雪胆口服液治疗鸡大肠杆菌病的研究

骆延波 胡明 李璐璐 齐静 张印 张庆 赵效南 刘玉庆 邓旭明

摘  要：为验证雪胆口服液对鸡大肠杆菌病的防治效果，本试验选择临床某养殖场42日龄海兰白壳蛋鸡大肠杆菌自然病例作为研究对象，应用雪胆口服液按4mL/L饮水添加，连续饮用5d，同时以硫酸新霉素可溶性粉（0.5g/L飲水）作为对照药物，观察两种药物对大肠杆菌病的防治效果。结果表明：雪胆口服液对鸡大肠杆菌自然病例的保护率为86.71%，但效果不及新霉素（95.57%）。

关键词：雪胆口服液;治疗;鸡;大肠杆菌

中图分类号：S858.313.92     文献标识码：B     文章编号：1673-1085（2019）11-0003-03

雪胆（Hemsleya sinesis Cogn）为葫芦科雪胆属植物，其有效部分为块根。其提取物具有抗肿瘤、广谱抗菌、抗病毒、抗炎镇咳、抗肝炎等作用[1-3]。为验证雪胆口服液对鸡大肠杆菌的防治效果作用，根据中华人民共和国农业部公告——兽用中药、天然药物临床试验技术指导原则[4]（第1596号）中临床扩大试验要求，对雪胆口服液的临床疗效验证，选择某养殖场饲养的海兰白壳蛋鸡大肠杆菌病自然病例作为研究对象，应用雪胆口服液按4mL/L饮水添加，连续饮用5d，观察防治效果。

1  材料与方法

1.1  试验动物  海兰白壳蛋鸡1400只，按常规免疫程序免疫疫苗，养至42日龄时，鸡只表现精神萎靡，羽毛逆立，扎堆，食欲废绝，腹泻，粪便呈黄绿色水便，初步怀疑大肠杆菌病。

1.2  病例诊断和分组  对上述鸡群，选择症状典型病例，进行剖检和细菌分离、生化鉴定。

将1400只随机分为中药组及对照组两组，每组约700只，两组给予同样的饲养管理条件。Ⅰ组为中药组，给予浓度为推荐剂量的雪胆口服液自由饮水，连续给药5d;Ⅱ组为硫酸新霉素可溶性粉组，按推荐剂量（0.5g/L）饮水给药，连续给药5d，每天观察并记录鸡只的精神状况。分组及给药情况见表1。

1.3  试验药物与化学试剂  雪胆口服液，德州神牛药业有限公司中试生产，批号：20160412。硫酸新霉素可溶性粉，购于河南森隆兽药有限公司，批号：20160826;麦康凯琼脂、营养琼脂、细菌微量生化反应管，购于杭州天和微生物试剂有限公司;营养肉汤，购于北京双旋微生物培养基制品厂。

1.4  试验仪器  电热鼓风干燥箱，北京市永光明医疗仪器厂;生化培养箱（SPX-250B-Z），上海博迅实业有限公司医疗设备厂;恒温培养振荡器（ZHWY-103D），上海智城分析仪器制造有限公司;电子天平（MR200A），上海第二天平仪器厂;超净工作台（LGJ-10），北京四环科学仪器厂。TGL- 16高速台式电动离心机，金坛市杰瑞尔电器有限公司。

1.5  检测指标  每天观察记录试验鸡的临床症状变化、死亡、增重情况，计算各组的保护率、治愈率、死亡率（统计方法同试验性临床试验）。

1.6  数据分析  对采用SPSS 17软件对试验数据进行显著性检验，死亡率、保护率、治愈率采用卡方x2检验。两组的X2检验： X2 = （ad-bc）2n/（a+b）（c+d）（a+c）（b+d），其中I组存活数a，死亡数c;II组存活数b，死亡数d。n为两组动物总数。X2

>6.63为差异显著，X2<3.84表示差异不显著。

2  结果与分析

2.1  病例诊断

2.1.1  剖检变化  对典型病例进行剖检，可见到大肠杆菌病的病理变化：肌肉脱水，颜色暗红;肝脏肿胀，有散在的出血点，部分鸡有轻微的心包炎、肝周炎表现[5]。

2.1.2  细菌分离、鉴定  从病死鸡的肝脏采集病料，接种于麦康凯琼脂培养基，培养24h后，可见红色菌落。挑取单个菌落，接种肉汤增菌后，进行生化试验，生化鉴定结果符合大肠杆菌的生物学特征[6-8]。分离菌生化鉴定结果见表2。

2.2  防治效果

观察两种药物对大肠杆菌病鸡的防治效果，新霉素组用药第2天后症状明显好转，腹泻停止，饮食欲有所恢复，第3天以后没有再出现死亡现象，中药组在用药后症状稍见好转，部分鸡精神萎靡，死亡现象一直持续到第4天，死亡数为93只。统计两组药物饮水给药后的1周内的治愈率、保护率、死亡率各项指标，经统计学分析均为差异显著（P<0.05）。说明雪胆口服液对鸡大肠杆菌病的防治效果不及新霉素。结果见表3。

3  结论

雪胆口服液对鸡大肠杆菌自然病例的治疗保护率为86.71%，但效果不及新霉素（95.57%）。

4  讨论

4.1  雪胆口服液对鸡大肠杆菌病具有一定的冶疗效果，这与雪胆提取物具有广谱抗菌作用的报道一致[1]。根据体外抗菌试验，从雪胆醇浸出物中提取的雪胆皂苷和胆苦味素对溶血性链球菌、金黄色葡萄球菌、福氏痢疾杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌等都有不同程度的抗菌作用，较同浓度的氯霉素强[2]。雪胆素对革兰氏阴性菌的MICs为0.0056～1.5mg/mL[3]。笔者也进行了相关试验，雪胆提取物对鲍曼不动杆菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、克雷伯氏菌等均表现较好的抗菌效果，最低抑菌浓度（MIC）可达50～100mg/mL[8、9]。

4.2  雪胆口服液对自然病例的保护率（86.71%）明显高于实验室临床试验中的保护率（56%），这与相关研究结论一致[10]。造成两者差异的原因可能是：①临床感染的大肠杆菌毒力较弱，因而造成死亡率低，药物的保护率高;②自然感染大肠杆菌数量较少;③自然感染与实验室人工感染的途径不同，自然感染多由消化道途径，而人工感染是通过直接肌肉注射，自然病例的严重程度不同。

参考文献：

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[4]  中华人民共和国农业部公告（第1596号）兽用中药、天然药物临床试验技术指导原则[EB/OL].http：//www.moa.gov.cn/govpublic/SYJ/201106/t20110629_2041707.htm.2011-06

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[8]  贾纪美，朱见深，骆延波，等.肉鸡产业链主要抗药性菌株的分离鉴定与抗药性分析[J]. 山东农业科学2018，50（7）：13-19.

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[10]  Shougang Wang; Xiaohui Guan; Xiuhong Zhong ，et al.Simultaneous determination of cucurbitacin IIa and cucurbitacin IIb of Hemsleya amabilis by HPLC-MS/MS and their pharmacokinetic study in normal and indomethacin‐induced rats[J]. Biomedical Chromatography，2006，10： 1632-1640.

Study on the Treatment of Chicken Colibacillosis with

Hemsleya Oral Liquid

LUO Yanbo1，2，HU Ming1， LI Lulu1，QI Jing1，ZHANG Yin1，ZHANG Qing1，

ZHAO Xiaonan1，LIU Yuqing1，DENG Xuming2

（1.Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine，Shandong Academy of Agricultural Sciences/Shandong Key Laboratory of Animal breeding and diseases Control，Jinan 250100，China;

2.College of Animal Medicine， Jilin University， Changchun 130062，China）

Abstract：In order to verify the prevention and treatment effect of Hemsleya oral liquid on chicken colibacillosis，the natural case of E.coli from 42-day-old Hailan white-shell chicken in a clinical farm were selected in this study.The concentration of  of Hemsleya oral solution was 4 mL/L drinking water， continuous drinking for 5 days， while using neomycin sulfate soluble powder （0.5g/L drinking water） as a control drug，then the effect of two drugs on the prevention and treatment of colibacillosis were observed.The results showed that the protection rate of Hemsleya oral liquid on natural cases of chicken E.coli was 86.71%， but the effect was not as good as that of neomycin （95.57%）.

Key words：Hemsleya oral liquid; treatment; chicken; Escherichia coli □