高效液相色谱-柱后衍生法测定蔬菜中克百威农药残留量的不确定度评定

高强　孙榕　高升成　杨治彪　罗慧

摘要    通过高效液相色谱—柱后衍生法测定蔬菜中克百威残留量，对测定过程中可能引入的不确定度进行了分析和评定，建立了不确定度评定的数学模型，从影响不确定度的标准溶液、样品前处理、仪器测量、数字修约等4个方面因素对不确定度分量进行合成计算。结果表明，该方法在本实验室的合成扩展不确定度UX=0.005 3 mg/kg，k=2。

关键词    高效液相色谱—柱后衍生法;克百威;蔬菜;农药残留;不确定度

中图分类号    TS207.5+3         文献标识码    A

文章编号   1007-5739（2019）19-0101-02                                                                                     开放科学（资源服务）标识码（OSID）

Evaluation  of  Uncertainty  in  Determination  of  Carbofuran  Pesticide  Residues  in  Vegetables  by  High  Performance  Liquid  Chromatography-Post-Column  Derivatization

GAO Qiang    SUN Rong    GAO Sheng-cheng    YANG Zhi-biao    LUO Hui

（Yulin Agricultural Products Testing Center of Shaanxi Province，Yulin Shaanxi 719000）

Abstract    The determination of carbofuran residue in vegetables by high performance liquid chromatography-post-column derivatization method was carried out to analyze and evaluate the uncertainty introduced during the determination.The mathematical model of uncertainty evaluation was established.The uncertainty components were synthesized and calculated from four factors：standard solution，sample pretreatment，instrument measurement and digital repair.The results showed that the uncertainty of the synthetic extension of this method in our laboratory was UX=0.005 3 mg/kg，k=2.

Key words    high performance liquid chromatography-post-column derivatization;carbofuran;vegetable;pesticide residue;uncertainty

1    材料與方法

1.1    仪器与试剂

Waters e2695高效液相色谱仪配FLR检测器;柱后衍生装置（美国Waters公司生产）;分析天平（美国Sartorius公司生产）;匀浆机（德国IKA公司生产）;氨基甲酸酯类农药克百威标准溶液，由农业部环境保护科研监测所生产，浓度为100 μg/mL;乙腈、甲醇、二氯甲烷，均为色谱纯;0.5 mol/L NaOH溶液、OPA稀释液、邻苯二甲醛、巯基乙醇，均为Pic-kering生产;其他试剂均为分析纯。

1.2    样品前处理过程

1.2.1    提取。称量25.00 g（m）样品于150 mL烧杯中，加入50.0 mL乙腈（V1），匀浆后过滤到装有5～7 g氯化钠的100 mL具塞量筒，收集滤液40～50 mL，盖上塞子，剧烈振荡1 min，室温静置30 min，使乙腈和水相分层;移取10.0 mL乙腈相（V2）于50 mL烧杯中，80 ℃水浴蒸发近干，加入2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）溶解残渣[1-2]。

1.2.2    净化。氨基柱用4 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）预洗平衡，加入上述净化液，收集于25 mL烧杯中，用2 mL甲醇+二氯甲烷（1+99）洗烧杯过柱，并重复1次;将25 mL烧杯中净化液50 ℃水浴氮吹近干，用甲醇准确定容至2.50 mL（V3），过0.22 μm滤膜，待测[3-4]。

1.3    测定结果计算

用单点外标法定量，试样中被测农药残留量按以下公式计算[5-6]：

式中：X为试样中被测农药残留量，单位为mg/kg，计算结果保留2位有效数字;Cs为标准溶液浓度，单位为mg/L;As为标准溶液峰面积;Ai为样品被测农药的峰面积;V1、V2、V3、m在上文已注明。

1.4    测量不确定度分量来源及数学模型的建立

农药残留检测的不确定度分量来源包括以下7个方面：①重复测量引入的不确定度分量，用A类方法评定;②检测设备引入的不确定度分量，用B类方法评定;③标准物质引入的不确定度分量，包含有证标准物质和上机工作液配制;④环境条件引入的不确定度分量，当检测在标准规定的环境条件下进行时，环境引入的不确定度可忽略不计;⑤抽样引入的不确定度分量，来样检测不考虑此分量;⑥数字修约引入的不确定度分量;⑦检测人员操作引入的不确定度分量，受其熟练程度及工作经验影响[7-8]。测量不确定度分量来源因果图见图1。

2    结果与分析

2.1    标准溶液引入的不确定度

2.1.1    标准物质。克百威标准溶液质量浓度为100 μg/mL，扩展不确定度为0.09 μg/mL，其相对标准不确定度：

2.6    合成相对扩展不确定度

在95%置信概率水平下，取K=2，则：

UX95%=K×uX=2×5.3%=10.6%

2.7    合成扩展不确定度

UX=0.050×10.6%=0.005 3（mg/kg）

3    结论与讨论

通过分析高效液相色谱—柱后衍生法测定蔬菜中克百威残留量各个步骤的不确定度发现，影响不确定度的因素主要为样品前处理引入的不确定度，其次是仪器检测引入的不确定度。因此，在检测工作中应抓住影响方法不确定度的主要因素，检测人员要提高对前处理操作规范性的控制，设备管理员要做好仪器设备的检定及期间核查工作，为进一步提高检测数据质量提供参考。

4    参考文献

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