住院儿童EB病毒感染分析

刘海芹

【摘要】 目的 分析住院儿童人类疱疹病毒Ⅳ型（EV病毒）感染情况。方法 100例疑似EB病毒感染的住院患儿， 均接受PCR 荧光法检测全血中EB病毒核酸， 计算阳性率。结果 100例患儿的标本， 检测为阳性17份， 阳性率17.00%;其中患儿性别男9例（52.94%）， 女8例（47.06%）。学龄组患儿阳性率1.49%低于婴儿组的30.00%、幼儿组的38.46%、学龄前组的22.22%， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。17例EB病毒感染住院患儿， 表现为支气管肺炎1例（5.88%）， 表现为心肌炎3例（17.65%）， 表现为咽炎1例

（5.88%）， 表现为伤寒1例（5.88%）， 表现为传染性单核细胞增多症14例（64.71%）;部分患儿同时表现为两种疾病。不同季节就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率比较， 差异均无统计学意义（P>0.05）。17例EB病毒阳性住院患儿中合并感染者8例， 占47.06%;合并病原体>2种者2例， 占11.76%。结论 EB病毒感染是住院儿童呼吸道感染的一类主要病原体， 各季节均可能发病， 且易出现混合其他病原体感染的情况。

【关键词】 住院;儿童;EB病毒;感染

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.33.101

EB病毒侵袭机体细胞分为潜伏感染和增殖性感染两种形式， 与其他疱疹病毒科的病毒具有相似性[1]。EB病毒主要感染上皮细胞、淋巴细胞， 首次感染后病毒会在上呼吸道上皮细胞或淋巴组织中持续潜伏存在， 因此EB病毒感染的主要特征为终生携带、潜伏感染[2]。当前， 临床上对于EB病毒感染相关疾病谱的重视程度逐年上升， 本研究具体分析住院儿童EB病毒感染情况， 选取本院2017年1月～2018年12月接受治疗的100例疑似EB病毒感染的住院患儿为研究对象， 现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2017年1月～2018年12月于本院接受治疗的100例疑似EB病毒感染住院患儿为研究对象， 所有患儿均存在发热、咳嗽等上呼吸道感染症状， 且接受常规抗感染治疗效果不佳， 年龄0～12岁。根据年龄不同将患儿分为婴儿组（≤1岁， 10例）、幼儿组（1～3岁， 13例）、学龄前组（3～6岁， 20例）、学龄组（6～12岁， 67例）。

1. 2 仪器与试剂 荧光定量基因扩增仪;全自動核酸提取仪;台式高速离心机;干式恒温器;EB病毒核酸定量检测试剂盒。

1. 2 方法

1. 3. 1 标本采集 抽取患儿3～5 ml EDTA-K2抗凝静脉全血， 抽取后缓慢上下颠倒， 保证充分混匀， 立即送检， 不能立即送检的标本需置于2～8℃温度下保存， 但要保证在48 h内送检， 且注意不能多次冻融。

1. 3. 2 核酸提取 抽取500 μl抗凝血至1.5 ml离心管， 将1×1000 μl红细胞裂解液加入后颠倒混匀， 在室温下静止放置5 min。之后在室温下进行5 min的离心处理， 离心速度5000 r/min， 除去上清液， 留取沉淀物。重复进行一次裂解步骤后选取核酸提取液50 μl加入沉淀物内， 充分混匀， 以2000 r/min的速度进行离心处理10 s， 以100℃的温度加热

10 min， 继续以12000 r/min的速度下进行离心处理10 min， 收集上清液进行PCR扩增。

1. 3. 3 PCR扩增、荧光检测 采用35.6 μl、0.4 μl Taq酶制作EB反应混合液， 选取4 μl待测样本DNA加入其中， 设质控品同步处理， 反应总体系是40 μl， 低速离心数秒后顺序置于PCR 仪上， 扩增程序：95℃， 3 min， 1个循环;94℃， 15 s;60℃， 30 s;共进行40个循环。阈值设定为恰好超过阴性对照增长曲线的最高点， 检测样本中EB DNA为5.0×102～1.0×108 copies/ml时， 增长曲线为S曲线， 若EB DNA >1.0×108 copies/ml则需做适当稀释， 确保其在有效范围内。阳性率=（强阳性+弱阳性）/总例数×100%。

1. 4 观察指标及判定标准 观察所有疑似EB感染患儿EB病毒及其他病原体检测阳性情况， 比较四组疑似EB感染患儿及不同季节就诊的疑似EB感染患儿EB病毒检出情况， 观察阳性患儿疾病表现情况。阳性判定标准：增长曲线呈S型曲线且Ct值≤20为强阳性;增长曲线呈S型曲线且Ct值为20～38为弱阳性;不符合阳性标准为阴性。

1. 5 统计学方法 采用SPSS22.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验;计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2. 1 100例疑似EB病毒感染住院患儿的血标本EB病毒阳性检出情况 100例患儿的标本， 检测为阳性17份， 阳性率17.00%;其中患儿性别男9例（52.94%）， 女8例（47.06%）。婴儿组患儿阳性1例， 占比5.89%， 阳性率为30.00%;幼儿组患儿阳性5例， 占比29.41%， 阳性率为38.46%;学龄前组患儿阳性8例， 占比47.06%， 阳性率为22.22%;学龄组患儿阳性3例， 占比17.65%， 阳性率为1.49%。学龄组患儿阳性率低于婴儿组、幼儿组、学龄前组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。

2. 2 17例EB病毒阳性住院患儿疾病表现情况 17例EB病毒感染住院患儿， 表现为支气管肺炎1例（5.88%）， 表现为心肌炎3例（17.65%）， 表现为咽炎1例（5.88%）， 表现为伤寒1例（5.88%）， 表现为传染性单核细胞增多症14例（64.71%）;部分患儿同时表现为两种疾病。

2. 3 100例疑似EB病毒感染住院患儿EB病毒感染季节分布情况 春季就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率为15.00%（3/20）， 夏季就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率为22.73%（5/22）， 秋季就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率为16.00%（4/25）， 冬季就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率为15.15%（5/33）。不同季节就诊的疑似EB病毒感染患儿阳性率比较， 差异均无统计学意义（P>0.05）。见表1。

2. 4 17例EB病毒陽性住院患儿其他病原体检出情况 17例

EB病毒阳性住院患儿检出副流感病毒者1例， 占5.88%;检出肺炎支原体者3例， 占17.65%;检出乙型脑炎病毒者2例， 占11.76%;检出伤寒或副伤寒杆菌者2例， 占11.76%;检出戊型肝炎病毒者1例， 占5.88%;检出腺病毒者1例， 占5.88%;检出肠道病毒者1例， 占5.88%;检出乙型肝炎病毒者1例， 占5.88%;检出轮状病毒者1例， 占5.88%。其中合并感染者8例， 占47.06%;合并病原体>2种者2例， 占11.76%。

3 讨论

EB病毒是一种嗜淋巴细胞性疱疹病毒， 其特异性高， 是疱疹病毒科γ亚科中唯一一个可以感染人类的淋巴滤泡病毒， 一般对表皮细胞、B淋巴细胞进行侵犯， 且这一过程中细胞蛋白、病毒糖蛋白均会参与[3]。EB病毒感染不仅会导致传染性单核细胞增多症， 研究还发现小儿Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌也和EB病毒感染存在相关性， 甚至可能导致坏死性淋巴结炎、噬血细胞综合征、川崎病、慢性活动性EB病毒感染、重症肺炎等[4]。

EB病毒在人群中感染率非常广泛， 儿童时期出现的多是原发性感染， 具有隐匿起病的特点， 大部分1～5岁患儿发生EB病毒原发感染时多没有伴发特异性疾病[5]。EB病毒是学龄前儿童出现感染性疾病的常见病原体， 同时临床发现EB病毒感染具有地域差异、年龄差异， 发生EB感染后可能终生潜伏， 其主要传播途径是唾液传播， 部分可经输血液传播[6]。

EB病毒-DNA载量的分子生物学检查、EB病毒相关抗体的血清学检查是EB病毒实验室检查的主要内容， 不过不同检验项目、标本临床适用范围存在差别。通过进行EB病毒核酸载量检测能够辅助判断患儿是否为活动性EB病毒感染， 且进行实时荧光定量PCR是当前检测EB病毒核算载量最有效的方法[7-10]。

综上所述， 在小儿感染性疾病中EB病毒感染的比重较高， 同时临床会有多种症状表现， 临床必须注重做好EB感染的检测， 了解相关疾病发生的情况， 为临床诊疗提供更多科学信息。

参考文献

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[5] 崔强华， 孙莉， 吴琳， 等. EB病毒感染对儿童传染性单核细胞增多症T细胞亚群的影响. 重庆医学， 2017， 46（25）：41-43.

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[10] 谢利波， 刘敏， 王敏. 975例儿童EB病毒感染状况分析. 巴楚医学， 2018， 1（3）：86-89.

[收稿日期：2019-03-21]