糙米中嘧啶肟草醚的农药残留测定

贾 璇， 汪 元， 钟祝涛， 翟梦颖， 杨俊柱

(1.南陵县市场监督检验所，安徽 芜湖 242400；2.安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041)

嘧啶肟草醚是由韩国LG化学集团开发的嘧啶水杨酸类、广谱选择性芽后除草剂，其可被植物的茎叶吸收，在体内传导，抑制敏感植物氨基酸的合成。可用于防除水稻、小麦等田地的禾本科杂草和阔叶杂草[1]。

关于嘧啶肟草醚在糙米中的残留分析方法，陈晓琳等[2]利用石油醚液-液分配，固相萃取小柱方法进行净化，操作复杂、繁琐且费时；潘金菊等[3]采用改良的固相萃取净化方法、配合超高效液相色谱-质谱仪，步骤较多，且仪器昂贵、使用成本较高。本文采用乙腈超声提取，盐析净化和HPLC-UVD，建立了糙米中嘧啶肟草醚的残留检测方法，该方法不仅前处理简单、快速、易操作，杂质干扰少，且准确度、精密度和灵敏度均能达到农药残留分析的要求。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Agilent 1200 Series高效液相色谱仪：具可变波长紫外检测器，美国安捷伦公司；XBLL-25多功能食品加工机，上海帅佳电子科技有限公司；AL104电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；Vortex Genie2涡旋仪，Scientific Industries；JP-100超声波清洗器，深圳市洁盟清洗设备有限公司；TDL-40B高速离心机，上海安亭科学仪器厂。

乙腈、冰乙酸，色谱纯，美国TEDIA公司；氯化钠，分析纯，国药集团化学试剂有限公司；MilliQ超纯水。嘧啶肟草醚标准品，≥98%，由沈阳化工研究院提供；过滤器，有机滤膜孔径为0.22 μm。

1.2 高效液相色谱条件

色谱柱：Hypersil C18不锈钢柱,250 mm×4.6 mm(id)×5 μm；柱温：35 ℃室温(温差变化不大于20 ℃)；流动相：V(乙腈)∶V(水)=70∶30，经0.22 μm孔径的滤膜过滤，并在超声波浴槽中超声脱气10 min；流速：1.0 mL/min；检测波长：210 nm；进样体积：20 μL。在上述条件下，嘧啶肟草醚的保留时间为8.5 min。

1.3 实验步骤

1.3.1 样品制备

将糙米样品用食品加工机粉碎，用四分法缩分，取1 000 g试样，于-20 ℃储存，以备实验需要。

1.3.2 样品前处理

称取上述制备好的糙米样品40 g(精确至0.01 g)于50 mL具塞塑料离心管中，依次加入10 mL水和10 mL乙腈，涡旋30 s，在(30±1)℃下超声10 min,取出过滤，于滤液中加入5 g氯化钠，涡旋30 s后以3 000 r/min离心5 min，取上清液过0.22 μm有机滤膜，待HPLC-UVD检测。

2 结果与讨论

2.1 色谱条件的选择

2.1.1 检测波长的选择

运用紫外分光光度计，对某一浓度的嘧啶肟草醚标准溶液作全波长扫描，其最大吸收波长在200 nm左右。而水的紫外截止波长亦为200 nm,因此，综合考虑多种因素，最终选定210 nm作为检测波长，此时嘧啶肟草醚有较强吸收峰，同时，杂质响应值小，也避免了溶剂和流动相的干扰。

2.1.2 流动相的选择

流动相选择是决定高效液相色谱分离效果好坏的关键。在分析过程中，为了得到较好的峰形，又要达到简便、快捷的要求，故选用甲醇、乙腈、四氢呋喃、水等各种体系和配比进行实验。结果表明，以V(乙腈)∶V(水)=70∶30为流动相，流速为1.0 mL/min时,分析时间较短,保留时间适中，色谱峰形尖锐、对称,基线平稳，且空白中无杂质干扰，可使复杂样品中微量的目标分析物与杂质得到较好的分离,见图1。

2.2 提取溶剂的选择

采用丙酮、甲醇和乙腈等作为提取溶剂，结果表明,以乙腈提取效果最佳。因为乙腈对大多数农药具有良好的溶解性，不仅可以高效率地提取目标化合物，且杂质较少，并可以通过盐析除去水分，为样品净化和提高回收率提供了便利。

2.3 方法的线性关系

称取一定量的嘧啶肟草醚标准品于50 mL容量瓶中，用乙腈稀释配成0.02、0.05、0.20、0.50、2.00 mg/L系列标准溶液，在1.2的仪器条件下进行测定，以嘧啶肟草醚标准溶液的质量浓度为横坐标和峰面积为纵坐标绘制标准曲线。结果表明，嘧啶肟草醚线性方程:y=508 448x-8 714.3，相关系数r=0.999 1，在0.020 mg/L～2.00 mg/L的范围内，说明嘧啶肟草醚有良好的线性关系。

2.4 方法的准确度与精密度

取空白糙米样品，添加水平为0.02、0.05、0.5 mg/kg，每个水平重复5次，按1.3.2和1.2做添加回收率实验，结果见表1。结果表明，嘧啶肟草醚在糙米中的平均回收率为77.2～92.2%，相对标准偏差(RSD)为3.0～9.3%，均符合农药残留分析要求[4]。

2.5 方法的灵敏度

我国现行标准中规定了糙米中嘧啶肟草醚的最大残留限量为0.05 mg/kg[5]。在上述仪器条件下，嘧啶肟草醚在糙米中的最小检出量为4.0×10-10g，最低检出值为0.02 mg/kg，低于规定的最大残留限量，完全满足于糙米中嘧啶肟草醚农药残留检测的要求。

图1 嘧啶肟草醚样品色谱图表1 嘧啶肟草醚在糙米中的准确度与精密度实验

样品添加含量/mg·kg-1回收率/%12345平均值RSD/%糙米0.5094.087.794.593.591.392.23.00.0571.573.776.389.675.077.29.30.0283.686.682.780.378.482.33.8

3 结论

本文建立了反相高效液相色谱检测嘧啶肟草醚在糙米样品中的残留分析方法。该方法前处理简单、快速、易操作，准确度，精密度、灵敏度均符合农药残留分析的要求，为大米及其制品中嘧啶肟草醚的快速检测提供了参考依据。