胸腹水细胞块切片结合免疫组化在病理诊断中的应用价值

魏来

胸腹腔积液在临床中较为常见,可以由炎症、肿瘤等多种因素导致。临床导致胸腹腔积液的疾病众多,发病机制各异。胸腹腔积液的检查对于良性、恶性疾病的诊断治疗具有十分重要的意义［1］。临床明确胸腹腔积液性质对于疾病治疗具有较大影响,因此需要引起足够重视［2］。胸腹水脱落细胞学检查虽然是临床重要的诊断方法,但无法提供准确的病理诊断。近年来,临床常利用胸腹水细胞块切片结合免疫组化技术提高诊断准确性,进而有效评估疾病严重程度。本研究选择本院2019年1～12月收治的250份临床送检胸腹水标本,对标本进行细胞块切片结合免疫组化和HE染色检查,探讨临床病理诊断中的胸腹水细胞块切片结合免疫组化的应用,报告如下。

1 材料与方法

1.1材料来源 纳入本院2019年1～12月收治的250份临床送检的胸腹水标本,标本对应患者中男142例,女108例；年龄37～79岁,平均年龄(56.2±7.6)岁。

1.2纳入及排除标准 纳入标准：①患者临床上因各种原因导致胸腹腔积液需要进行胸腹水检查,病历完整；②患者签署本研究知情同意书。排除标准：①合并严重精神障碍性疾病的患者；②妊娠期或哺乳期女性患者；③合并严重心肺功能障碍的患者。

1.3方法 对纳入的所有胸腹水标本进行液基细胞学检查,将检查结果中疑似存在肿瘤细胞的50份标本进行细胞块以及切片制作,对切片进行HE常规染色、细胞块切片结合免疫组化染色。

细胞沉渣切片制作方法为将疑似恶性胸腹腔积液的标本装于离心管中差速离心10 min并用吸管吸取上清液。在离心管加入20 ml的10% 中性福尔马林并使用震荡仪震荡后再次离心10 min,弃去上清液将沉淀物用镊子取出,使用擦镜纸将沉淀物包装,随后进行透明、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色等操作。对于血性成分较多的胸腹水标本可以加入20 ml 乙醇与冰醋酸的混合液充分混合再进行离心。

细胞块切片结合免疫组化染色严格按照试剂说明书的相关规定进行,检测CK7、CEA、Calretinin、WT-1等相关分子的表达。

1.4观察指标 观察分析标本病理结果；对比两种方法检测阳性率；并比较腺癌和恶性间皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗体表达阳性情况。

1.5统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件对数据进行处理。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1标本病理结果分析 250份临床送检的胸腹水标本,其中50份疑似肿瘤性胸腹腔积液标本,包括27份腺癌,8份鳞状细胞癌,5份小细胞癌,4份反应性间皮细胞,6份恶性间皮瘤。

2.2两种方法检测阳性率比较 细胞块切片结合免疫组化检测的阳性率为100.00%(50/50),高于HE染色检测的68.00%(34/50),差异有统计学意义(χ2=19.05,P＜0.05)。

2.3腺癌和恶性间皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗体表达阳性情况比较 腺癌和恶性间皮瘤的WT-1抗体表达阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗体表达阳性率高于恶性间皮瘤,Calretinin抗体表达阳性率低于恶性间皮瘤,差异具有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 腺癌和恶性间皮瘤CK7、CEA、Calretinin、WT-1抗体阳性表达情况比较［n(%)］

3 讨论

胸腹腔积液是有多种疾病导致的胸部、腹部液体渗出并在局部腔隙中聚集导致的疾病,主要由于液体吸收和形成不平衡导致［3］。胸腹腔积液根据积液形成的原因不同分为渗出性胸腔积液以及漏出性胸腔积液两种［4］。渗出性胸腔积液通过增加局部血管的渗透性或者局部组织的渗透情况而导致胸腹腔积液,肿瘤性胸腔积液主要由肿瘤细胞侵犯局部组织导致组织间隙扩大或失去原有分子屏障,从而导致胸腹腔积液［5］。

胸腹水细胞学检查是临床检测胸腹腔积液性质的重要检测方法,通过检测胸腹水中相关细胞的比例组成情况有利于疾病的准确诊断［6］。胸腹水细胞学检查方法简便、检测迅速、经济有效,具有重要的临床价值。炎性、恶性胸腹水的鉴别诊断是临床重要的研究热点,对于后续疾病治疗方案的制定具有决定性的意义。细胞块切片与细胞块切片结合免疫组化联合用于胸腹水的检测有利于提高诊断的阳性率。临床检验的过程中通过对细胞沉渣石蜡进行石蜡包埋、连续切片可以制作高效的标本［7］。石蜡包埋有利于避免涂片过厚导致细胞结构不清晰、细胞重叠、细胞成团等情况,从而辅助检验科工作人员快速诊断［8］。胸腹水沉渣蜡块可以进行反复切片,有利于进行细胞块切片结合免疫组化染色、原位核酸分子杂交染色等多种检测过程,提高临床整体检测效果［9］。

本研究探讨临床病理诊断中的胸腹水细胞块切片结合免疫组化的应用。结果表明,250份临床送检的胸腹水标本,其中50份疑似肿瘤性胸腹腔积液标本,包括27份腺癌,8份鳞状细胞癌,5份小细胞癌,4份反应性间皮细胞,6份恶性间皮瘤。细胞块切片结合免疫组化检测的阳性率为100.00%(50/50),高于HE染色检测的68.00%(34/50),差异有统计学意义(χ2=19.05,P＜0.05)。腺癌和恶性间皮瘤的WT-1抗体表达阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05)；腺癌的CK7、CEA抗体表达阳性率高于恶性间皮瘤,Calretinin抗体表达阳性率低于恶性间皮瘤,差异具有统计学意义(P＜0.05)。结合研究结果进一步分析,细胞学涂片检查是胸腹腔积液的重要检查手段,对于胸腹水具有一定的检测意义,但总体上检测灵敏度低。本研究中细胞块切片结合免疫组化相比之下优势明显,检测阳性率更高,检测更加灵敏。常规细胞涂片染色的方法难以区分转移性癌症和原发性恶性间皮瘤的胸腹水细胞学形态,染色定位不够准确,很难分辨疾病类型［10］。细胞块切片结合免疫组化的方法主要通过二次离心分离技术获取细胞沉渣,并进一步强化胸腹水标本的脱水、石蜡包埋、切片等操作,从而一定程度上提高临床检测的准确性。胸腹水肿CK7、CR、TIF-1、CEA、Villin、EMA、Vim 等相关分子的表达在不同类型的疾病中存在一定的差异［11］。结合本研究结果腺癌和恶性间皮瘤的分子表达情况具有明显的差别,分子表达的情况可以作为细胞块切片和常规切片的重要差异对比项目,是细胞块切片的优势所在。虽然常规细胞涂片结合细胞块切片结合免疫组化的方法一定程度上也可以显示相关分子蛋白的表达情况,但细胞块切片的显示结果更加明显［12］,显示差异更方便临床观察。常规胸腹水脱落细胞学涂片检查虽然对于典型的细胞可以准确诊断,但由于阳性率较低容易出现疾病的误诊、漏诊情况,尤其对于退变的间皮细胞、炎性胸腹水增生等难以和恶性细胞相互区分,不利于临床准确诊断。总体上,细胞块切片结合免疫组化的方法是对于传统细胞涂片方法的重要补充,是具有重要的临床应用价值的检测项目。

综上所述,胸腹水积液的性质对于后续临床方案的制定以及预后评估意义重大,胸腹水细胞块切片结合免疫组化应用对于病理诊断具有明显的价值,检测方法快速、便捷,有利于提高肿瘤细胞诊断的阳性率,明确原发疾病类型,值得临床推广使用。