全自动血细胞分析仪与血涂片细胞形态学在血常规检验中的联合应用分析

张海燕，袁甜

泗阳县人民医院检验科，江苏宿迁 223700

血液疾病的发生一般与血细胞形态结构、数量的异常改变有关，血常规检查结果能够较为准确地反映血细胞性质，是血液科临床检验中的重要项目[1-2]。全自动血细胞分析仪具有操作方便、检验快速等优势，还设置有报警系统，若血细胞在分类、计数上出现异常，则能够及时得到反馈，但血细胞分析仪对于血细胞的形态结构的检验存在欠缺、仪器系统性误差较大等问题，因此需借助血涂片镜检进一步确认，以避免漏诊、误诊情况[3-4]，为了探讨全自动血细胞分析仪联合血涂片细胞形态学检验方法在血常规检验中的应用价值，该研究回顾性分析比较了2018年3—10月该院检验科接收的84例血液样本采用联合检验、血细胞分析仪独立检验的结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院检验科接收的血液样本共84例，所选对象均为入院进行体检者。血样收集、涂片后，首先利用全自动血细胞分析仪对上述样本进行血常规指标检验，后进行细胞形态学镜检、细胞计数等复检项目，纳入标准：所选患者均自愿参与该次研究，签订研究同意协议书，研究经医院伦理委员会批准。排除标准：研究排除合并恶性肿瘤疾病、精神疾病以及急性传染病的患者。该组受试者年龄13～84岁，平均年龄（43.9±5.27）岁，男性 50 例、女性 34 例。

1.2 方法

研究对象均保证在空腹8 h条件下于早间7：00-9：00完成血样采集，抽血方法为肘静脉采血法，血量为2～3 mL，将血样分装于无菌试管中，加入3 mg的EDTA-K2做抗凝处理，混匀后于室温条件静置30 min，送至检验科检验。临床检验操作人员按《临床检验操作规程和质控标准》并完成血液涂片、染色，染色方法为瑞特-姬母萨染色混合染色法。首先利用迈瑞CAL8000全自动血细胞流水线检测系统及配套试剂对血样进行检验，对 WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 等血常规指标进行计数，并对血细胞形态、体积等进行初步描述和筛查分析；后将血涂片送至50倍镜油镜下对有核细胞进行复检 （包括形态学镜检和细胞计数、血液寄生虫检查等项目），为了杜绝细胞变异对结果的影响，全部样本均应在送检后的3 d内完成检验和复检的全部项目，并制成检验报告。

1.3 血常规异常样本的阳性筛选标准

（1）血细胞分析仪，若符合下述结果之一检出血常规阳性：①白细胞计数（WBC）＞28.0×109/L 或＜3.0×109/L；②血小板（PLT）＞300.0×109/L 或＜60.0×109/L；③中性粒细胞计数（NE）＞7.5×109/L 或＜2.0×109/L；④淋巴细胞计数（LY）：＞4.0×109/L 或＜0.8×109/L；⑤嗜酸性粒细胞占白细胞总数百分比（EO）：＞0.08%或＜0.004%；⑥单核细胞计数（MO）＞0.8×109/L 或＜0.3×109/L。

（2）血涂片细胞形态学，若符合下述条件之为阳性：①符合血细胞分析仪血常规异常标准之一；②晚幼粒（晚幼红）：胞体直径 10～16 μm，细胞核变粗、胞质增多呈红色、充满中性颗粒；③异型淋巴细胞（异淋）；④中性粒细胞中性毒变：中性粒细胞大小不均、核固缩、核左移、空泡变性、颗粒增粗；⑤红细胞形态异常：红细胞大小不一、呈现球形、椭圆形、靶形等不规则形状，中央苍白区扩大。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件分析数据，计数资料以[n(%)]表示，组间差异比较采用 χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

84份血样中，血细胞分析义阳性检出率为47.6%，血涂片、血细胞义联合阳性检出率为65.5%（P＜0.05）。 血细胞分析技术检验结果中，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO等血常规指标检出阳性率分别为45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%；联合检验结果显示，上述指标检出阳性率分别为47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和15.5%，其中两组检查结果中EO、MO阳性率、总阳性检出率比较差异有统计学意义（P＜0.05），其余血常规项目差异无统计学意义（P＞0.05），见表 1。

表1 全自动血细胞分析技术、血涂片细胞形态学分析技术对84例血液样本的血常规项目阳性检出率比较[n(%)]

3 讨论

血液疾病的发生与血细胞结构形态、功能和比例发生异常改变密切相关，血常规检查主要反映血细胞的分类比例、计数情况，可为血液疾病和关联性疾病的临床诊治提供重要参考[5]。

全自动血细胞分析仪基于电学原理，操作简便、检测快速、精确度高，较传统人工镜检更具优势[6]，然而，临床目前使用的血细胞分析仪一般不具备细胞形态学分析功能，而血细胞的形态结构分类又较为复杂，细胞变异则能对染色和分类造成巨大影响[7]；此外，受操作人员因素、仪器系统性误差的影响，不同型号的血细胞分析仪对于相同血液样本的分析结果又具有较大的差异性，这些因素都使独立的血细胞分析仪在血常规临床检验中的应用受到局限[8]。然而人工的血液涂片镜检虽然具有速度慢、工序复杂等缺点，但在高倍显微镜下血细胞的形态学特征都能得到立体、直观反映，从而使血细胞的分类和计数更加精确，也是血常规检验的金标准，可为血细胞分析仪检验结果提供补充和确证[9]。

该组84份样本的血细胞分析结果显示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO 几项血常规指标阳性检出率分别为 45.2%、28.6%、35.7%、21.4%、2.4%和4.8%，总计47.6%； 联合检验结果显示，WBC、PLT、NE、LY、EO、MO几项血常规指标阳性检出率则分别为47.6%、30.9%、39.3%、22.6%、11.9%和 15.5%，总计 65.5%，经统计学分析比较发现，血细胞分析仪和血涂片、血细胞仪联合检验方法对84例血样的血常规检验结果中的EO、MO阳性率、总阳性检出率比较差异有统计学意义 （P＜0.05），其余血常规项目差异无统计学意义（P＞0.05），这也与杨巍[10]关于血涂片镜检结果中对中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、淋巴细胞镜检结果分别为56.32%、9.34%、3.12%、25.87%，与血细胞分析仪检测结果58.15%、10.02%、2.98%、24.69%比较差异无统计学意义（P＞0.05），血涂片镜检下的嗜碱性细胞镜检结果为0.82%与血细胞分析仪检验结果0.48%比较差异有统计学意义（P＜0.05）的结果符合。

综上所述，在血常规检验中联合应用血细胞分析技术、血涂片细胞形态学检验技术有助于提高血常规异常样本的检出率，弥补血细胞技术在细胞形态学检验方面的不足。