温度对乌苏里拟鲿受精孵化及仔鱼生长的影响

周明华，余祥胜，强晓刚，史文竞

（1.盱眙县淮河镇农业技术服务站，江苏 淮安 211707；2.淮安市水产技术指导站，江苏 淮安 223001；3.淮阴师范学院生命科学学院，江苏 淮安 223300）

乌苏里拟鲿（Pseudobagrus ussuriensis）为鲿科，拟鲿属鱼类，广泛分布于黑龙江、珠江，洪泽湖、太湖等水域[1,2]。乌苏里拟鲿肉质细嫩、味道鲜美、市场价值高，受到广大消费者和养殖户的欢迎[3]。但是近年来，由于人们的大肆捕捞及环境污染的日益加重，野生资源日益减少，目前在很多自然分布区都已很难捕获野生个体[4]。目前，已有较多关于乌苏里拟鲿的相关研究报道，但大多数研究集中于人工繁殖[5-9]，苗种培育[10-12]，营养生理[13]，遗传学[3,14-17]等方面，对于胚胎发育的研究亦有少量报道[18,19]。

温度是一种重要的环境胁迫因子，温度对于鱼类的胚胎发育[20]及生长[21-23]有重要的影响。温度通过影响鱼类体内消化酶的活性及对食物的消化吸收率，从而影响鱼类的代谢反应速率，进而影响鱼类的胚胎发育、存活和生长。高温还会增加鱼类细胞中的氧化还原压力，降低鱼类的免疫能力，从而导致鱼类的疾病甚至死亡[21]。在适温范围内，温度可以通过促进鱼类新陈代谢速率的提高，从而影响鱼类的存活和生长[24]。Hofmann和Fischer[25]对江鳕的研究中指出，在一定的温度范围内，升高温度可以提高鱼类的摄食率和生长率，从而促进生长；而当温度超过最适温度范围后，随着温度的升高，生长率会逐渐下降。

目前，温度对乌苏里拟鲿胚胎发育及生长影响的相关研究还严重不足。乌苏里拟鲿的最适温度范围为24～32℃，故该试验共设置24、26、28和32℃四个温度组，研究温度对乌苏里拟鲿胚胎发育及胚后30 d的生长的影响，以期为乌苏里拟鲿的苗种培育提供理论指导。

1 材料与方法

1.1 材料

试验用亲鱼来自淮安市水产技术指导站，选择体表光滑匀称、无病症、有较强活力、体格健壮、体质量较大、性腺发育成熟的个体，作为试验用亲鱼。雌雄分开，暂养于水泥池中，等待催产。

1.2 试验设计

试验共设置24、26（对照组）、28和32℃四个温度梯度，采用武汉瑞华仪器所生产的HP 1 000 GS型智能人工气候箱对温度进行控制。试验持续至乌苏里拟鲿仔鱼胚后30 d，胚胎发育期间统计受精率及孵化率，仔鱼出膜后每隔5 d挑选50尾仔鱼，测量体长、体质量，并据此计算生长率。出膜后，挑选500尾活力良好的仔鱼分开饲养，30 d后，统计乌苏里拟鲿仔鱼的存活率。试验期间所用养殖容器是规格为60 cm×40 cm×20 cm的塑料水箱。试验共2次重复。

1.3 催产及人工授精

选择绒毛膜促性腺激素（HCG）、人工合成丘脑下部促黄体素释放激素类似物（LRH-A）、马来酸地欧酮（DOM），这3种常用的催产激素处理雌、雄亲鱼，雌鱼采用二次注射法，雄鱼采用一次注射法。催产药物的具体用法用量及人工授精方法，参考文献[2]，人工授精后将受精卵放入人工气候箱的塑料水箱中孵化。

1.4 数据处理与分析

采用Microsoft Excel 2016及SPSS 16.0数据统计软件进行数据的统计分析。

2 试验结果

2.1 温度对乌苏里拟鲿受精孵化的影响

温度对乌苏里拟鲿受精孵化的影响见表1。由表1可知，对照组（26℃）受精率最高为95.6%，低温（24℃）、对照（26℃）、中温组（28℃）之间的受精率差异不具统计学意义，均超过92%；而高温组（32℃）的受精率显著低于低、中温及对照组，且差异具统计学意义（P＜0.05）。对照组的孵化率最高，其次是中温组，中温组与对照组之间的孵化率差异不具统计学意义（P＞0.05）；低、高温组的孵化率均低于对照组，低、高温组与对照组之间差异具统计学意义（P＜0.05）。在0—30日龄的时间段内，中温组仔鱼存活率最高，为76.2%；低、中温及对照组的存活率均超过70%，低、中温组与对照组之间差异不具统计学意义（P＞0.05）；高温组的存活率低于70%，高温组与中温、对照组之间差异具统计学意义（P＜0.05）。

表1 温度对乌苏里拟鲿受精率、孵化率及存活率（0—30日龄）的影响

2.2 温度对乌苏里拟鲿体长、体质量的影响

乌苏里拟鲿仔鱼孵化后，5—30日龄各试验组平均体长见图1，结果显示：低、中温组，5—30日龄乌苏里拟鲿体长增长与对照组无统计学意义差异（P＞0.05）。高温组，5—20日龄乌苏里拟鲿的体长增长较对照组小，10、15日龄的仔鱼体长与对照组差异具统计学意义（P＜0.05）；20—30日龄，乌苏里拟鲿体长恢复正常，与对照组差异不具统计学意义（P＞0.05）。

图1 温度对乌苏里拟鲿体长的影响（5—30日龄）

乌苏里拟鲿仔鱼孵化后，5—30日龄各试验组平均体质量见图2，结果显示：低、中温组，5—30日龄乌苏里拟鲿体质量增加与对照组无统计学意义差异（P＞0.05）。高温组，5—20日龄体质量较对照组小，但仅于10日龄时，表现出具统计学意义差异（P＜0.05）；20—30日龄，乌苏里拟鲿体质量恢复正常，与对照组差异不具统计学意义（P＞0.05）。

2.3 温度对乌苏里拟鲿仔鱼生长的影响

据各温度梯度生长率的统计结果（图3）可以发现：24～28℃范围内，乌苏里拟鲿仔鱼的生长率随温度升高而不断增大；到32℃时，生长率反而下降，较28℃组的生长率低，28℃组的生长率是各试验组中最高的。利用二次方程对乌苏里拟鲿仔鱼的生长率（AGR）进行拟合分析，得到拟合方程为：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988(R2=0.8218)。通过对曲线求导计算极值的方法求得，水温为28.125℃时，生长率AGR取得最大值，故推测0—30日龄的乌苏里拟鲿仔鱼生长的最适温度为28.13℃。

图3 温度与乌苏里拟鲿仔鱼生长率之间的关系

3 讨论分析

3.1 温度对乌苏里拟鲿受精、孵化、存活率的影响

根据表1，受精率、孵化率在26℃条件下达到最高，仔鱼出膜后0～30 d，在28℃的条件下其存活率最高，而温度过高对乌苏里拟鲿的受精率、孵化率、存活率均有较大的影响（P＜0.05）。这与陈子桂等[18]的研究结果一致，其研究表明，乌苏里拟鲿的受精率、孵化率在25.8℃的条件下为最高，；而存活率的最适温度为25.8℃，这与该试验结果不同，可能是因为两次试验的试验时间不同，且试验鱼苗并非同一批次苗种。在鱼类孵化的最适温度范围内，胚胎的受精率、孵化率最高，而当温度高/低于最适温度，均会导致胚胎的畸形、死亡，导致存活率降低[13,26]。根据蒋明霞等[26]的研究发现，鱼类孵化的最适温度与存活的最适温度可能出现不相同的情况，与该试验结果相一致。高温条件下，乌苏里拟鲿的受精、孵化、存活率均较低，可能是因为乌苏里拟鲿在较高的温度条件下，精子活力降低，胚胎及胚后发育部分酶活性降低，导致体内能量供应不足，从而导致鱼类受精率、孵化率、存活率降低。

3.2 温度对乌苏里拟鲿生长发育的影响

该试验所采用的材料是从受精卵到30日龄的乌苏里拟鲿仔鱼，刚出膜的仔鱼的体质量与30日龄的仔鱼的体质量相比，其完全可以忽略不计。因此直接以控温试验结束后的体质量与时间的比值作为生长率（AGR）的指标。

在最适温度范围内，随温度升高，不仅完成各发育阶段所需时间缩短，而且其开口时间也相应提前[27-28]。该试验中，中、高温组的仔鱼从受精卵到开口只需两天的时间，而低温组则要三天半的时间。在24～28℃范围内，随着温度的升高，乌苏里拟鲿仔鱼的生长率逐渐提高，而当温度超过28℃时，乌苏里拟鲿仔鱼的生长率出现下降的趋势。对黄颡鱼[29]、罗非鱼[30]、大鳞鲃[31]、军曹鱼[32]、大菱鲆[33]等的研究同样表现出，随着温度升高，生长率呈先升高后降低的变化趋势。究其原因，可能是因为在最适温度下，幼鱼的体内环境与体外环境相适应，调节机体适应环境、维持生命活动的能量较少，用于生长的能量较多，因此幼鱼的生长速率加快，转化效率提升[34]；而当温度高于鱼类的最适温度时，一方面高温增加了鱼体内的能量消耗，另一方面高温使鱼体内的消化酶活性改变，进而影响了鱼类的摄食强度、消化吸收效率等生理机能和代谢水平，从而影响鱼类的生长[35-37]。

4 结论

乌苏里拟鲿的胚胎发育最适温度为26℃，当水温超过26℃时，会导致乌苏里拟鲿的受精率、孵化率降低；乌苏里拟鲿仔鱼（0～30 d）的存活率、生长率，在28℃的条件下最高。利用二次方程对乌苏里拟鲿仔鱼（0～30 d）的生长率（AGR）与温度的关系进行拟合分析，得到拟合方程为：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988。通过求导推算极值的方法，得出乌苏里拟鲿的最适生长发育温度为28.13℃。