袁春辉
摘要 鸡葡萄球菌病传播途径多,流行范围广,且没有明显的季节性,针对本病制定的预防措施效果不明显。通过对送检的淮南麻黄鸡进行临床观察、病理剖检、细菌培养和PCR检测,可以确诊为金黄色葡萄球菌感染;同时对分离的细菌进行药敏试验,筛选出高敏药物,为治疗提供依据。
关键词 鸡金黄色葡萄球菌病;淮南麻黄鸡;细菌分离;药敏试验
中图分类号 S858.31 文献标识码 B
文章编号 1007-5739(2019)20-0221-02 开放科学(资源服务)标识码(OSID)
鸡葡萄球菌病是由葡萄球菌引起的一种传染病,是养鸡业中危害严重的疾病之一,其致病菌主要是金黄色葡萄球菌,病菌类型多,给养鸡业造成较大损失[1]。雏鸡感染后多表现为急性败血病的症状和病理变化,中雏为急性或慢性,成年鸡多为慢性,雏鸡和中雏感染后死亡率较高。现就肥东县某养鸡场鸡葡萄球菌病的诊治介绍如下。
1 发病与临床症状
肥东县某养鸡场饲养逾5 000只20日龄淮南麻黄鸡,饲养方式为笼养。鸡于15 d前开始发病,死亡率为3%~4%。免疫过禽流感H5、H7、H9疫苗以及新城疫疫苗,没有用药情况,母鸡产蛋率正常,小鸡出壳率和孵化率正常。通过对送检雏鸡的临床诊断发现,雏鸡共济失调、精神沉郁、拉绿色稀粪。
2 剖检
通过对病鸡进行解剖,可以看到明显的病变部位和病变特征(图1)。
3 实验室检查
在无菌条件下剪取内脏器官,涂布于培养基上,并在超净工作台上用四区划线的方法进行划板。划完之后,将培养基置于37 ℃恒温箱中培养过夜。菌落形态如图2所示。
对病菌进行革兰氏染色,然后用油镜观察发现,呈紫色,为革兰氏阳性菌;细菌呈球形或椭圆形,无鞭毛,无芽孢,无荚膜,大多数呈葡萄串状排列或成对分散排列[2](图3)。
4 分离菌株的分子生物学鉴定
对纯化后的细菌进行细菌16S rRNA PCR检测,PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳,然后于凝胶成像系统中观察。结果显示,被检样品在1 500 bp左右出现特异性条带(图4)。将该菌16S rRNA扩增产物送到合作的公司进行测序,结果在NCBI上进行同源性比较(表1)。结果显示,分离菌株的16S rRNA与比对的金黄色葡萄球菌序列同源性达99%。
5 药效试验
在无菌条件下,用镊子夹取14种药敏纸片贴于培养基表面,并轻轻压实,每个培养基表面贴7张药敏纸片,保持每个纸片到中心的距离相同并且适中,然后将制作好的样品放到37 ℃恒温箱中进行培养。12 h后,根据其产生的抑菌圈大小判断该菌对各种抗菌药物的敏感度(图5)。分离出的细菌对林可霉素、氨苄西林、阿莫西林、红霉素高敏,对阿奇霉素、罗红霉素、万古霉素、新霉素、庆大霉素、多西环素、诺氟沙星中敏;对复方新诺明、青霉素、头孢氨苄耐受(表2)。
6 治疗
根据分离菌株的药物敏感试验结果,建议养殖场主可选用林可霉素、氨苄西林、阿莫西林和红霉素等对病鸡进行治疗,及时控制病情,减少鸡场经济损失。
7 体会
近年来,随着规模化养鸡场的迅速发展,很多鸡病的针对性预防难度加大,加强疾病的诊断和有效治疗显得十分必要[3-4]。本案例表明,该菌株对林可霉素、氨苄西林、阿莫西林和红霉素等特别敏感。因此,鸡场应立即用林可霉素、氨苄西林、阿莫西林和红霉素等对患鸡进行治疗。在使用抗生素治疗时要注意不能过量,避免产生耐药性问题,在用药时要采用交叉用药、联合用药[5-6]。
葡萄球菌病是一种条件性疾病,广泛存在于自然中[7]。因此,预防葡萄球菌病主要从环境方面入手,经常巡查和检修鸡舍设施,防止鸡只出现外部的物理伤害;在注射疫苗时用消毒剂彻底消毒注射部位,防止细菌感染;要做好鸡群的保健工作,在饲料中多添加维生素和抗应激的中药或西药;育雏时要注意育雏舍的卫生,做好消毒工作;另外,加强管理尤其重要,例如饲养员针对可疑的鸡要及时进行隔离和治疗,对身体上有伤的鸡最好挑出来重点培养,对好动、好斗的鸡也要单独挑出来培养,从传染途径上杜绝病菌传播;负责人也要制定好消毒程序,特别是多水的季节,要着重注意排除鸡舍地面的水,做好干燥工作,从根源上杜绝该病菌的传播[8]。
8 参考文献
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[2] 姚淑红.鸡金黄色葡萄球菌的分离鉴定[J].山东畜牧兽医,2011(8):13.
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[4] 沈建忠,谢联金.兽医药理学[M].北京:中国农业大学出版社,2000.
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