2623名患者红细胞不规则抗体筛选结果分析*

解金辉， 种靖慧， 黄 娴， 王 维， 董 峥， 李彤彤， 李立新， 吴丽娜

(天津市血液中心， 天津 300110)

输注红细胞是治疗贫血的有效手段，在输血过程中，由于受血者与献血者具有不同的红细胞抗原，将有可能发生红细胞同种免疫。当献血者的红细胞进入受血者血液循环中，免疫系统会识别外来抗原并产生免疫应答，从而产生针对外来抗原的抗体。在妊娠过程中，胎儿红细胞也能刺激母体免疫系统，使之产生同种抗体。如果血液中存在红细胞同种抗体，再次输入含该抗原的红细胞将会被患者体内的抗体破坏，发生溶血性输血反应。为保证输血安全有效，在输血前需要对患者血浆进行红细胞不规则抗体筛选试验，如果检测到同种抗体，需要选择对应抗原阴性的血液进行交叉配血，避免发生输血不良反应。同时，还可以提示临床医生寻找该患者所需血液需要时间，尤其是当患者血浆中含有针对高频抗原的抗体时，如抗-Jk3[1],寻找相配合的血液非常困难。本文通过对红细胞不规则抗体筛选阳性的标本进行检测，分析红细胞血型抗体在本地区患者中的分布情况，以减少输血不良反应和延迟输血情况发生，提高输血的安全性和有效性。

1 对象与方法

1.1 研究对象

天津市各医院在患者输血前检测中进行红细胞抗体筛选时，将检测结果为阳性的全血标本送至本中心实验室进行检测，2011年8月至2018年12月，共送检2623份患者标本。患者年龄1岁至91岁，其中815份为男性患者，1808份为女性患者，多数患者将输血作为常规的治疗手段。为预防胎儿发生新生儿溶血病而注射IgG抗-D的RhD阴性孕妇不包括在内。

1.2 抗体筛查与鉴定

血液标本经过3 000 r/min离心3 min后，将红细胞与血浆分离，红细胞用来检测血型，血浆用来检测不规则抗体。利用试管法检测红细胞ABO及Rh(D)血型。抗人球蛋白微柱凝胶卡方法和盐水试管法同时进行3个细胞( Screening panel 123, Sanquin, 荷兰；Dia-Cell I-II-III Asia，BIO-RAD，瑞士)的抗体筛选试验，加入抗筛细胞和患者血浆的抗人球蛋白凝胶卡(LISS/Coombs ID-Card, Diamed，瑞士)于37℃孵育15 min后,1 030 r/min离心10 min。如果抗体筛选结果阳性，随后用含有16个细胞( Makropanel 16, Sanquin，荷兰)的谱细胞进行抗体鉴定试验。如果确定抗体特异性，检测患者该抗体对应的红细胞抗原(抗血清购自德国CE-IMMUNODIAGNOSTIKA和荷兰Sanquin，抗-Mur和抗-Tja来源于上海血液中心馈赠)。

2 结果

所有2623份标本的红细胞不规则抗体筛选结果均为阳性，进行抗体鉴定结果显示，509例为自身抗体，而且没有检出同种抗体。其他标本中，检出2139个同种抗体，还有96名患者的抗体特异性未确定，共计2744个红细胞同种抗体。

在这些鉴定出来的同种抗体中，最常见的抗体是Rh系统抗体，占总数的54.7%(1502/2139)(表1)，其中抗-E是检出最多的同种抗体， 达到730个(单独出现或者和其他抗体联合出现，以下同)，抗-c 239个，抗-e 188个，抗-C 210个，抗-D 135个。MNS系统检出312个，Lewis系统检出169个，Kidd系统检出62个，P系统检出21个，Duffy系统检出26个，Diego系统检出45个。

在检出同种抗体的血液中，大多数只产生一个抗体，在含有2个或多个抗体的患者中，最常见的是抗-c与抗-E同时出现，本次统计的2623名患者中，在211人中同时检出抗-c和抗-E。

本次统计中，检出Kell系统中抗-Ku和抗-K各一例，这两种抗体在中国人中相对较少。

Tab.1Frequency of alloantibodies according to blood group system

Antibody typeSubtypePercentage of totalTotal(%)Rh systemanti-C7.7%(210)anti-c8.7%(239)anti-D4.9%(135)anti-E26.2%(730)anti-e6.9%(188)54.7MNS systemanti-M9.4%(259)anti-N0.5%(13)anti-S0.9%(26)anti-Mur0.5%(14)11.4Lewis systemanti-Lea4.9%(133)anti-Leb1.3%(36)6.2Duffy systemanti-Fya0.1%(4)anti-Fyb0.8%(22)1.0Kidd systemanti-Jka1.8%(48)anti-Jkb0.5%(14)2.3P systemanti-P10.7%(19)anti-P1PPk0.1%(2)0.8Kell systemanti-Ku1anti-K10.1Diego systemanti-Dia0.1%(4)anti-Wra1.5%(41)1.6Autoantibody18.6%(509)18.6Unidentified3.5%(96)3.5

3 讨论

本文中，女性红细胞抗体筛选阳性人数明显高于男性，因为妊娠史会对机体有初次刺激，再次妊娠或者输血将更容易产生红细胞不规则抗体。孕妇血液中含有红细胞抗体将导致新生儿溶血病的发生，ABO血型系统的溶血病最常见[2]，但是其他血型系统的溶血病会更加严重，所以有输血史或者妊娠史的女性，再次怀孕时，应该进行红细胞不规则抗体的检测，及时应对因此发生的ABO血型系统之外的新生儿溶血病。

在本研究中，最常见的同种抗体是抗-E, 其次是抗-M，抗-c，抗-C，抗e，抗-D 和抗-Lea检出数量相近。该结果同中国其他研究小组和马来西亚的研究结果类似[3,4]。在高加索人，黑人和亚洲蒙古人中[5-8]，抗E是最常见的。在含有抗-E的患者准备输血时，如果输注的红细胞Rh血型与患者一样，而不仅仅是ee表型，那么抗-c产生的几率就很低了。Vichinsky EP等[9]统计发现，当输注的红细胞选择E，C，K抗原与患者相同时，患者同种免疫率将会从3%下降至0.5%，这也给输血前检测的工作人员提出了一个问题，在选择血液时，是E、C抗原与患者相同，还是仅仅避开含有抗体对应的抗原。

Mur抗原是GYPA基因与GYPB基因杂交后的新基因表达的蛋白产物，该抗原在欧洲及非洲人群中属于稀有的抗原，而在东南亚人群中相对常见，中国人群中的Mur抗原分布频率能达到7%，在中国南方地区该抗体也是比较常见[10]，所以在南方地区进行抗体筛选试验所用到的红细胞最好含有Mur抗原，以避免漏检抗-Mur抗体。如果选用的抗体筛选细胞不含有Mur抗原，将会漏检该抗体。在本文中鉴定出14例抗-Mur抗体，因为前期使用的不规则抗体筛选细胞中不包括Mur抗原，可能有Mur抗体未检测到，所以实际Mur抗体比例会比本文中得到的比例高。

红细胞的自身抗体可能会缩短红细胞的存活寿命[11],在本文中，有509例患者含有自身抗体，其与献血者红细胞在微柱凝胶卡中的反应强度从弱凝集至3+，这种反应强度弱于或者等同于自身对照的反应强度。在检测过程中需要注意的是，强的自身抗体有遮蔽作用，可能会影响同种抗体的检出[12]，从而发生溶血性输血反应。此外，还有96例抗体特异性未能确定，可能由于患者服用药物所致，也可能是谱细胞中有的抗原未作标注，需要进行后续试验。

高加索人与亚洲蒙古人间抗体特异性最大的不同之处在于抗-K，该抗体是临床很重要的同种抗体，在高加索人中很常见[4,13],但在中国人中极少检出。本文中检出两例Kell系统的抗体，分别是抗-Ku和抗-K。K抗原阳性血型在亚洲人中存在很少，K抗原阴性的人输注K抗原阳性血液的几率很低，故产生抗-K抗体的人很少，这也是抗-K抗体在我国检出少的原因。

总之，在本实验室鉴定的红细胞不规则抗体中，抗-E，抗-c，抗-M最为常见，如果筛选细胞中含有Mur抗原，能够避免抗-Mur的漏检。在输血前检测中，当患者检出不规则抗体，应提前进行备血，避免由此导致的延迟输血，影响治疗效果。