陈虞超1, 郭生虎1, 关雅静1, 朱永兴1, 安 钰, 刘 华, 李 明
(1.宁夏农林科学院农业生物技术研究中心, 银川 750002;2.宁夏农林科学院荒漠化治理研究所, 银川 750002)
金莲花(TrolliuschinensisBunge.)为毛茛科(Ranunculaceae)金莲花属(TrolliusL.)多年生宿根草本植物,以干燥花入药[1],可治疗口疮、喉肿、浮热牙宣、耳疼、目痛、明目、解岚瘴等症[2-3],在呼吸道感染、咽炎、扁桃体炎、支气管炎等方面具有较好的疗效[4-5]。金莲花属临床最常用的中药材之一,原材料主要来源于野生资源。长期以来,掠夺式的采摘不仅导致金莲花野生资源日渐稀少,而且对生态环境造成巨大破坏[6]。目前,金莲花野生资源的采摘已无法满足急剧增长的市场需求,开展人工种植势在必行,其中,种苗繁育尤为关键。金莲花种苗主要依靠种子进行繁殖,其种子极小,且存在生理休眠现象,自然条件下萌发率不足10%[7-9]。传统育苗主要采用大田直播法和温室平床育苗法,但由于金莲花种子小,萌发率低,采用大田直播法,存在播种不均、出苗缓慢、出苗率低、出苗不齐等问题[10];采用温室平床育苗法,则存在种子用量大、易倒苗、移栽成活率低等问题。因此,亟待探索出一种新的育苗技术。
穴盘育苗技术在蔬菜、苗木的种苗繁育中应用较广泛[11-13],近年来在中药材种苗繁育中也得到借鉴,已被成功应用到杜仲[14]、甘草[15]、玛咖[16]等中药材上,且表现出显著优势。鉴于此,本研究将穴盘技术借鉴到金莲花的种苗繁育中,主要对种子萌发诱导技术、育苗基质配比、播种时间进行筛选研究,旨在建立金莲花高效的穴盘育苗技术体系,为其标准化、规模化种植提供技术支撑。
金莲花种子采自河北围场县人工种植的金莲花植株,GA3购自Sigma公司,玻璃纤维滤纸购自Whatman公司,泥炭土购自Pindstrup公司,蛭石购自河北博翔矿产公司,其他试剂为国产分析纯。试验地点位于宁夏农林科学院园艺研究所日光温室(38°53′79″N,106°08′38″E)。
1.2.1GA3浓度的筛选
金莲花种子经蒸馏水浸泡24 h后,用70%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗3次,再用0.1% NaClO消毒15 min,无菌水冲洗5次。选取消毒后的种子100粒,置于1.5 mL的离心管中,分别加入1 mL浓度为5、10、20、40、80 mmol·L-1的GA3水溶液,浸泡处理48 h,然后将种子摆放在铺有湿润玻璃纤维滤纸的无菌培养皿(规格Φ 9 cm)中,在25 ℃、湿度80%、无光照条件下培养,研究GA3浓度对金莲花种子萌发的影响。
1.2.2GA3处理时间的筛选
选择24,48,72,96 h共4个不同处理时间,分别开展金莲花种子萌发诱导试验,研究处理时间对金莲花种子萌发的影响。
1.2.3育苗基质的筛选
在日光温室,于4月上旬,将泥炭土和蛭石分别按体积比1∶0、2∶1、1∶1混合,配制成不同的育苗基质,然后将基质分别装入穴盘(PE材质,50孔)中,压实。在基质中间打直径1 cm、深度1 cm的种植孔,每孔播5粒经GA3处理后的金莲花种子,然后覆盖1~2 mm厚度的基质,抹平,浇透水。以后,每周利用微喷浇水1次。研究不同育苗基质对金莲花出苗及幼苗生长的影响。
1.2.4播种时间筛选
在日光温室,选择4月上旬、5月上旬、6月上旬,3个不同时间段,分别开展金莲花穴盘育苗的播种,研究不同播种时间对金莲花出苗及幼苗生长情况的影响。
1.2.5实验数据统计
种子萌发试验每个处理10皿,每皿100粒种子,重复3次。育苗试验每个处理为10片穴盘,每片50穴,重复3 次。种子萌发试验每隔12 h观察1次,记录初始萌发时间(皿中萌发种子的粒数大于5),待各处理萌发的种子数不再增加时(10 d后)视为萌发完全,统计每个处理的萌发率,萌发率(%)=(同一处理每个平皿的萌发率之和/30)×100%。育苗试验每24 h观察1次,记录初始出苗时间(单片穴盘中出苗的穴数大于5),待各处理出苗数不再增加时(15 d后)视出苗完全,统计每个处理的出苗率,出苗率(%)=(同一处理每片穴盘的出苗率之和/30)×100%。幼苗生长情况调查:待出苗后,每7 d观察1次,调查幼苗的苗高和根长度,每个处理每次调查10株,重复3次。
以蒸馏水处理为对照,利用不同浓度的GA3处理金莲花种子,结果发现,对照组初始萌发时间为144 h,萌发率为27.5%。GA3处理可显著缩短初始萌发时间,但其浓度高低对初始萌发时间无显著影响,均为处理后96 h;GA3处理可显著提高萌发率,且萌发率随处理浓度升高而升高,浓度为20 mmol·L-1时,萌发率到达最高,为78.1%;但当浓度超过40 mmol·L-1时,萌发率反而降低(见表1)。
表1 不同浓度GA3对金莲花种子萌发的影响
GA3浓度/(mmol·L-1)初始萌发时间/h萌发率/%0144a27.5e596b 49.3d1096b 66.2c2096b 78.1a4096b73.7b8096b66.1c
注:同列数据不同小写字母表示差异显著(p<0.05)。下同。
利用20 mmol·L-1GA3处理金莲花种子,处理时间分别为24、48、72、96 h,结果发现,处理时间对初始萌发时间无显著影响,但对萌发率存在显著影响,萌发率随处理时间延长而升高,处理72 h,萌发率达到最高,为96.9%,但处理96 h时,萌发率又有所降低(见表2)。
表2 GA3不同处理时间对金莲花种子萌发的影响
诱导时间/h初始萌发时间/h萌发率/%2496a53.4d4896a77.5c7296a96.9a9696a91.3b
分别以1∶0、2∶1、1∶1(体积比配比编号1、2、3)的泥炭土、蛭石混合配制育苗基质,开展育苗试验。结果发现,不同基质的初始出苗时间无显著差异,均为播种后9 d,但出苗率存在显著差异,配比2的出苗率最高,达到98.6%(见表3)。不同基质的幼苗生长情况不一,苗高、根长存在显著差异,配比2的幼苗苗高最高,达到14.3 cm(出苗70 d后),根最长,达到9.13 cm(出苗42 d后)(见图1、图2)。
表3 不同基质对金莲花出苗的影响
配比编号初始出苗时间/d出苗率/%19a83.4c29a98.6a39a92.5b
分别在4月上旬、5月上旬、6月上旬,3个不同时间段,开展金莲花穴盘育苗试验。结果发现,较4月上旬、5月上旬而言,6月上旬初始出苗时间显著缩短,为播种后6 d。但不同播种时间,金莲花的出苗率无显著差异(见表4)。在育苗后期(出苗后56~70 d),不同播种时间的幼苗苗高存在显著差异,4月上旬播种的金莲花幼苗苗高最高,达到14.6 cm(出苗70 d后)(见图3)。
图1 不同基质对金莲花幼苗苗高的影响
图2 不同基质对金莲花根长度的影响
表4 不同播种时间对金莲花出苗的影响
播种时间初始出苗时间/d出苗率/%4上旬9a98.9a5上旬9a98.8a6上旬6b99.1a
图3 不同播种时间对金莲花幼苗苗高的影响
金莲花种子存在休眠现象,萌发率很低,是制约其育苗技术发展的主要因素[17]。本研究发现,GA3处理可显著缩短金莲花种子初始萌发时间,提高萌发率,而且随着GA3浓度的升高以及处理时间的延长,金莲花种子萌发率呈现逐渐升高的变化趋势,但当GA3浓度过高(达到40 mmol·L-1)或处理时间过长(达到96 h)时,金莲花种子萌发率又呈现降低的趋势,这与顾增辉等[8]、李娜等[9]的研究报道相一致。
基质是穴盘育苗技术的关键,直接影响种苗的生长发育[18]。在蔬菜穴盘育苗中,单一基质往往不能满足需要,常常将多种基质混合后应用,这对穴盘苗的生长更为有利[19]。在穴盘育苗生产实践中,多使用泥炭土、蛭石等按不同配比混合后作为育苗基质,取得了较好的效果[20]。本研究发现,以泥炭土、蛭石按体积比2∶1混合后作为金莲花穴盘育苗基质,出苗率最高,幼苗生长最好,这与刘行等[21]的研究报道一致。范翠丽等[17]研究发现,纯泥炭土更加适宜作为金莲花穴盘育苗的基质,但其出苗时间为18 d,较本研究延长了1倍,这可能是由于温度等其他培养条件不一致造成的。本研究以穴盘作为育苗容器,具有成本低、移栽便捷等优点,但是,由于穴孔深度(10 cm)的影响,金莲花幼苗根系生长受到一定抑制,而且在育苗后期(出苗49 d后),根的生长受限较为明显,其长度难以准确测量,不同处理条件下的表现趋于一致。
播种时间也是穴盘育苗技术的关键环节,播种时间的确定,首先要考虑育苗周期内气温、光照等环境条件对育苗效果的影响,其次是育苗周期与实际生产周期、生产条件的衔接。本研究发现,6月上旬播种,出苗时间缩短了1/3,但后期(出苗后42 d)过高的气温导致金莲花幼苗的生长受到较大抑制。在宁夏境内,适宜金莲花种植的区域为六盘山地区,5—8月份,该地区气温较稳定、降雨量较集中,适宜开展金莲花穴盘苗的移栽,金莲花育苗周期一般在3个月左右,在4月上旬开展金莲花穴盘育苗,既能保证金莲花幼苗正常生长,又能与移栽等实际生产较好的衔接。因此,金莲花穴盘育苗的最佳播种时间为4月上旬。
随着中药材人工种植规模的不断扩大,药材种苗缺口问题日趋严重。穴盘育苗技术具有较大优势,在中药材育苗上的应用尚处在起步阶段,很可能是今后需要突破的重要领域。本研究建立了金莲花的高效穴盘育苗技术体系,对推动宁夏及周边适宜地区金莲花人工种植的发展提供了技术支撑,具有较重要的意义。