藏药柳茶水提物降脂效果研究

杨 帆 赫 雪 杨 远 姜南茜 王瑾书 郭鹏辉

西北民族大学生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730124

肥胖是由一种脂肪组织过度堆积和脂质代谢失调所引起的疾病，能够引发多种代谢疾病，如2型糖尿病、高脂血症、高血压、心血管疾病等[1]。研究数据表明，39% 的子宫内膜癌、37%的食道癌、25%的肾癌、11%的结肠癌、9%的乳腺癌均与肥胖有关[2]。预计到2030年超重和肥胖人群将达全世界总人口的 58%[3]，肥胖将成为全球流行性疾病。

传统的减肥方法分为两类，一类是通过节食、食欲抑制剂、缓泻剂、手术等方式减少能量的摄入，或者通过运动利用食物的特殊动力学作用增加能量的消耗，最终形成能量的负平衡从而达到消耗脂肪的目的[4]。而另一类，是通过服用化学类降脂药物达到降脂目的。国内常用的降脂药物主要成分集中在他汀类、胆汁酸鳌合剂及甲亚油酰胺类等，这些西药类虽具有不同程度的降脂效果，但都存在一定的毒副作用，如损害肝功能、肌痛等[5]。因此，研发一种能够达到健康减肥效果的天然降脂药物是非常重要的。有效的健康减肥方法不仅有利于提高国民体质，还有利于管控慢性病，进而能够减轻相关医疗机构的财政压力[6]。

藏药柳茶(Sibiraeaangustata)又称为窄叶鲜卑花,隶属于蔷薇科鲜卑花属 (Sibiraea)，其作为茶饮在藏族民间广为流行，又因其形状与柳叶相似，故俗称“柳茶”，主要分布在我国的青海、西藏、云南及甘肃等地[7]。柳茶幼时紫红色，老时黑褐色，冬芽卵形，外披紫褐色鳞片。当年生的柳茶枝条为叶多互生，老枝上则为丛生，叶片呈或为线状披针形、长圆倒披针形或宽披针形，上下两面均为无毛，但有明显中脉及侧脉，叶柄不显，无托叶，属于杂性异株，花期1月，果期1月[8]。藏药柳茶作为我国藏族传统的珍贵药材，当地藏民一般以其叶和嫩枝入药做茶饮，能够治疗食后腹胀或消化不良等症状[9]。据牧民观察，食用柳茶的牛羊等牲畜体重明显减轻，而且精神饱满、皮毛光洁，因此可推断柳茶可能具有降脂效果。

本研究以藏药柳茶为供试材料，以SD小鼠为试验对象，通过比较灌胃同剂量不同浓度的柳茶水提物对单纯性肥胖小鼠体重、体脂、肾周边脂肪质量、皮下脂肪质量和脂肪细胞形态的影响，探究柳茶的降脂效果，旨在为藏药柳茶的进一步开发利用奠定理论基础。

1 仪器与材料

1.1 实验动物 SD小鼠25只，体质量20～25 g，购自上海斯莱克实验动物有限责任公司，合格证号:0049435。

1.2 实验材料 藏药柳茶于 2018年6月采自甘肃省甘南藏族自治州，由西北民族大学生命科学与工程学院郭鹏辉副教授鉴定为蔷薇科鲜卑花属 (Sibiraea)植物柳茶的叶片。

1.3 仪器 KQ-500B超声波提取仪(昆山市超声仪器有限公司)、KD1508A切片机、KD-P摊片机、KD-H烘片机(金华科迪仪器设备有限公司)、BX43生物显微镜、BGG-9070A恒温干燥箱、BSC- 1000A2生物安全柜(江西立康科技有限公司)。

2 方法

2.1 小鼠单纯性肥胖模型的建立 小鼠25只，取5只按照随机数字表法以基础饲料饲养1周，其余喂饲高脂饲料(基础饲料75%、蔗糖10%、羊油15%)。每笼5只,自由摄食和饮水，明暗周期为12h，室温20～25℃，相对湿度40%～50%，保持良好通风条件。每日称量体重，并记录数据。4周后高脂饲料组小鼠体重高于基础饲料组小鼠体重的20%，则证明建模成功。

2.2 藏药柳茶水提物的制备 取干燥藏药柳茶，经组织粉碎机粉碎，准确称取粉末20g，放入样品瓶，按照料液比 1∶10 加入蒸馏水，摇匀，置于超声提取仪中，40 ℃，300 W 超声40 min，处理 2 次，加压抽滤分离水溶液，合并提取液，减压浓缩至20 mL，将上清液置于4 ℃冰箱中冷藏备用。

2.3 实验动物分组与给药方法 实验设5组，上述基础饲料组为对照组；采用随机数字表将建模成功的小鼠分为4组，即模型组、高、中、低剂量组，每组5只。高、中、低剂量组采用灌胃给药法，分别按相当于生药量 15、10、5 g/kg 剂量给药，对照组和模型组灌服0.9%氯化钠溶液，每天1次，灌胃量为0.2 mL/10g·bw。给药6周后禁食(不禁水)12 h。打开腹腔取肾及脂肪组织，均用10% 福尔马林溶液固定，-80℃保存。

2.4 脂肪细胞形态检测 取10%福尔马林溶液固定的脂肪组织进行常规石蜡包埋，切片，10×40倍全视野下观察脂肪细胞形态和数量。

2.5 体重及体脂含量 测量体重、体长，计算 Lee’s指数；解剖小鼠取其皮下脂肪及肾周全部脂肪称重。

3 结果

3.1 藏药柳茶水提物对试验小鼠体重的影响 建模4周后，高脂饲料组小鼠体重高于基础饲料组小鼠体重的60%，表明建模成功。对各组小鼠体重进行比较，高、中、低剂量组的小鼠造模期间体重有显著的增加，经过灌胃治疗后，高、中、低剂量组的小鼠体重有显著减少(P<0.05)，其中中剂量组最为明显。见表1。试验期间小鼠体重的变化如图1所示。

组别造模前/g造模2周/g造模4周/g灌胃2周/g灌胃4周/g灌胃6周/g对照组24.53±0.6823.33±0.88△24.43±1.05△25.33±1.03△26.72±1.23△26.03±1.43△模型组22.01±1.1034.44±0.78∗39.58±1.44∗41.53±1.30∗42.69±1.05∗45.23±1.14∗高剂量组23.43±0.5534.41±0.75∗41.37±0.97∗40.54±1.16∗38.10±1.15∗37.44±0.97∗中剂量组21.64±1.0637.23±1.07∗40.66±1.13∗39.23±1.12∗35.24±1.14∗△30.44±1.17∗△低剂量组22.36±0.8337.31±0.94∗41.24±1.07∗39.71±1.05∗36.24±1.10∗33.43±1.14∗△

注：与对照组比较，*P<0.05；与模型组比较,△P<0.05。

3.1 藏药柳茶水提物对试验小鼠体脂、脂肪量的影响 灌胃治疗6周后，高、中、低剂量组的单纯性肥胖小鼠体脂、肾周边脂肪质量和皮下脂肪质量有明显减少(P<0.05)，其中柳茶中剂量组的降脂作用最为明显。见表2。

表2 藏药柳茶对试验小鼠体脂和脂肪量的影响

注：与对照组比较，*P<0.05；与模型组比较,△P<0.05。

3.3 藏药柳茶水提物对单纯性肥胖小鼠脂肪细胞形态的影响 灌胃6周后，高、中、低剂量组小鼠脂肪细胞的截面细胞数显著高于模型组(P<0.05)，高、中剂量组小鼠脂肪细胞的截面细胞数和半径都显著高于对照组(P<0.05)。见表3和图2。

组别截面细胞数/个细胞半径/μm对照组21±1.022.20±0.06模型组15±2.152.05±0.13低剂量组32±3.01△1.87±0.11中剂量组56±2.29∗△1.58±0.02∗△高剂量组38±2.01∗△1.72±0.07∗△

注：与对照组比较，*P<0.05；与模型组比较,△P<0.05。

4 讨论

肥胖作为一种现今常见的营养障碍性病，对人体存在诸多危害。不仅会降低患者的生活质量，还会引发糖尿病、高血脂及心血管病等多种严重危害人体健康的疾病，进而在一定程度上缩短患者的寿命[10-11]。目前柳茶的降脂研究多集中在细胞层面[12]，本实验从药效学角度研究表明，藏药柳茶具有降脂功效。从宏观角度进行研究，实验结果清晰直观。柳茶的降脂功效的发现能够帮助天然减肥药的研发，帮助患者从传统的减肥方法过渡到健康减肥。

在实验过程中，通过参考相关文献[13]与进行预实验逐渐摸索出高脂饲料最为适宜的配方。饲养4周后，喂养高脂饲料的小鼠体重高于喂养普通饲料的小鼠，的60%，说明高脂饲料配方合理且成功建立小鼠单纯性肥胖模型。本实验采用高脂饮食诱导小鼠肥胖，与人群肥胖机制极为类似。本实验采用单纯性肥胖小鼠模型，以喂养基础饲料的小鼠为水平对照，探讨藏药柳茶水提物对单纯性肥胖小鼠体重、体脂和脂肪量的影响。结果表明，高、中、低剂量组与模型组比较，均可明显降低单纯性肥胖小鼠体重、体脂和脂肪量，其中中剂量组治疗效果最好。

本实验初步探究了柳茶水提物对单纯性肥胖小鼠各种指标的影响，证明了柳茶的降脂作用，为西部民族地区特色植物藏药柳茶的开发利用提供实验依据。