采用超高效液相色谱－串联质谱法准确测定辣条中是否含有5种罂粟碱

容欧

辣条是利用面粉添加各种调味料制作而成的，其消费群体主要是青少年和儿童，因此，关于辣条的食品安全必须受到相关部门的监督。随着人们对辣条喜爱程度和安全意识的提高，其是否含有罂粟碱已成为消费者关注的重点。但辣条是一种调味面粉制品，其中添加了多种调味料、色素等，对检测结构造成很大干扰。因此，建立有效的罂粟碱检测方法成为辣条食品检测的重点。本文采用超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS/MS）而建立了辣条中罂粟碱含量的分析方法，以期为相关监管部门提供参考。

一、前期处理

辣条是一种含有不同香料、色素、动植物油的调味品。罂粟碱、可待因、蒂巴因、那可丁和吗啡是基本的有机化合物，与酸反应生成水溶性盐，与碱结合溶解有机试剂。因此，本文在相同浓度的标准溶液和不同的萃取剂条件下，研究了同一基体热轧板中5种目标化合物的回收率。试剂共分为两组，第一组用20ml的0.1mol/L HCT溶液、乙腈-HCI（1︰1）和乙腈-水（1︰1）作为提取液，第二组用20ml的2.5%氨化甲醇、5%氨化甲醇和10%氨化甲醇作为提取液。用同一种辣条加标作为平行试样，以上述两组试剂为萃取液，第一组萃取液提取后通过固相萃取柱进行纯化，再用有机溶剂洗脱；第二组萃取液提取后，氨化甲醇通过正乙烷浓缩会去除油脂。表1显示了注射检测后尖端区域之间的面积对比。

由表1可知，当采用0.1mol/L的HCI溶液作为提取液时，第一组所有目标物质的响应峰面积最大；当采用以5%氨化甲醇作为提取液时，第二组所有目标物质的响应峰面积最大。而第一组与第二组的定量比较表明，5种目标物质在酸性条件下的响应峰较高，这可能是因为目标化合物是碱性物质，在酸性水溶液中易形成水溶性盐，萃取效率高，故选用稀盐酸溶液（0.1mol/L）作为萃取溶剂。

二、实验方法

1.提取。在称取样品的时候，要精确到0.01g，确保样品均质达到2g。再将样品分别放置到聚四氟乙烯离心管中，加入10ml浓度为0.1mol/L的盐酸，摇匀后采用超声提取器进行10分钟，然后采用5000r/min离心器进行5分钟。将离心后得到的上清液放到另外的导管之中，再加入10ml浓度为0.1mol/L的盐酸，重复上面的步骤，再提取出上清液。在经过两次离心提出的上清液中放入10ml的正己烷，经过30s的涡旋之后静置5分钟，然后利用5000r/min的离心器去除上层的己烷层。

2.净化。罂粟碱的主要净化方法有液体萃取法、QEChERS法和块状法相位提取。其中，液体萃取过程中会消耗大量有机溶剂，并不适合数量较多的测定；QEChERS法操作简单，但净化效果不佳，回收率偏低；而块状法相位提取是依据生物碱在酸浸提液中的阳离子状态，采用稀盐酸萃取，添加和纯化5种生物碱的3种SPE-列，经过McX、WCX、HLB柱进行萃取。结果表明，块状法相位提取的固相萃取柱对5种生物碱的回收率均有影响，McX柱具有较高的净化估计率。因此，本实验选择块状法相位提取固定相的McX柱作为SPE净化柱。用5ml甲醇和5ml水活化SPE-列，并加注到McX柱中，然后用5ml水和50%（V/V）洗涤和洗脱甲醇，洗涤速度为2-3mL/min，待流出液全部流出后，进行5分钟以上的减压抽干。将收集到的洗脱液置于15ml离心管中，使用氮气进行干燥之后，放置到含有甲醇的溶液之中，然后通过0.22μm滤膜后得到体积为1ml的固体，放置等待测量。

三、结果与讨论

用空白基质提取物制备工作曲线。将化合物峰面积作为纵坐标，参比浓度（μg/L）作为横坐标，采用表2中的线性方程式进行计算，可以得出样品中待测物质的浓度。根据线性比（RSN=3）的原理，可以得出5種检测物的检出限，并依据（RSN=10）的原理得出5种检测物的定量限。具体如表2所示。

本文通过超高效液相色谱-串联质谱法（UPLC-MS）来测定辣条中吗啡、可待因、那可丁、罂粟碱和蒂巴因5种罂粟碱的含量，主要是采用超声提取、固相萃取、固相纯化、基质外标的方法，利用线性比相关方法检测出5种罂粟碱的检出限与定量限，从而对待检测物质的浓度与性质进行分析。本次实验共采用30批不同品牌的辣条进行检测，平均回收率达到70.2%-103.2%，相对标准偏差为1.7%-8.5%。结果表明，30批辣条均未检测出以上5种罂粟碱成分，说明生产企业并未在辣条中添加有害罂粟碱。不过，监管部门仍然需要加强监管，促进行业健康发展。