老年革兰阴性杆菌感染患者脂多糖测定的临床意义

张锡峰，黄媛，邢鼐，刘海滨，盛尚春

(成都大学附属医院检验科 四川 成都 610081)

我国60岁以上的人口达到1.6亿，已经逐渐进入人口老龄化的社会[1]。由于老年人免疫功能下降，各器官逐渐老化，导致老年人细菌感染逐渐增加。当老年人感染细菌时，需要快速诊断细菌所导致的疾病，如败血症，菌血症等，有助于老年患者早日康复。革兰阴性杆菌感染是细菌感染的主要致病菌，能引起各系统感染[2-3]。脂多糖是革兰阴性杆菌细胞壁上的特有结构，与感染有密切关系[4-5]。对老年患者进行革兰阴性杆菌脂多糖检测，可能会有助于诊断感染。本文旨在研究脂多糖在老年患者革兰阴性杆菌感染中的临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2017年6月至2018年5月住院的老年患者238例，男118例，女120例。入组标准：年龄大于60岁，24h内未使用抗生素，知情同意者。排除标准：存在外伤、烧伤等外科疾病者。

1.2 材料 MB-80微生物快速动态检测系统，T01智能恒温仪，动态内毒素检测试剂盒,(批号EKT110，EKT150，EKT200)，无热源采血管，吸头，标准平底试管，均由北京金山川科技发展公司提供，全自动微生物分析仪(包括配套试剂与板条)和药敏纸片购于德国西门子公司；M-H琼脂购于美国BD公司；血琼脂和巧克力平板购于成都瑞琪科技实业有限公司。

1.3 方法

1.3.1 革兰阴性杆菌培养 采集患者血液、痰液等标本进行培养及药敏试验，依据培养的结果分为阳性观察组和阴性对照组。两组在年龄、性别等比较差异均无统计学意义，见表1。

表1 阳性观察组和阴性对照组年龄和性别比较

1.3.2 血浆制备 用一次性无菌无热源真空采血管采取静脉血4ml，进行3000r/min离心10min。取血清0.1ml，加入含有0.9ml样本处理液中，混匀70℃孵育10min，取出立刻放入冷却槽中5min，即为待测血清样品。

1.3.3 测定分析 取待测血请0.2ml直接加入酶反应主剂中，溶解混匀后使用微量加样器全部移至9×65mm标准标准无热源平底试管中(不能产生气泡)。立即插入MB-80微生物快速动态检测系统中进行反应，待反应结束由标准曲线自动计算出待测血浆中脂多糖的含量，整个操作过程，注意避免微生物及细菌污染，若反应曲线掉下，立即重做。

1.4 统计学处理 应用SPSS 17.0统计软件进行统计处理，采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阳性观察组与阴性对照组脂多糖水平比较阳性观察组老年患者的脂多糖含量明显高于阴性对照组老年患者，两者比较差异有统计学意义 (P＜0.05)。 见表 2。

表2 阳性观察组与阴性对照组脂多糖水平比较

2.2 阳性观察组细菌分布 其中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌占比最高，见表3。

表3 阳性观察组细菌分布

2.3 细菌的病区分布 呼吸内科和ICU检出革兰阴性菌最高，见表4。

表4 628株细菌的病区分布构成比

3 讨论

随着老龄化程度不断攀升，老年人体质差，抗病能力较差，因此老年人成了细菌感染的易感人群，使得老年人生活质量下降。近年来，老年革兰阴性杆菌感染有逐年增加的趋势，早期抗菌药物的选择方向非常关键[6-7]，由于细菌培养鉴定及药敏实验一般要36～48小时后出结果。一定程度上延迟了治疗，有可能延误病情。

脂多糖是细菌致病诊断的一个重要方面，通过诱导宿主一系列的病理改变，脂多糖是革兰阴性杆菌细胞壁的成分，细菌死后溶解释放出来。因此，革兰阴性杆菌的数量和脂多糖成正比[8-9]。因此，对老年患者进行血清脂多糖测定，对早期诊断、评价感染源、细菌感染的鉴别以及控制细菌感染都有重要意义。

本次研究结果显示，革兰阴性杆菌感染的老年患者血清脂多糖的水平明显高于非革兰阴性杆菌感染老年患者，因此，脂多糖对判断革兰阴性杆菌感染有重要作用。早期的脂多糖的明显升高和感染有关[10-11]。可作为早期感染的预测指标，临床医生可以根据脂多糖水平对老年革兰阴性菌感染患者及时采取治疗[12-13]。而且通过培养得到老年感染革兰阴性菌最为常见的菌是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌，大肠埃希菌，和医院感染主要革兰阴性菌基本一致[14]。这为临床医生治疗革兰阴性杆菌感染提供一定依据。

通过对科室分布构成比可以看到，呼吸科和重症监护室的老年患者，感染革兰阴性杆菌的机会比较大。在这两个科室，患者病情重，抵抗力差，一旦出现感染会不同程度加重患者的原发疾病，特别是肺部阴性菌感染[15]，例如肺炎克雷伯菌[16]感染，因此，早发现中高危患者很重要，而且早选择抗菌药物对病情的缓解也是十分重要的。测定血清脂多糖可以节约时间，提高治疗效果。

综上所述，脂多糖检测方法简便快速，克服痰培养，血培养等常规培养，检测结果滞后等缺点，老年患者测定血清脂多糖可以帮助诊断革兰阴性杆菌感染，也有助于指导临床医生合理使用抗菌药物，预测患者疾病转归。