李建丽：技术创新驱动疫苗质量，科学免疫助力动物健康

随着养殖技术的不断探索和升级，养殖“四化”，即规模化、集约化、专业化和智能化， 可能成为当今养殖业发展的必由之路，且势不可挡，当然， 为之保驾护航的兽用疫苗生产、质控和评价检测等技术，也在不断升级和转化，呈百花齐放，二者共同推动着科学养殖和动物健康。

1 技术创新，品质升级

近年来，细胞悬浮培养、基因工程表达、反向遗传操作、蛋白纯化、耐热保护和免疫佐剂等多项技术，单一或联合用于兽用疫苗的生产中，如口蹄疫疫苗、猪圆环病毒2 型疫苗、禽流感疫苗（H5+H7）等，不仅提高了疫苗的生产效率和产能，更保障了疫苗质量的批内一致和批间稳定，并为多联多价疫苗的研究和制备提供了技术支撑。

2 精准定量，科学质控

在一定范围内，疫苗免疫效果与其抗原含量成正相关。 在兽用疫苗生产与检验规程中，最常见方法有兔体感染量 （RID）、半数组织细胞感染量（TCID50）、鸡胚半数感染量（EID50）、鸡胚半数致死量（ELD50）等，这些方法虽可用于半成品或成品的质量控制， 但并不能完全体现疫苗中有效的抗原成分和含量， 因为半成品或成品中的杂蛋白等可能会干扰其免疫效果，因此，如何准确定量半成品或成品中的抗原含量， 已成为兽用疫苗质量控制的关键技术。 如口蹄疫疫苗在生产中， 采用纯化技术去除多数杂蛋白， 并对其有效抗原成分146S 准确定量后进行成品疫苗配置， 确保每头份中有效抗原的精准定量， 大大提升口蹄疫疫苗的临床免疫效果， 避免免疫失败和免疫副反应的发生。 再如，在生产猪圆环病毒2 型灭活疫苗的过程中， 采用蛋白层析纯化技术和有效病毒粒子蛋白定量技术， 大幅提升临床免疫效果。 再如，猪瘟活疫苗（传代细胞源）常采用RID 检验疫苗质量，但由于检验用兔子的差异化等因素，造成疫苗质量的不稳定， 因此采用免疫荧光法和RID 双重标准， 准确测定猪瘟病毒含量， 确保猪瘟疫苗免疫效果的稳定性。

3 联合免疫，科学减负

在实际养殖生产中， 无论是家禽、水禽，还是家畜，疫病呈现“老病新发、新病不断”的特征，如家禽的新城疫基因VII 型、禽腺病毒；水禽坦布舒病毒、呼肠孤病毒、星状病毒等；非洲猪瘟、猪流行性腹泻病毒、德尔塔冠状病毒等。 而在畜禽养殖过程中， 必须免疫的疫病均多达10种以上，如何减少免疫次数、降低免疫应激、规避交叉感染风险、降低人力物力等，科学减负，已成为畜禽养殖生产中的关键性难题， 因此开发高效的多联多价疫苗势在必行。 其中家禽多联多价疫苗技术较为成熟，并广泛应用，如新支流、新流腺等三联苗；新支流法、新支减脑等四联苗， 新支流法腺等五联苗也正在研发中； 但家畜多联多价疫苗的研发和应用较为落后，但已有突破，如圆支二联苗和链球菌-副猪嗜血杆菌二联亚单位苗已经上市。 当然，猪瘟-伪狂犬二联活苗、圆-支-副、圆-蓝-伪、 圆-支-蓝等多联苗也研发中， 这些多联多价疫苗的成功研发和上市，必将满足畜禽“四化”养殖的需要，为畜禽免疫减负。

4 精准检测，科学养殖

随着非洲猪瘟、蓝耳病、圆环病毒、 高致病性禽流感等传染病不断进入中国， 必须重视流行病学调研及其检测技术研究与应用。 其中荧光定量PCR 检测技术以其灵敏、准确、定量、快速等优势，精准指导非洲猪瘟早期 “拔牙” 生产。 另外，ELISA、中和抗体检测技术、微量凝集／血凝抑制试验等方法，也需要不断改良、升级和精准检测，以满足免疫效果评价、流行病学调研等需要，助力科学养殖。