天麻醇提取物对模型小鼠学习记忆的改善作用*

冯 晋，何芳雁，夏霜莉，郑秋合，代 蓉

（云南中医药大学中药学院，云南 昆明 650000）

天麻，又名赤箭，作为我国名贵中药，可作为保健食品的材料，并进入了食药物质目录[1]。《神农本草经》记载：“赤箭辛，温，无毒，久服益力气，长阴肥健，轻身增年。”本课题组前期研究表明，天麻乙酸乙酯提取物可改善模型小鼠学习能力，降低脑内胆碱酯酶的活性[2]，提示天麻可辅助改善记忆[3]。本实验中对天麻醇提取物在改善记忆方面的效果进行了评价[3]。现报道如下。

1 材料与方法

1.1 动物、仪器与试药

动物：清洁级昆明种小鼠100只，体质量（20±2）g，雌雄各半。由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供，动物生产许可证号SCXK（湘）2019-0004。标准条件饲养，自然进食、饮水，适宜温度、湿度，人工黑暗／光照交替。

仪器：TM-Vision型Morris行为学水迷宫（成都泰盟软件有限公司）。

试药：天麻醇提物（自制）；吡拉西坦片（杭州民生药业有限公司，批号为 20171204，规格为每片 0.4 g）；氢溴酸东莨菪碱注射液（遂成药业股份有限公司，批号为2017110908，规格为每支 1 mL ∶0.3 mg）；氯霉素注射液，国药集团容生制药有限公司，批号为151108，规格为每支 0.25 g ∶2 mL）；0.9% 氯化钠注射液（广西裕源药业有限公司，批号为P15070303，规格为每瓶100 mL∶0.9 g）；无水乙醇为分析纯，水为蒸馏水。

1.2 方法

分组、给药及建模：将100只小鼠随机分为正常对照组（A组，等体积蒸馏水），模型组（B组，等体积蒸馏水），吡拉西坦组（C 组，700 mg／kg），天麻醇提取物高、低剂量组（D1组、D2组，1.0，0.4 g ／kg），灌胃给药，灌胃体积为每10 g体质量0.2 mL，每天1次，连续30 d。灌胃结束第2天开始，B组，C组、D1组、D2组大鼠均先后予以腹腔注射东莨菪碱（1 mg ／kg）、氯霉素（200 mg ／kg），以及灌胃20%乙醇（每10 g体质量0.2 mL），依次复制小鼠记忆获得、巩固和再现障碍模型[4]，均每天1次，连续6 d，间隔5 d再进行下个建模。A组小鼠腹腔注射等体积0.9%氯化钠注射液和灌胃给予等体积蒸馏水。

Morris水迷宫试验[5-7]：行为学检测与建模同时开始，共进行6 d，第1～2天为训练期，第3～5天为测试期，以小鼠平均游泳时间作为衡量其学习记忆能力的指标，第6天为空间探索测试期，判断小鼠学习记忆和认知能力。测定小鼠120 s内的逃避潜伏期和空间搜索距离，计算滞留时间、搜索距离百分比。

1.3 统计学处理

采用SPSS21.0统计学软件分析。计量资料以表示，行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 对记忆获得障碍模型小鼠学习记忆行为的影响

与A组比较，B组小鼠逃避潜伏期、搜索距离均显著延长，滞留时间百分比、搜索距离百分比均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）；与B 组比较，C 组、D1组、D2组逃避潜伏期和搜索距离均显著缩短（P＜0.01或P＜0.05）。详见表1。

表1 天麻醇提取物对记忆获得障碍模型小鼠学习记忆行为的影响（X ± s，n=10）

2.2 对记忆巩固障碍模型小鼠学习记忆行为的影响

与A组比较，B组小鼠逃避潜伏期、搜索距离均显著延长，滞留时间百分比、搜索距离百分比均显著降低（P＜0.01或P＜0.05）；与 B 组比较，C 组、D1组、D2组小鼠逃避潜伏期和搜索距离均显著缩短，C组和D1组小鼠滞留时间百分比和搜索距离百分比均显著升高，P＜0.01或P＜0.05。详见表 2。

表2 天麻醇提取物对记忆巩固障碍模型小鼠学习记忆行为的影响（X ± s，n=10）

2.3 对记忆再现障碍模型小鼠学习记忆行为的影响

与A组比较，B组小鼠逃避潜伏期显著延长（P＜0.01）；与B组比较，C组和D1组小鼠逃避潜伏期显著缩短（P＜0.01）。详见表 3。

表3 天麻醇提取物对记忆再现障碍模型小鼠学习记忆行为的影响（X ± s，n=10）

3 讨论

学习和记忆的基本过程可分为获得、巩固、再现3个阶段。东莨菪碱作为M胆碱受体拮抗剂，可降低大脑皮层和海马胆碱能系统活性，阻碍记忆的获得[8]；蛋白质是长期记忆形成的内在基础，记忆巩固与脑内蛋白质的合成密切相关，氯霉素是蛋白质合成抑制剂，可干扰记忆巩固过程；乙醇为中枢神经系统抑制剂，可导致记忆再现障碍。本实验中采用东莨菪碱、氯霉素、乙醇分别建立小鼠学习记忆（获得、巩固和再现）障碍模型。

Morris水迷宫是检验动物学习记忆能力最常用的方法，可评价空间学习记忆能力[9]。本实验结果表明，天麻醇提取物能缩短模型小鼠的逃避潜伏期和搜索距离，延长滞留时间百分比和搜索距离百分比，提示其对学习记忆过程的不同阶段、不同环节均有一定改善作用。

本课题组前期对天麻药材粉进行了安全性毒理学评价，结果显示，天麻醇提取物按最大给药量5 g／kg灌胃给予实验小鼠，未发现与受试物相关的毒性作用，相当于成人用量的140倍。故本实验中设置高剂量组为人体推荐量的25倍，即1.425 g／kg，低剂量组为人体推荐量的 10 倍，即 0.57 g／kg，经换算，分别为 1.0，0.4 g／kg。

综上所述，天麻醇提取物对模型小鼠的学习、记忆具有一定改善作用。