阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白和褪黑激素水平与简易智力状态检查量表评分的相关性研究

张雨桐 王晟东 李静 宋明芬 王姝琪 闫盼

阿尔茨海默病的主要病理表现为大脑中Tau 蛋白过度磷酸化及β 淀粉样蛋白沉积[1-3]。大脑中抗氧化系统功能异常，清除氧自由基能力减弱与阿尔茨海默病的病理过程密切相关[4]。硫氧还蛋白是细胞氧化/还原状态重要调节分子，参与机体多种生物学活性[5]。褪黑激素是一种由松果体分泌的具有多种生物功能的内源性激素，也具有抗氧化应激等作用[6]。它们均可以通过降低氧化应激反应从而发挥神经保护作用[7-11]。本研究通过检测血清中硫氧还蛋白和褪黑激素水平，比较分析其与阿尔茨海默病的相关性，现将研究结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选择杭州市第七人民医院老年精神科2017年9 月至2018 年11 月住院治疗的阿尔茨海默病患者31 例，其中男10 例，女21 例，年龄67～90（79.23±6.07）岁。阿尔茨海默病患者诊断符合美国神经病学语言障碍卒中-老年性痴呆以及相关疾病学会（NINCDSADRDA）的阿尔茨海默病诊断标准。选择2018 年3 至6 月对杭州市上城区某社区进行痴呆早期筛查过程中获得轻度认知功能障碍的患者28 例，其中男11 例，女17 例，年龄65～85（75.18±6.38）岁，总体认知功能比较正常，但主诉有记忆障碍，有客观记忆受损依据，尚不能诊断其患有阿尔茨海默病；以及同一社区健康老年人40 例，其中男17 例，女23 例，年龄65～86（75.85±6.55）岁，无痴呆临床症状及其他精神系统疾病，一般认知功能及记忆正常。排除标准：年龄＜65 岁；糖尿病患者；有脑卒中病史患者；患有其他重性精神疾病者；家属不配合者等。3 组对象性别、年龄比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。在入组时均被告知相关事宜，且签署知情同意书。本研究涉及的医学伦理已通过杭州市第七人民医院伦理委员会的审查。3 组对象依据学历不同简易智力状态检查量表（mini-mental state examination, MMSE）评分界限的说明见表1。

表13 组对象依据学历不同MMSE 评分界限的说明（分）

1.2 方法

1.2.1 标本采集 3 组对象均于清晨空腹时抽取静脉血5ml 于EDTA 抗凝管中，以3000r/min 离心10min，收集上清液，分装后于-80℃冰箱内保存。

1.2.2 血清硫氧还蛋白和褪黑激素水平测定 采用酶联免疫法，试剂盒购自南京建成生物工程研究所，检测过程严格按试剂盒说明书要求进行。测定过程中用的酶标仪为BIO-RAD 公司的iMark Microplate Reader，洗板机为BIO-RAD 公司的ImmunoWash 1575 Microplate Washer。

1.2.3 MMSE 评分 MMSE 量表评估由两位副主任医师完成。MMSE 评分包括语言、计算力、视空间、地点定向力、时间定向力、注意力、即刻记忆、延迟记忆等7 个方面，共30 个条目，总分为30 分，评分与智力状态水平呈正相关。

1.3 统计学处理 采用SPSS 18.0 统计软件，符合正态分布的计量资料以表示，3 组间比较采用单因素方差分析；两两比较采用LSD-t法。相关性分析采用Pearson相关。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.13 组对象血清硫氧还蛋白和褪黑激素水平、MMSE评分比较 见表2。

由表2 可见，阿尔茨海默病组的血清硫氧还蛋白水平、褪黑激素水平均低于健康对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.01），而轻度认知障碍患者血清硫氧还蛋白水平和褪黑激素水平与健康对照组相比差异均无统计学意义（均P＞0.05）。

2.2 阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白、褪黑激素水平和MMSE 评分相关性 见图1-3。

表23 组对象血清硫氧还蛋白和褪黑激素水平、MMSE 评分比较

图1 阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白水平与MMSE 评分的散点图

图2 阿尔茨海默病患者血清褪黑激素水平与MMSE 评分的散点图

图3 阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白水平与褪黑激素水平的散点图

由图1-3 可见，阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白水平与MMSE 评分、血清褪黑激素水平与MMSE 评分，血清硫氧还蛋白水平与褪黑激素水平均呈正相关（均P＜0.05）。

3 讨论

阿尔茨海默病的主要病理特征是Tau 蛋白过度磷酸化导致的神经纤维缠结和β 淀粉样蛋白沉积导致的老年斑，研究表明这两者均与大脑内自由基清除能力不足、氧化损伤导致的神经元凋亡有关[12]。硫氧还蛋白系统是机体内重要的抗氧化系统之一，广泛分布在哺乳动物的不同组织中，神经系统中有高水平的硫氧还蛋白分布。硫氧还蛋白主要分布在细胞质和细胞核里，在清除氧自由基、调节氧化还原平衡等方面起重要作用，还在细胞生长、增殖、分化及抑制细胞凋亡等过程发挥作用[13]。Lovell 等[14]发现阿尔茨海默病患者大脑中硫氧还蛋白水平显著降低，特别是杏仁核和海马区的硫氧还蛋白水平显著下降。而人硫氧还蛋白转基因鼠可以缓解海马区氧化应激损伤[15]。但是，鲜有阿尔茨海默病患者外周血血清硫氧还蛋白水平相关报道。

本文研究表明，阿尔茨海默病患者的外周血血清硫氧还蛋白水平显著低于健康对照组，而轻度认知功能障碍组与健康对照组之间血清硫氧还蛋白水平差异无统计学意义。这说明外周血血清硫氧还蛋白水平的变化可能在阿尔茨海默病发生之后。阿尔茨海默病的病理改变消耗了机体抗氧化蛋白之一的硫氧还蛋白。而且阿尔茨海默病患者血清硫氧还蛋白水平与MMSE 评分明显正相关。本研究结果表明外周血血清硫氧还蛋白水平可以在一定程度上反映出阿尔茨海默病的严重程度。但是硫氧还蛋白水平在阿尔茨海默病患者中的变化并不具有特异性，事实上我们还未发表的数据表明血管性痴呆患者的血清硫氧还蛋白水平也是显著低于健康对照组的，而且其他神经退行性疾病中也有类似结果[16]。

除了硫氧还蛋白以外，最近有研究表明褪黑激素在清除氧自由基方面也起着重要作用。褪黑激素在调节昼夜节律[17]、睡眠和抗氧化等多项生理功能上起作用，而且对学习记忆也有一定的调节作用。我们检测发现阿尔茨海默病患者外周血血清褪黑激素水平显著低于健康对照组，而且阿尔茨海默病患者血清褪黑激素水平与MMSE 评分呈正相关。进一步分析又发现血清硫氧还蛋白水平与血清褪黑激素水平呈正相关。这说明周血血清褪黑激素水平也可以在一定程度上反映出阿尔茨海默病的严重程度。但是阿尔茨海默病患者中，外周血血清硫氧还蛋白水平和褪黑激素水平的这一变化到底是因是果，硫氧还蛋白（或其诱导物）或褪黑激素是否可以作为阿尔茨海默病的治疗靶点，这些问题还有待相应的细胞实验、动物实验甚至临床试验等来进一步验证。