遗传高风险乳腺癌患者BRCA1/2 编码区SNP 突变频率及其与肿瘤临床病理特征相关研究

胡泓 周文斌

乳腺癌是临床发病率较高的一种恶性肿瘤，且近年来其发病率不断升高。在女性恶性肿瘤中其发病率居第一位，死亡率居第5位。而随着细胞生物学和分子生物技术的不断发展，乳腺癌发病机制也取得了长足进展。既往研究证实，乳腺癌与遗传易感基因的突变密切相关，乳腺癌致病基因突变及基因多态性高危位点如何进行鉴定，是遗传倾向性乳腺癌的研究重点[1]。乳腺癌易感基因1/2（breast cancer susceptibility gene 1/2，BRCA1/2）是公认的恶性肿瘤易感基因，参与染色体重组、转录、调控、细胞周期调节及DNA损伤修复等[2]。本研究中，选取85例遗传高风险乳腺癌患者和85例健康人员进行，检测其BRCA1/2编码区SNP突变频率，探讨遗传高风险乳腺癌患者BRCA1/2编码区SNP突变频率及其与肿瘤临床病理特征相关性。现具体报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年月—2018年3月我院收治的85例遗传高风险乳腺癌患者作为乳腺癌组，另外选取同期健康人员85例为健康对照组，所有入组人员均自愿签署研究知情同意书，经病理学诊断确诊为遗传高风险乳腺癌[3]；发病年龄≤50岁，至少有1个一级或二级亲属为发病年龄≤50岁的乳腺癌患者。排除同时合并其他类型肿瘤或乳腺癌为继发性肿瘤者。乳腺癌组患者年龄35～75岁，平均年龄（56.91±7.12）岁；BMI18.3～25.1 kg/m2，平均BMI（22.48±0.94）kg/m2。健康对照组受检人员年龄35～75岁，平均年龄（57.10±7.63）岁；BMI18.2～24.8 kg/m2，平均BMI（22.57±1.01）kg/m2。两组人员的基线资料比较差异无统计学意义（P ＞0.05），研究经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

取受检者外周静脉血5 mL，置于抗凝管中备用。提取基因组DNA，对BRCA1和BRCA2基因所有编码区及内含子和外显子拼接区进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）。PCR产物经变性高效液相色谱分析筛查，若出现异常峰型的PCR样品则进行DNA直接测序。

核酸序列位置编码在美国国家生物技术信息中心网站和乳腺癌信息中心网站数据库上进行查询比对[4]，对无报道的致病意义不明的编码区突变位点分类为未知功能突变，将非编码区或不引起氨基酸改变的突变位点分类为基因多态性位点。

1.3 观测指标

记录入组遗传高风险乳腺癌患者BRCA1/2编码区SNP突变频率，突变率＞5%作为高频突变位点评判标准；比较遗传高风险乳腺癌患者与健康人员BRCA1/2编码区SNP突变频率；单因素分析rs80356892位点多态性和与肿瘤临床病理特征相关性。

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 遗传高风险乳腺癌患者BRCA1/2编码区SNP突变频率

研究中共发现34个BRCA1/2编码区SNP基因位点，其中14个SNP位点位于BRCA1基因，20个SNP位点位于BRCA2基因。所有SNP基因位点中，根据突变率＞5%，共有19个SNP基因位点属于高频突变位点。乳腺癌患者共有22个SNP基因位点的突变频率高于正常人群，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 rs80356892位点多态性和与肿瘤临床病理特征相关性

rs80356892基因位点突变与遗传高风险乳腺癌患者是否有家族遗传性、肿瘤位置、淋巴结转移、ER阴性以及PR阴性有密切联系（P＜0.05）。见表2。

3 讨论

既往研究证实，遗传性乳腺癌主要与多种基因的高外显性突变有关[5]。基因突变一般是由于碱基的插入或缺失引起，可导致基因功能的改变，导致蛋白翻译的中断或改变[6]。大数据显示，所有基因突变中，致病性突变占60%～70%[7-8]。BRCA1/2基因作为公认的，与乳腺癌关系密切的抑癌基因[9-10]。本研究中，共发现34个BRCA1/2编码区SNP基因位点，其中14个SNP位点位于BRCA1基因，20个SNP位点位于BRCA2基因。所有SNP基因位点中，根据突变率＞5%，共有14个基因位点属于高频突变位点。乳腺癌患者共有22个SNP位点的突变频率高于正常人群（P＜0.05）。此外，针对过往研究[11-12]中证实与乳腺癌发生有密切联系的rs80356892基因位点，本研究中发现其突变与遗传高风险乳腺癌患者是否有家族遗传性、肿瘤位置、淋巴结转移、ER阴性以及PR阴性有密切联系（P＜0.05）。由此可见，部分BRCA1/2编码区SNP基因位点可能参与乳腺癌的发生与发展。

表1 遗传高风险乳腺癌患者BRCA1/2 编码区SNP 突变频率

表2 rs80356892 位点多态性和与肿瘤临床病理特征相关性

综上所述，BRCA1/2基因的有害突变可能是遗传性乳腺癌发生的原因之一，部分BRCA1/2基因编码区突变与遗传高风险乳腺癌临床病理特征有密切联系。