新生儿败血症病原菌与降钙素原水平相关性应用研究

王松炎　欧佳美　王德生

【摘要】 目的：探讨降钙素原（PCT）检测对诊断新生儿败血症的指导意义。方法：选取2016年12月-2018年7月笔者所在医院收治的经血培养确诊为败血症的新生儿100例作为阳性组研究对象，另外从笔者所在医院同期以发热为主诉就诊并最终排除败血症的新生儿中随机选取100例作为阴性组研究对象，分别对两组患儿进行血培养、血常规、血清CRP和血清PCT检测。结果：（1）导致新生儿败血症的致病菌中，革兰阴性菌共27例，占比27%，其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主要致病菌种;革兰阳性菌共73例，占比73%，其中表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主要致病菌种。（2）PCT检测诊断灵敏度、特异度及准确度分别为92.0%、81.0%和86.5%，其诊断准确度显著高于其他两组检测手段，差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）阴性组新生儿血清PCT为（0.37±0.11）ng/ml，阳性组新生儿血清PCT为（10.31±4.32）ng/ml，差异有统计学意义（t=46.241，P<0.001）;阳性组患儿中，革兰阳性菌感染组儿血清PCT水平为（1.53±0.47）ng/ml，显著低于革兰阴性菌感染组的（11.99±4.85）ng/ml，差异有统计学意义（t=18.452，P<0.001）;革兰阳性菌组内各菌种诱发的败血症新生儿血清PCT水平总体差异有统计学意义（H=12.721，P=0.004）;革兰阴性菌组内各种菌种诱发的败血症新生儿血清PCT水平差异无统计学意义（H=3.472，P=0.194）;选择截点值PCT=2.43 ng/ml时，对于鉴别G+、G-菌感染具有最为良好的诊断效能（灵敏度=77.6%、特异度=89.5%）。结论：血清PCT测定可以作为一种对新生儿败血症快速准确的检测手段，具有良好的诊断效能;此外，血清 PCT 测定还有助于鉴别G-菌与G+菌所致的败血症，也可以用于鉴别致病力较强的金黄色葡萄球菌、链球菌与表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌所致的血流感染，可以为抗菌药物的选择提高参考依据。

【关键词】 新生儿败血症; 血清降钙素原; 革兰阳性菌; 革兰阴性菌; 诊断价值

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.19.024 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2019）19-00-03

败血症指致病细菌进入血液循环中，并生长、繁衍、释放堵塞而产生的全身性炎症反应综合征[1]。新生儿免疫系统尚未成熟、抵抗力较差，是败血症的高发人群。新生儿败血症起病隐匿，早期缺乏特异性表现，加之患儿缺乏表达能力，很难做到早期发现，若不能早发现、早诊断、早治疗，病情极易继续进展甚至危及生命，各种原因所致的败血症是新生儿期常见的死亡原因之一[2]。目前血培养仍是诊断新生儿败血症的金标准，但其阳性率较低，病原菌分离及药物敏感试验耗时较长，不利于新生儿败血症的早期诊治，目前亟待找到一种兼具高效性和准确性的诊断方法。降钙素原（PCT）是无激素活性的降钙素前体物质，当机体发生严重感染时，肝脏中的库否细胞、肺脏和肠道组织中的免疫细胞均可在炎症刺激下大量产生PCT，使血液中PCT水平显著升高。与传统检查方法（如血培养、血常规、CRP等）相比，PCT检测具有便捷高效、敏感性和特异性强的优势，近年来在感染性疾病的鉴别诊断中应用日益广泛，较多学者认为PCT可以作为细菌感染性疾病的早期诊断的敏感指标[3]，近来一些学者发现，不同种类细菌感染致败血症时，患者血液PCT水平也表现出一定差异[4]，此次笔者为探讨降钙素原（PCT）检测对诊断新生儿败血症的指导性意义，以笔者所在医院200例患儿为研究对象开展研究，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

经医院医学伦理委员会批准，选取2016年12月-2019年2月笔者所在医院收治的经血培养确诊为败血症的新生儿100例作为阳性组研究对象。纳入标准：（1）年龄<28 d;（2）符合《新生儿败血症诊疗方案》2003版中关于新生儿败血症的诊断标准[5]。排除标准：（1）抗菌药物服用史;（2）考虑合并血液系统疾病者。另外从医院同期以发热为主诉就诊并最终排除败血症的新生兒中随机选取100例作为阴性组研究对象，除诊断外纳入和排除标准同阳性组。阴性组患儿男57例，女43例，平均出生天数（14.9±3.2）d，平均出生体重（3.2±0.6）kg;阳性组患儿男52例，女48例，平均出生天数（16.0±5.1）d，平均出生体重（3.4±0.5）kg。两组患儿一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

两组患儿均在首次就诊24 h内（且在使用抗生素前）静脉采血10 ml注入血培养瓶，同时分别用抗凝血管2支取血3 ml，进行血清PCT+CRP和血常规检查。血培养及细菌药敏检测：抽取患儿静脉血后，利用安图BC120全自动血培养系统进行细菌培养;利用Vitek-2Compact全自动细菌鉴定药敏分析仪进行菌株鉴定及药敏试验，参照CLSI标准判定结果。PCT检测：应用荧光免疫发光法在VIDAS-PC全自动荧光免疫分析仪中测定血清PCT浓度。CRP检测：应用免疫比浊法运用东芝TBA-2000全自动生化分析仪和配套试剂测定血清CRP浓度。血常规：应用迈瑞BC-6800全自动血液分析仪进行血象测定。

1.3 观察指标

（1）正常值参考范围：CRP 0～8 mg/L;WBC 5.0～10.0×109/L;PCT 0～0.5 ng/ml;血培养：阴性。阳性标准：CRP>8 mg/L;WBC<5.0×109/L或>20.0×109/L;PCT>0.5 ng/ml;血培养：阳性。（2）诊断标准：参考《新生儿败血症诊疗方案》2003版中关于新生儿败血症的诊断标准：具有典型临床表现且符合以下任意一条：（1）血培养或无菌体腔内体液培养出致病菌;（2）两次以上血培养或无菌体腔内体液培养出机会致病菌。以上述诊断标准分别计算PCT、CRP、血常规检测的诊断敏感度、特异度和准确度。

1.4 统计学处理

采用SPSS 19.0软件进行统计学分析。计量资料以（x±s）表示，正态分布采用t检验，非正态分布采用Kruskal-Wallis检验，两组间比较采用成组设计的秩和检验，按照双侧检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 败血症新生儿感染细菌分布情况

导致新生儿败血症的致病菌中，革兰阴性菌共27例，占比27%，其中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主要致病菌种;革兰阳性菌共73例，占比73%，其中表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主要致病菌种，见表1。

2.2 PCT、CRP、血常规检测对败血症诊断率比较

PCT检测诊断灵敏度、特异度及准确度分别为92.0%、81.0%和86.5%，其诊断准确度显著高于其他两组检测手段，差异均有统计学意义（P<0.05），见表2、表3。

2.3 不同患儿血清PCT水平比较

阴性组新生儿血清PCT为（0.37±0.11）ng/ml，阳性组新生儿血清PCT为（10.31±4.32）ng/ml，差异有统计学意义（t=46.241，P<0.001）;阳性组患儿中，革兰阳性菌感染组儿血清PCT水平为（1.53±0.47）ng/ml，显著低于革兰阴性菌感染组的（11.99±4.85）ng/ml，

差异有统计学意义（t=18.452，P<0.001）;革兰阳性菌组内各菌种诱发的败血症新生儿血清PCT水平总体差异有统计学意义（H=12.721，P=0.004）;革兰阴性菌组内各种菌种诱发的败血症新生儿血清PCT水平差异无统计学意义（H=3.472，P=0.194），见表4。

2.4 PCT对G+、G-菌感染鉴别效能的ROC分析

根据G+、G-菌感染所致败血症患儿血清PCT指标水平的差异，绘制ROC曲线计算AUC值，最佳诊断界值参照约登指数最大值，当选择截点值PCT=2.43 ng/ml时，可以获得最大的曲线下面积（AUC=0.835），此时诊断灵敏度、特异度77.6%和89.5%，具有一定的临床价值。

3 讨论

新生儿败血症是常见于新生儿中的一类严重的感染性疾病，发由于新生儿免疫系统尚未成熟、抵抗力较差，是败血症的高发人群。新生儿败血症起病隐匿，早期缺乏特异性表现，加之患儿缺乏表达能力，很难做到早发现、早治疗，故而病死率较高[2]。当新生儿出现感染症状和体征、血象异常、CRP升高或有危险因素（如母亲产褥期感染、合并围产期并发症时），可考虑诊断本病。在血液或无菌体腔体液中检出病原菌或病原体时，即可确诊此病。根据相关报道，新生儿败血症的病原菌与成人有所不同，以革兰阳性菌尤其葡萄球菌属为主[6]。此次研究中100例败血症患儿中73例确诊为革兰阳性菌感染，其中58例属于葡萄球菌属（表皮葡萄球菌36例、金葡菌15例、溶血性葡萄球菌7例）感染;而革兰阳性菌感染患儿27例，以大肠埃希菌（11例）和肺炎克雷伯菌（8例）为主，与其他报道基本一致[6-7]。

目前血培养仍是诊断新生儿败血症的金标准，但其阳性率较低，病原菌分离及药物敏感试验耗时较长，不利于新生儿败血症的早期诊治。而血常规、血清CRP检测则或多或少存在敏感度和特异度不足的问题，PCT是无激素活性的降钙素前体物质，生理状态下，PCT仅由甲状腺滤泡旁细胞少量分泌，血清含量极低;当机体发生严重感染时，肝脏中的库否细胞、肺脏和肠道组织中的免疫细胞均可在炎症刺激下大量产生PCT，使血液中PCT水平显著升高[4]。与传统检查方法（如血培养、血常规、CRP等）相比，PCT检测具有便捷高效、敏感性和特异性强的优势，近年来在感染性疾病的鉴别诊断中应用日益广泛，较多学者认为PCT可以作为细菌感染性疾病的早期诊断的敏感指标，具有重要的价值[8]。此次研究发现，败血症新生儿血清PCT水平显著升高，且选择血清PCT作为诊断指标具有良好的灵敏度和特异度，其诊断准确度显著高于血常规检测和血清CRP检测，表明血清PCT检测较传统的检测手段对新生儿败血症具有更为良好的診断效能。

此外，此次研究探讨了G+、G-细菌及不同种类细菌感染所致败血症患儿血清PCT水平。观察G+、G-细菌感染的败血症患儿可以发现，G+菌感染致败血症时，血清PCT仅轻度升高，而G-菌感染致败血症时，血清PCT水平则显著升高，与Koivula等[9]报道一致，其发现G-菌感染致败血症时，患者血清PCT水平显著升高。一般考虑这种差异由细菌分泌毒素不同有关，G-菌降解释放的内毒素可作用于中性粒细胞、巨噬细胞并促使一系列炎性细胞因子（如TNF-α、IL-1、IL-6等）大量产生[10-11]，

在上述细胞因子的刺激下，靶细胞大量产生PCT，使血清PCT显著升高，而这也为临床鉴别G+和G-菌感染及选择合适的抗菌药物提供了参考依据。本次研究发现，选择截点值PCT=

2.43 ng/ml时，对于鉴别G+、G-菌感染具有最为良好的诊断效能（灵敏度=77.6%、特异度=89.5%），与文献[12]报道相符。有报道称，当患者血清PCT>10 ng/ml，基本可以确诊为G-菌感染。进一步比较G+、G-菌属内不同种类细菌感染时血清PCT的水平，结果显示革兰阳性菌组内各菌种诱发的败血症新生儿血清PCT水平总体差异显著[12]，金黄色葡萄球菌和链球菌感染时血清PCT水平要高于表皮葡萄球菌和溶血葡萄球菌，原因可能与细菌的代谢产物、致病性不同有关，因为链球菌，但受限于例数，本次研究未能进一步探讨鉴别各葡萄球菌属和链球菌的最佳PCT截点值，有待今后进一步探讨。

总之，血清PCT测定可以作为一种对新生儿败血症快速准确的检测手段，具有良好的诊断效能;此外，血清PCT测定还有助于鉴别G-菌与G+菌所致的败血症，也可以用于鉴别致病力较强的金黄色葡萄球菌、链球菌与表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌所致的血流感染，可以为抗菌药物的选择提高参考依据，值得临床推广。

参考文献

[1]贾忠兰，毕福玲，张彩明.新生儿败血症病原菌分布及耐药性分析[J].中华医院感染学杂志，2017，27（1）：197-200.

[2]新生儿败血症早期实验室诊断指标的价值评价[J].中国当代儿科杂志，2015，17（5）：425-429.

[3]朱丽坤，温洁新.Hs-CRP与PCT在新生儿败血症早期诊断及病情评估中的应用[J].实用医学杂志，2016，32（6）：1002-1003.

[4]刘英其.血清降钙素原在不同种类细菌脓毒症的早期鉴别诊断价值[J].中华医院感染学杂志，2013，23（3）：500-502.

[5]中华医学会儿科学分会新生儿学组.新生儿败血症诊疗方案[J].中华儿科杂志，2003，41（12）：897-899.

[6]李燕，潘新年，韦秋芬，等.新生兒败血症病原学特征分析[J].中国新生儿科杂志，2015，30（1）：9-11.

[7]王群仙，徐林燕，陈友好.血清降钙素水平与血培养结果在新生儿败血症中的比较[J].中国卫生检验杂志，2014（5）：708-710.

[8] Yan L，Liao P，Xu L L，et al.Usefulness of procalcitonin in elderly patients with bacterial infection[J].Clinical Laboratory，2014，60（1）：139-42.

[9] Koivula I，H?m?l?inen S，Jantunen E，et al.Elevated procalcitonin predicts Gram-negative sepsis in haematological patients with febrile neutropenia[J].Scandinavian Journal of Infectious Diseases，2011，43（6-7）：471.

[10]黄爱霞.降钙素原在预测感染患者发生败血症中的应用研究[J].中国现代医生，2014（25）：67-69.

[11]沈怀云，陈信，诸宏伟，等.新生儿凝固酶阴性葡萄球菌败血症血降钙素原、C反应蛋白、白细胞及血小板计数变化及其意义[J].中国微生态学杂志，2016，28（7）：828-830.

[12]唐跃华，李伟强，杨小兰，等.血降钙素原和C反应蛋白及中性粒细胞百分比区分革兰阳性与阴性细菌血流感染的价值[J].广东医学，2013，34（15）：2350-2352.

（收稿日期：2019-02-19） （本文编辑：马竹君）