Quechers前处理法-超高效液相色谱-串联质谱法测定荔枝中14种农药残留

韦龄乾 潘喜芳 蒋扬柏 李丽燕

摘 要：本文旨在探究超高效液相色谱-串联质谱法结合Quechers方法检测荔枝中苯醚甲环唑、啶虫脒、氟硅唑、噻虫嗪等14种农药残留的效果。样品经Quechers法净化，以0.5mmol/L醋酸铵+0.01%甲酸水溶液-乙腈作为流动相梯度洗脱，shim-park XR-ODSⅢ，50mml×2.0mm，三重四极杆质谱选用多反应监测（MRM）扫描测定。检测后显示14种农药在线性范围内相关系数均大于0.9994，方法检出限为0.02～0.04mg/kg。在低、中、高3个不同浓度水平添加的平均加标回收率为73.6%～110.4%，相对标准偏差为1.0%～4.7%。因此Quechers法适用于荔枝中农药多残留检测，且具有分析简单、速度快、灵敏度高的特点。

关键词：Quechers;农药残留;超高效液相色谱-串联质谱法;荔枝

钦州是中国的“中国荔枝之乡”。其中钦州市灵山县的荔枝是中国国家地理标志，每年6-8月份都产出大量各类品种的荔枝销售至全国各地，为了保证荔枝的农药残留不超标，保障消费者食品安全，需要对荔枝进行大量的农药残留检测，为了提高檢测效率和准确度，建立起一个科学、有效、快速的检测方法意义重大。Quechers前处理方法，与固相萃取柱净化法相比，具有提取速度快、溶剂用量少、样品制备简便等优点，在农药残留分析中得到越来越广泛的应用。刘文静、李雪、张嘉楠、张煜卓等人曾用过Quechers前处理方法检测农药残留。以此，本文研究利用Quechers方法净化，建立超高效液相色谱-串联质谱法分析荔枝中14种农药残留。

一、材料与方法

1.仪器

超高效液相色谱仪串联三重四极杆质谱（型号：LCMS-8040，SHIMADZU公司），XH-C旋涡混合器（金坛市医疗仪器厂），超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），Millipore 明澈D24UV（默克化工有限公司），台式高速离心机（Sigma3K15曦马离心机有限公司），台式微量离心机（赛默飞公司），搅拌机，高速分散机（IKA公司）。

2.试剂

苯醚甲环唑、啶虫脒、氟硅唑、噻虫嗪、噻嗪酮等14种农药标准溶液来源于农业部环境保护科研监测所（天津），乙腈（HPLC，Tedia Company，），甲醇（HPLC，Tedia Company），乙酸铵（LC-MS级，CNW Technologies），氯化钠、无水甲酸（LC-MS级，天津市光复科技有限公司），超纯水（Millipore超纯水机制备），微孔滤膜（0.22μm，Agela Technologies）。QuEChERS净化管[50mgPSA+150mgMgSO4，岛津技迩（上海）贸易有限公司]。

3.色谱-质谱条件

色谱条件：SHIMADZUC18柱子，色谱柱（Φ1.9μm，2.1mm×100mm）;柱温：40℃，流速0.2mL/min;进样量1μL;流动相A：0.5mmol/L醋酸铵+0.01%甲酸水溶液流动相B为乙腈;洗脱方式：梯度洗脱，有机相初始浓度为10%，4min有机相浓度50%，15min设置75%，17-20min设置95%。

质谱条件：电喷雾离子化离子模式：ESI;扫描模式：多反应监测（MRM）扫描方式;离子源接口电压：ESI+，+4.5kV;ESI-，-3.5kV;雾化气：氮气：3L/min;干燥气：氮气15L/min;碰撞气：氩气;DL管温度：250℃;加热模块温度：450℃;对14种农药单标溶液进行质谱参数优化，确定特征母离子和子离子，优化后的相关质谱参数见表1。

4.标准溶液的配置

用上述14种农药以乙腈作为溶剂配制0.02mg/L、0.04mg/L、0.08μg/mL、0.12mg/L不同浓度的混合标准溶液作为试验处理。

5.样品前处理

准确称取25.00g（精确至0.01g）匀浆后的荔枝样品于100mL离心管中，加入50mL乙腈，5-7gNaCl，用高速分散机以12000r/min均质提取2min，以8000r/min高速离心5min;吸取上清液1.5mL置于QuEChERS净化离心管[50mgPSA+150mgMgSO4]中涡旋1min，100000r/min离心5min;取上清液过0.22μm滤膜，滤液待测。

二、结果

1.14种农药的线性范围、相关系数、检出限、定量限、TIC色谱图

蔬菜、水果农药最大残留限量标准按照GB/T20769-2008的食品安全国家标准，食品中农药最大残留限量，描述方法进行相关测定，选择0.02mg/L、0.04mg/L、0.08mg/L、0.12mg/L的14种混合农药，每种浓度重复测定6次。结果显示，结果14种农药的相应含量范围中其线性相关系数均超过0.9994;农药定量限为0.02～0.08mg/kg，如表2所示，14种的农药TIC色谱图见图1。

2.样品检测结果

本研究实验样品从本地荔枝种植合作社选取，抽取相同品种样品2个，分别为A、B，A、B两个样品均设置空白对照以及3个加标回收，其中A样品前处理按照GB/T20769-2008的标准方法执行，B样品前处理按照Quechers法执行。最后样品均在相同条件下的LCMS上进行检测，结果显示两种前处理方法的检测结果基本一致，平均回收率为73.6%～110.4%，相对标准偏差为1.0%～4.7%，如表3。

三、讨论

采用Quechers前处理法，结合超高效液相色谱-串联质谱法测定，建立了荔枝中14种农药残留的检测方法。该方法前处理简单、方便快速，具有良好的灵敏度、准确度和精密度，为荔枝中农药残留的快速分析检测提供了方法参考依据。

参考文献：

[1]刘文静，黄彪，傅建炜，潘葳，等.Quechers前处理法-超高效液相色谱-串联质谱法测定荔枝和葡萄中18种三唑类农药残留[J].农产品质量与安全.2019.（2）：44-61.

[2]李雪，气相色谱-串联质谱结合QuEChERS方法检测蔬菜、水果中37种农药残留[J].食品安全导刊.2018.（6）：70-71.

[3]张嘉楠，曹秀梅，王爱卿，Quechers-超高效液相色谱-串联质谱法测定果蔬中57种农药残留量[J]，2018，27（4）：60-65.

[4]张煜卓，于湛，李硕，王妍，应用QuEChERS技术与气相色谱-串联质谱法同时检测南果梨中16种农药残留[J]，现代预防医学，2019，46（2）：327-331.