食品检测实验室质量控制与管理液相色谱

王海澍　王云衢

罗丹明B（Rhodamine B）又称玫瑰红B，或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜红桃色的人工合成染料，曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B致癌，现已不允许用作食品染色。作为一种具有潜在的致癌、致突变性的心脏毒性的人工合成碱性荧光染料，罗丹明B在市场上被不法商贩添加于调味品如辣椒面、辣椒酱、花椒、火锅底料等中，从中牟取利益。我国各地食品药品监督管理局曾多次对非法添加罗明丹B进行专项检查。因此，调味品中罗丹明B的测定研究可为食品监管部门提供技术支持，在保障食品安全方面具有重大意义。

1.仪器设备

安捷伦液相色谱-质谱联用仪1260-6460（软件版本：MassHunter Version B.06.00）;SPS202F电子天平，梅特勒-托利多（常州）称量设备系统有限公司

2.试剂及标准物质

甲醇，色谱纯;甲酸（纯度88%）;罗丹明B（纯度：98.6%）lot：40815。

标准溶液配制：准确称取按其纯度折算为100%质量的标准品0.0100g，置于100mL容量瓶中，甲醇定容，配制储备液（0.1mg/mL）;中间储备液：取1mL标准储备液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，中间储备液浓度（1000ng/mL）;标准使用液：取1mL中间储备液于100mL容量瓶中，用甲醇水（1∶1）定容，配制成标准使用液（10ng/mL）;分别移取标准使用液50、100、250、500、750μL，用甲醇水（1∶1）定容1mL，配制成0.5、1、2.5、5、7.5、10ng/mL系列标准工作液。

3.仪器测试条件

ESI源;正模式;色谱柱：C18柱，2.1mm×100mm，1.7μm;柱温：35oC;进样量：10μL;流速0.2mL/min;梯度洗脱条件见表1。

4.样品前处理

称取2g（精确到0.01g）样品，置于50mL聚丙烯离心管中，准确加入25mL乙酸乙酯-环己烷（1∶1）溶液，涡旋混合提取2mim，再超声提取15min，4000r/min离心5min，過0.22μm有机膜，待净化。取10mL待净化液过PCX小柱（PCX小柱预活化：6mL甲醇、6mL水），4mL水和4mL甲醇淋洗，用8mL5%氨水甲醇洗脱，于45°C氮吹吹干，用甲醇水（1∶1）复溶，定容1mL，过0.22μm有机膜待上机。

5.方法检出限及线性回归方程

对配制的罗丹明B系列标准工作溶液进行测试，线性回归方程、相关系数及方法检出限（按S/N=3计）见表2。实验结果表明罗丹明B在0-10ng/mL范围内线性良好，相关系数为0.999。

6.回收率与精密度

在不含罗丹明B的调料中，分别添加含量为5、10、25μg/kg三个浓度水平的标样，每个水平平行测定6次，其回收率和相对标准偏差（RSD）见表3。

7.结论

罗丹明B采用外标法定量。实验结果表明，罗丹明B在0-10ng/mL范围内具有良好的线性关系，相关系数为0.999，方法检出限为0.001μg/kg，该目标化合物的平均添加回收率为80.45%-117.57%，RSD均小于5.0%。本方法具有前处理简单、快速、结果准确可靠等优点，可用于调料中非法添加物罗丹明B的检测。