第一附属医院，陕西 西安 710061）

多发性骨髓瘤是一种常见的恶性浆细胞病，常见于B细胞淋巴瘤，是一种主要的骨髓浆细胞增殖障碍。易伴有肾损害、多发溶骨性疾病、贫血、高钙血症等疾病。同时，在发病后，患者免疫球蛋白产生障碍，容易发生感染[1]。不过，由于此类疾病通常没有明显的早期特异性症状，因而可能会漏误诊，耽误患者的治疗。所以，应当采取有效的检查方法，尽早检出疾病，为患者治疗提供依据。基于此，本文选取2018年2月—2019年2月医院收治的多发性骨髓瘤患者64例，探讨流式细胞免疫分型在多发性骨髓瘤中的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取多发性骨髓瘤患者64例，选取时间范围是2018年2月-2019年2月，男36例，女28例，年龄42～72岁，平均(57.6±3.5)岁。其中52例合并骨病变、48例合并贫血、36例合并肾功损害、8例合并血钙增高。患者DS分期包括6例ⅠA期、8例ⅠB期、12例ⅡA期、20例ⅡB期、12例ⅢA期、6例ⅢB期。

纳入标准：均符合多发性骨髓瘤的诊断标准，并经骨髓细胞形态学检查证实。他们获得了研究的知情同意和医学伦理委员会的批准。排除标准：有精神疾病的人，有血液系统其他疾病的患者，有严重的心、肝、肾等器官功能障碍的患者。

1.2 方法

1.2.1 流式细胞术：采用流式细胞术收集肝素抗凝骨髓液。选择5～10×106个细胞/ml的单细胞悬液，每100 ul单细胞悬液与20 UL抗体融合，室温避光孵育20 min。加入氯化铵溶血剂。1500 rpm离心10 min，取出上清，用0.5 ml PBS重悬。PBS冲洗2次，避光破碎15 min。加入细胞质抗体，孵育30 min，洗涤一次，用0.5 ml PBS复苏。使用相关软件进行数据收集和分析。每个试管中分析10000个细胞，荧光强度轴设置为对数模式。通过同型比较的方法确定了截断值。在抗原轴方向，若总位移超过截断值的20%，则考虑抗原阳性表达。

1.2.2 毛细管免疫分型电泳：全血标本以3000 r/min离心15 min分离血清。将样品及其配套试剂置于自动毛细管电泳装置中进行全反应和电泳。扫描并检测结果。每个样本进行6次血清蛋白电泳，1次为标准血清蛋白电泳。1次为加入血清蛋白电泳的反应电泳，分别为k、IgG、IgA和IgM抗体。如标准血清蛋白电泳图谱，有底部狭窄、高尖异常蛋白峰，则判定为阳性。

1.2.3 毛细管血清蛋白电泳：使用全自动毛细管电泳仪与配套试剂，全血标本以3000 r/min离心15 min分离血清。采用毛细管电泳进行电泳分离、扫描和结果测定。如果扫描图像中显示的区域为底端狭窄或高端异常蛋白峰，则为阳性。

1.3 评价指标

比较三种检查方法的检出率情况。

1.4 统计学处理

采用SPSS 20.0软件对数据进行处理。计量资料以均数±标准差表示，t检验；计数资料以数或率表示，卡方检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

所选64例患者中，流式细胞术检出检出率为96.88%，分别高于毛细管免疫分型电泳的84.38%和毛细管血清蛋白电泳的81.25%，有显著差异（P＜0.05）。见表1。

表1 不同检查方法检出率情况的比较[n（%），n=64]

3 讨 论

在临床上，多发性骨髓瘤属于B淋巴细胞淋巴瘤的范畴，具有复杂的临床表现，但是特异性不足，因而在早期诊断时容易发生漏误诊，导致患者治疗受到延误。在具体的临床诊断当中，除了骨髓涂片细胞形态学检查之外，还有毛细管血清蛋白电泳、毛细管免疫分型电泳等方法，能够对骨髓瘤细胞在血液中产生释放的M蛋白有效检出，同时创伤更小，快速经济[2]。而流式细胞术免疫分型在实现上述目标的同时，还能够对浆液细胞良恶性快速鉴别，对恶性浆液细胞客观评估，同时对骨髓瘤细胞免疫表型异质性、胞内轻链克隆性等情况加以反映，因而在临床诊断中，表现出了优于其它几种方法的特点。流式细胞术在多发性骨髓瘤中的应用，能够发挥出很多方面的作用。例如，对浆细胞免疫表型及克隆性的检查，可以对浆细胞良恶性、反应性等情况加以明确。该方法能够对瘤细胞特有异常免疫常型加以识别，进而在复杂骨髓细胞群当中，将微量瘤细胞检出[3]。浆细胞特异性表面标志物主要是CD38、CD138。此外，在正常浆细胞中，CD45弱表达，CD19表达，CD56不表达；在骨髓瘤细胞中，CD45表达减低或不表达，CD19弱表达或不表达，CD56表达升高。在正常浆细胞当中，cKappa轻链、clabda轻链呈现出多克隆表达，在骨髓瘤细胞中则为限制性表达。流式细胞术也能够对这些变化准确区分，从而提高对多发性骨髓瘤的诊断效果。

综上所述，在多发性骨髓瘤的临床诊断中，采用流式细胞术免疫分型的检查方法，能够达到更高的检出率，具有更高的诊断价值。