李洁
(夏邑县人民医院 感染内科,河南 商丘 476400)
乙型肝炎在全世界范围内发病率较高,有研究显示每年因乙型肝炎病毒而出现终末期肝硬化和肝癌的患者所占比例为15%~25%,因此需尽早诊断乙型肝炎病毒感染,实施相应的治疗干预[1]。乙型肝炎病毒血清标志物检测和HBV DNA检测属于目前检测乙型肝炎病毒的主要方法[2]。本研究应用化学发光微粒子免疫测定法和荧光定量聚合酶链反应测量乙型肝炎患者机体血清HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb及HBV DNA水平,并检测HBcAb IgM阳性患者血清HBV-DNA水平,探讨乙型肝炎血清标志物与HBV DNA水平的相关性。
1.1 一般资料选取2018年1月至2019年1月夏邑县人民医院收治的250例乙型肝炎患者,其中男176例,女74例,年龄13~69岁,平均(42.6±5.8)岁,慢性乙型肝炎患者223例,HBcAb IgM阳性乙肝患者27例。确诊为乙型肝炎,排除严重肝肾疾病及肿瘤疾病患者。患者自愿参与本研究并签署知情同意书。本研究经夏邑县人民医院医学伦理委员会审批通过。
1.2 检测方法首先测量患者HBV M水平,所用测量仪器为荷兰Philips公司生产的HKDHG5500型自动化学发光仪,定期检测HBV M水平,所应用的检测试剂为仪器配套试剂。各项指标阳性判定标准为:HBsAg在50 IU·L-1及以上;HBeAg在1 S/CO及以上;HBcAb在1 S/CO及以上;HBsAb在10 IU·L-1及以上;HBeAb在1 S/CO及以下;HBcAb IgM在1 S/CO及以上。在检测HBsAg时,采用试剂盒稀释液进行500倍稀释后进行检测。然后开展HBV DNA定量检测,HBV DNA水平检测方法为FQ-PCR法,试剂盒购自上海斯诺科基因有限责任公司,仪器为美国GE公司生产的6300T RCR System。对参数做如下设置。93 ℃,2 min;93 ℃,45 s;55 ℃,1 min。10个循环。93 ℃,30 s;55 ℃,45 s。30个循环。在完成反应过程后,在Analysis菜单下,选择Analyze,使仪器自动对结果进行分析,按照仪器和试剂盒说明书开展详细操作。
1.3 统计学方法采用SPSS 17.0统计软件进行数据处理,乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平、HBcAb IgM和HBV DNA水平采用Pearson相关性分析,P<0.05为差异有统计学意义。
2.1 慢性乙型肝炎患者HBV M水平和HBV DNA水平相关性分析HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中HBsAg、HBeAg水平均与HBV DNA水平呈正相关(r1=0.541,r2=0.599,均P<0.05);HBcAb、HBeAb水平均与HBV DNA水平无关(r1=0.060,r2=0.114,均P>0.05)。
2.2 乙肝患者HBcAb IgM和HBV DNA水平相关性分析HBcAb IgM阳性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平无关(r=0.171,P=0.217)。
HBV DNA水平可直接体现乙型肝炎病毒复制程度,其在乙型肝炎病情的早期诊断和疗效观察中发挥重要作用。本研究通过对单项HBV M水平和HBV DNA水平进行相关性分析后发现,HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中,HBsAg、HBeAg水平均与HBV-DNA水平呈正相关,这也和曹东华等[3]研究报道相符。HBsAg虽然属于乙型肝炎病毒感染的标志物,但该标志物检测结果为阴性时,并无法排除乙型肝炎病毒感染。不同于HBsAg,HBeAg在HBsAg阳性患者机体血清中存在,若患者机体血清HBeAg结果为阳性,则提示其机体内乙型肝炎病毒复制和传染性均较强,是体现乙型肝炎病毒复制的重要血清标志物。HBeAg、HBV DNA水平尽管都能有效反映乙型肝炎病毒在机体内复制的活跃度,但在不同的乙型肝炎病毒基因型中其水平或许存在一定差异。
本研究结果显示,HBcAb、HBeAb水平均与HBV DNA水平无关,但该结果无法说明HBcAb、HBeAb水平与HBV DNA的水平无明显关联。HBeAg病毒可能被免疫清除或病毒处于静息状态,但仍可复制。HBcAg来自于C基因区的第2个ATG翻译,并且和HBeAg存在着大量相同的氨基酸[4]。HBcAg检测难度大,可检测相应抗体的HBcAb,其属于人体感染乙型肝炎病毒后出现速度最快的抗体。本研究结果中HBcAb IgM阳性患者HBcAb IgM水平和HBV DNA水平无关,可能是研究对象中的HBcAb IgM阳性数量少,同时早期阶段HBV DNA并不会出现较高水平的复制[5]。
综上所述,慢性乙型肝炎患者机体血清HBeAg、HBsAg水平均与HBV DNA水平呈正相关,通过对HBV M和HBV DNA水平进行定量检测,可有效监测HBV的动态变化,从而为临床疾病诊断和治疗提供参考。