HPV 阳性患者行宫颈活检及免疫组化P16 蛋白检测的临床意义分析

李紫燕

（常州市肿瘤医院 病理科，江苏 常州 213000）

0 引言

宫颈癌属于临床常见的恶性肿瘤之一，对女性生命健康造成严重威胁。宫颈癌和癌前病变与高危型人乳头瘤病毒（HPV）感染关系密切[1]。早期检测高危型HPV，对筛查宫颈癌和癌前病灶意义重大。另有研究指出，HPV 持续性感染会造成P16 蛋白过度表达[2]。本研究选择2018 年1 月至2019 年3 月在我院经第二代杂交捕获法（HC2）、薄层液基细胞学技术（TCT）联合检测确诊的135 例HPV 阳性患者，旨在分析HPV 阳性患者行宫颈活检及免疫组化P16 蛋白检测的临床意义，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018 年1 月至2019 年3 月在我院行常规子宫颈活检的135 例高危型HPV 阳性患者为研究对象，均经HC2、TCT 联合检测确诊；其中年龄20-78 岁，平均（45.31±2.25）岁。免疫组化及病理切片均由两位高年资医师联合诊断。入组患者均签署知情同意书。本研究经医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法

1.2.1 宫颈细胞学

使用TCT 实施宫颈细胞学检查，用TBS 分类法诊断。分为未明确诊断意义的不典型鳞状上皮细胞（ASU）、无宫颈上皮内病变（NILM）、高度鳞状上皮病变（HSIL）、低度鳞状上皮细胞病变（LSIL）。

1.2.2 高危型HPV 检测

使用专用细胞采集器采集标本，HC2 法定量检测HPV68、59、58、56、52、51、45、39、35、33、31、18 型等13 种HPV-DNA 含量。使用美国Digene公司HC2 基因杂交捕获仪与HPV DNA 高危型检测试剂盒。结果判断：HPV-DNA＜1.0 pg/mL 为阴性，反之为阳性。

1.2.3 免疫组织化学

使用Max Vision 法对P16 蛋白检测。经4 %甲醛溶液固定标本，常规石蜡包埋，4 μm 切片备用。严格按照试剂盒说明书进行染色操作。试剂盒与抗体均购自福州迈新生物技术有限公司。P16 表达定位于细胞质或细胞核，≥90%的上皮细胞弥漫表达为（+++），10-90 %的上皮细胞表达为（++），经副基底层、基底层有少量散在细胞P16 阳性为（+），鳞状上皮无表达（-）。

1.3 统计学分析

应用SPSS 21.0 统计软件对数据分析，计数资料以n（%）表示，卡方（χ2）检验，计量资料用(±s)表示，t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 宫颈细胞学与宫颈活检

宫颈细胞学：135 例患者经检测HSIL 27 例，LSIL 46 例，ASU 19 例，NILM 43 例。宫颈活检：高级别上皮病变者33 例，低级别上皮病变者59 例，炎症/萎缩43 例。TCT 检查NILM 中经病理活检有5例为阳性，漏诊率为11.63%，见表1。

表1 宫颈细胞学与宫颈活检对比

2.2 P16 蛋白表达

高级别上皮病变中P16 蛋白层弥漫阳性，低级别上皮病变中大部分患者P16 呈局灶性阳性，阳性细胞占据鳞状上皮的下1/3；炎症/萎缩中多无P16 蛋白表达。P16 蛋白在高级别上皮病变、低级别上皮病变、炎症/萎缩阳性表达率分别为100.00 %（33/33）、83.05 %（49/59）、34.88 %（15/43），差异有统计学意义（χ2=45.653，P=0.000），见表2，图1-3。

表2 P16 蛋白在宫颈活检中的表达

图1

图2

图3 高级别上皮病变P16 蛋白表达（HE×100）

3 讨论

女性生殖系统HPV 感染极为常见，感染后8-10个月多数患者症状可自行消除，仅有5 %-10 % 患者存在持续感染，并发展为宫颈癌高危人群[3-4]。HPV 是宫颈癌的重要病因，而高危型HPV 感染是宫颈癌发生的必要条件。我国宫颈癌的普查率相对较低，尚无成熟的筛查模式。早期发现高危型HPV感染，尽早实施正确有效的干预措施治疗，预防宫颈癌的发生。

高危型HPV 检测与宫颈细胞学检查是临床用于宫颈病变筛查的常用手段，可有效确定高风险人群，提高诊断准确率，但细胞学检查结果易受到检测医生的主观影响，重复性欠佳。本研究中，TCT 检查NILM 中经病理活检有5 例为阳性，漏诊率为11.63 %，提示针对TCT 和HPV 阳性者，应及时实施宫颈活检检查确诊，降低漏诊率。p16 基因位于人类染色体9P21，属于抑癌基因，对有丝分裂具有负反馈调节作用。在正常组织和HR-HPV 阴性的宫颈癌中无p16 阳性表达，但p16 阳性表达在宫颈癌前病变和HR-HPV 阳性的宫颈癌中较高[5]。相关研究显示[6]，多种肿瘤的发生、进展与P16 蛋白异常甲基化密切相关。P16 蛋白于宫颈组织中强阳性表达，提示宿主细胞中的HPV进行整合。P16 蛋白与HR-HPV 联合检测，可有效分流TCT 中ASUS 患者。本研究结果显示，P16 蛋白在高级别上皮病变、低级别上皮病变、炎症/萎缩阳性表达率分别为100.00 %、83.05 %、34.88 %，随着病变级别的进展P16 蛋白表达逐渐升高。高级别上皮病变、低级别上皮病变、炎症/萎缩中P16 蛋白分别呈弥漫阳性、局灶性阳性、无表达，提示检测P16 蛋白表达情况，利于临床鉴别炎症/萎缩、宫颈上皮病变。

综上所述，对HC2 筛查高危型HPV 阳性患者应及时实施病理活检联合免疫组化P16 蛋白检测，降低误诊或漏诊率，利于临床早期实施干预措施，改善患者预后。