慢性乙型肝炎患者血清维生素D的表达水平及意义

朱晓宾

(辽阳市中医院 检验科,辽宁 辽阳111000)

25-羟维生素D[25(OH)D3]作为检测维生素D(VitD)的稳定指标[1],是由外源性维生素D在肝脏中经由25-羟化酶羟化合成的。维生素D不仅在钙磷代谢调节中发挥重要作用,而且也参与免疫调节、炎症、细胞增殖及分化等过程[2]。在过去的研究结果表明,维生素D与各种慢性疾病的各个阶段均存在着相互关系,基线维生素D水平低的患者终末期肝病及死亡的发生率高于维生素D水平正常的患者[3,4]。在对慢性乙型肝炎患者的检测中,人们发现存在明显的维生素D缺乏症状。本文通过检测慢性乙型肝炎患者血清25(OH)D3与肝功能相关指标的表达水平,分析血清25(OH)D3与这些指标之间的相关性,探讨维生素D与慢性乙型肝炎之间的临床意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选择2016年7月至2017年7月在我院收治的慢性乙型肝炎患者90例,男53例,女37例。根据乙肝病毒DNA检测结果再分为两个亚组:Ⅰ组45例慢性乙型肝炎患者HBV DNA< 2000 IU/mL,男26例,女19例,年龄32-50岁之间,平均年龄(41.65±8.16)岁；Ⅱ组45例性乙型肝炎患者HBV DNA≥ 2000 IU/mL,男27例,女18例,年龄31-49岁之间,平均年龄(40.32 ± 8.24)岁。另选取25例正常健康体检者为对照组(HC组),男13例,女12例,年龄27-49岁之间,平均年龄(38.5± 10.12)岁。两组患者的性别比、年龄等一般资料差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2 样本采集

慢性乙型肝炎组患者和纳入健康体检组的人员于清晨采集空腹静脉血3 ml,离心分离血清,-70℃保存。

1.3 血清25(OH)D3及肝功能指标检测

采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清25(OH)D3水平,ELISA试剂盒购自上海卡努生物科技有限公司,检测步骤参照试剂盒说明书进行。使用多功能酶标仪(MultiSkan FC)在450 nm波长处测定各样本25(OH)D3表达水平,该酶标仪购自Thermo Scientific公司。

HBV-DNA检测采用荧光定量 PCR,仪器购自罗氏诊断有限公司。谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆血红素(TBIL)等指标采用全自动生化仪检测,仪器及检测试剂购自Beckman公司。

1.4 统计学处理

所得数据经整理后使用SPSS20.0进行统计分析。计量资料以均数(mean)±标准差(SD)表示,计数资料分析采用χ2检验。组间两两比较采用Fisher LSD法。相关性分析采用Pearson相关性检验。P<0.05代表具有统计学差异。

2 结果

2.1 HBV组患者与HC组人员血清25(OH)D3表达水平比较

对HBV组患者和HC组人员血清25(OH)D3表达水平进行ELISA检测发现:HBV组患者25(OH)D3水平明显低于HC组(P<0.001)。HBV组中的Ⅰ组和Ⅱ组两个亚组的血清25(OH)D3水平与HC组相比同样显著降低,差异具有统计学意义(P<0.001)。见表1。

表1 HBV患者与HC组血清25(OH)D3水平比较(mean±SD)

注:*P<0.001,与HC组相比。

2.2 HBV组患者与HC组人员肝功能指标比较

收集检测HBV组患者和HC组人员肝功能检测指标,HBV组患者中Ⅱ组HBV-DNA、ALT、AST表达水平明显高于HBV组中的Ⅰ组以及HC组(P<0.001),TBIL表达水平三组之间没有明显差异存在。见表2。

表2 HBV患者与HC组肝功能水平比较(mean±SD)

注:*P<0.001,Ⅱ组、Ⅰ组和HC组相比。

2.3 血清25(OH)D3与患者肝功能指标的相关性

Pearson相关分析显示,在HBV患者组中血清25(OH)D3与HBV DNA存在负相关性(r=-0.292,P=0.44),其中Ⅱ组25(OH)D3与HBV DNA之间的负相关性更加显著(r=-0.413,P<0.001)。血清25(OH)D3与ALT、AST、TBIL之间并不存在相关性。见表3。

表3 血清25(OH)D3与肝功能指标相关性比较

3 讨论

乙肝病毒感染仍为全世界重要的公共卫生问题,目前约超过2.4亿人是乙肝表面抗原携带者[4]。在临床上,研究人员发现许多的慢性肝脏疾病患者普遍存在维生素D缺乏的现象。无论慢性肝病的病因是什么,许多临床实验和meta分析都将维生素D的缺乏与肝纤维化联系在一起,然而肝病与维生素D之间的因果关系却不是十分的清楚[5]。

维生素D具有提高患者的细胞免疫功能,避免机体遭受损伤的功能,维生素缺乏可能会降低患者的免疫能力,使得患者对慢性乙型肝炎病毒的易感性提高[6]。在我们的研究中,我们首先检测了在慢性乙型肝炎患者和健康对照组人员中血清25(OH)D3的含量。结果发现在慢性乙型肝炎患者组中,血清25(OH)D3的含量明显下降。同时,我们观察到HBV DNA高载量组(Ⅱ组)也比低载量组(Ⅰ组)25(OH)D3含量要低。进一步,我们对三组人员的肝功能指标进行检测,发现Ⅱ组HBV DNA、ALT和AST表达水平明显上升,而三组患者的TBIL水平却没有明显的变化。这些结果表明维生素D在慢性乙型肝炎中具有明显的免疫调节作用和抗病毒作用[7]。

通过Pearson相关性检验,我们发现在慢性乙型肝炎患者中血清25(OH)D3与HBV DNA水平存在负相关性,说明维生素D含量偏低与慢性乙型肝炎患者机体中的病毒高复制存在着内在的关联性。但是维生素D的水平与ALT和AST并不存在明显的负相关性,这与一些实验结果相矛盾[8]。通过实验,我们认为在慢性乙型肝炎的患病进程中,维生素D的缺乏对于HBV的复制起着十分重要的作用。25(OH)D3可以抑制HBV DNA的复制,从而达到抗炎的作用,这为以后的研究提供了进一步的支持与保证。