黄芪丹参组方对多柔比星所致大鼠心肌结构的改善作用

吴文宇 杨兵 黄雯琪 刘杰 唐东昕 罗莉（通讯作者）

（1 贵州中医药大学第一附属医院肿瘤科 贵州 贵阳 550001）

（2 贵航贵阳医院肿瘤科 贵州 贵阳 550006）

多柔比星（Doxorubicin Hydrochloride for Injection，DOX）属蒽环类抗生素[1]，是非常经典的抗癌药物之一，但是临床上发现，长期使用会导致发生充血性心力衰竭的几率增加，而且剂量越大心脏毒性越大。因此，研究如何防治蒽环类化疗药物的心脏毒性对恶心肿瘤的治疗具有重要的临床意义。黄芪丹参组方（HQDS）是芪参益气滴丸里面的重要组成药物按照1：1比例组成的中药复方制剂。临床常用于治疗冠心病、心绞痛。前期研究显示含有黄芪、丹参的芪参益气滴丸对压力负荷引起的心肌肥厚大鼠的对心肌损伤，心肌纤维化，心脏灌流量，心脏功能都有明显的改善作用[2]。上述研究提示HQDS对大鼠心肌损伤有保护作用，本研究重点探讨HQDS对DOX导致的大鼠心肌结构损伤的改善作用。

1.资料与方法

1.1 动物

SD大鼠，雄性，体重（189±12）g，合格证号SCXK(渝)2009-0007（重庆腾鑫比尔实验动物销售有限公司提供）。动物饲养在温度为22±2℃，湿度为40±5%的条件下，自由食水，光照/黑暗交替12h。实验前动物禁食饲养于贵州中医药大学中心实验室动物房。

1.2 主要试剂

黄芪（批号：8031982）和丹参（批号：8050442）颗粒剂均购自广东一方制药有限公司，规格：每袋10g。注射用盐酸多柔比星（批号：H33021980），规格：10mg/瓶，粉剂，购自浙江海正药业股份有限公司。

1.3 造模方法及动物分组

随机选取SD大鼠24只，用超声心动图检测左室射血分数留底，然后通过腹腔注射DOX造模。每只大鼠按照2.5mg/kg的给药量腹腔注射DOX，隔日一次，每周三次，连续注射2周，DOX总剂量控制为15mg/kg。2周后复测左室射血分数，分数降低10%者视为造模成功。最终将造模成功的14只大鼠按完全随机法分为模型对照组（DOX 4W+NS）和模型治疗组（DOX 4W+HQDS）。模型对照组组从第12日起，连续2周给与生理盐水1ml灌胃。模型治疗组连续2周给予HQDS 1ml灌胃（给药量：0.2g/mL）。另外随机选取正常大鼠作为正常对照组（Control 4W），连续2周隔日腹腔注射生理盐水1ml，每周三次。从第12日后，停止注射生理盐水，连续2周给予生理盐水1ml灌胃。

1.4 大鼠左心室壁厚度以及心功能测定

在实验开始前、实验第14d、实验第28d，用高频超声诊断仪测定实验各组大鼠左室舒张期后壁厚度（LVPWd）、左室收缩期后壁厚度（LVPWs）、左室舒张末期内径（LVIDd）、左室收缩末期内径（LVIDs）。

1.5 大鼠心肌形态观察

在HQDS治疗第14d，取心脏，4%多聚甲醛固定24h，常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片，伊红-苏木精染色，体示显微镜下观察大体形态，光学显微镜下观察心肌形态学的变化。

1.6 统计学处理

2.结果

2.1 HQDS对DOX导致大鼠左心室壁增厚的改善作用

在不同条件下大鼠心脏的代表性超声心动图，用于测定左室内径和左室肥厚，与正常对照组（Control 4W）相比，给与多柔比星2周（A2）大鼠的LVID明显增大、LVPW显著变薄，证明造模成功。给与多柔比星4周而没有治疗药物的DOX 4W+NS组（A3）LVID及LVPW没有恢复。而给与HQDS 2周后（A4），LVD、LVPW明显好转。见图1。

图1 A1：Control 4W组，A2：DOX 2W组，A3：DOX 4W+NS组，A4：DOX 4W+HQDS组。LVID：舒张末期的左心室内径；LVPWd：舒张末期的左心室后壁。

2.2 HQDS对DOX引起的大鼠心肌形态学变化

图2显示，与正常对照组（Control 4W）比较，模型对照组（DOX 4W+NS）左心室内径明显增大，左心室后壁显著变薄（A2），并且出现了水肿以及纤维断裂（B2）。而模型治疗组（DOX 4W+HQDS）左心室内径、左心室后壁、水肿以及纤维断裂等情况均得到较好的恢复。

图2 HQDS对大鼠心肌组织切片的影响。A：HE染色显示样品的定位。B：高倍放大的心肌组织。E：水肿；FB：纤维断裂。标尺=20μm。

3.讨论

很多既往经典的研究都证实腹腔注射多柔比星可引起大鼠左室内径增大，室壁变薄。本研究也成功模拟出这一现象。并且证实在给予黄芪党参组方治疗后，可明显地改善大鼠左心室内径增大，左心室后壁变薄的现象。这就提示了黄芪党参组方能恢复由于化疗药多柔比星导致的心肌结构异常。形态学的结果也显示，HQDS后给药可以改善多柔比星引起大鼠心肌损伤。黄芪党参组方是将中医补气和活血功效有效融合的复方制剂，也是芪参益气滴丸中的重要药物组成，以往研究证实芪参益气滴丸具有改善模型大鼠心脏灌流量和心脏功能，以及减轻大鼠心肌损伤、心肌纤维化的作用[2][3]。本研究进一步证实了芪参益气滴丸中的黄芪党参组方也可以改善多柔比星引起的心肌损伤，可以为解决蒽环类化疗药临床应用的毒副反应提供潜在的可能。综上所述，黄芪党参组方能改善多柔比星导致大鼠的心肌结构改变，具有抗心肌毒性的作用。