包被共轭亚油酸对山羊瘤胃氢化、肠道及乳脂肪酸的影响

胡 波，魏佩玲，张蓉银，高维明

（新疆畜牧科学院畜牧业质量标准研究所，新疆乌鲁木齐 830026）

共轭亚油酸是一个通用术语，用于描述亚油酸瘤胃生物氢化过程中产生的亚油酸的位置异构体和几何异构体（Lourenco等，2010）。日粮多不饱和脂肪酸广泛存在于瘤胃，导致亚油酸和亚麻酸的平均损失率分别为86%和87%（Glasser等，2008）。因此，通过钙盐、甲醛处理、酰胺键或脂质包被来保护日粮脂质不被瘤胃生物氢化，防止瘤胃微生物功能的任何变化，增加多不饱和脂肪酸的十二指肠流量。如使用钙盐处理的C18：2 trans-10、cis-12的瘤胃生物氢化值估计为80%，而使用脂质包被的瘤胃氢化值约为65%（Perfield等，2004）。 在 奶 牛 体 内，C18：2 trans-10，cis-12经静脉注入十二指肠的转化效率相对稳定，平均为22%（Maxin等，2010）。在奶山羊中，十二指肠灌注后C18：2 trans-10，cis-12的乳转化效率为18%，这可能受日粮添加脂质类型和浓缩料比例的影响（Schmidely和 Andrade，2011）。因此，本研究旨在评价日粮添加包被共轭亚油酸对奶山羊十二指肠脂肪酸和营养物质（干物质、有机物、中性洗涤纤维和淀粉）在小肠流动的影响。

1 材料与方法

1.1 试验动物与日粮 试验选择12只体重（61.9±8.57）kg处于泌乳期的多胎次萨能奶山羊，适应期开始时山羊泌乳（65±3）d，平均产奶量为（3.91±0.48）kg/d，乳脂含量为（40.6±6.29）g/L，乳蛋白含量为（31.8±1.81）g/L，根据产奶量和产后30 d测得的乳脂含量，将同一品种的山羊分随机分为2组，每组6个重复，每个重复1只羊。两个试验组分别在基础日粮中补充50 g棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸，分别用瘤胃插管和T型十二指肠插管进行6周试验。将山羊置于代谢笼中，收集粪便和十二指肠样本。第4～6周山羊自由采食35%青贮玉米、20%甜菜、15%大麦和30%浓缩料的全混合日粮。基础日粮中粗蛋白质、有机物、中性洗涤纤维、淀粉含量分别为120、920、380和 175 g/kg，泌乳净能为 1500 Kcal/kg，基础日粮脂肪酸组成见表1。

表1 基础日粮脂肪酸组成

1.2 样品收集 在整个试验过程中，称量提供给山羊的饲料和剩余饲料，记录每天采食量。分别在第4和6周采集两份饲料样品，进行常规和脂肪酸分析。山羊每星期在中午称重一次，试验第6天分别抽取两份30 mL的奶样本，在4℃下保存，用于分析蛋白质、脂肪和乳糖含量。直到牛奶成分分析（蛋白质含量、脂肪含量和乳糖含量）。相同条件下，在不添加防腐剂的情况下收集另外两份牛奶样品，并将其保存在-18℃下，以供牛奶FA成分使用。采用指示剂三氧化铬法作为标记物，参考Brask等（2013）方法测定奶牛十二指肠的消化流量，在标记物分布前于第5周取粪便和十二指肠内容物作为标准样本分析三氧化铬含量，铬的分析标准是在铬分布前收集的十二指肠和粪便样品中加入已知铬。乳中脂肪酸含量的分析参考Ghazal等（2012）的研究方法。

将粪便排泄流量除以十二指肠铬浓度计算十二指肠每日干物质流量。通过将十二指肠干物质流量乘以十二指肠样品中有机物、中性洗涤纤维、淀粉、脂肪酸含量，计算十二指肠有机物、中性洗涤纤维、淀粉和脂肪酸流量。干物质、有机物、中性洗涤纤维和淀粉瘤胃表观消化率是从十二指肠流量中减去该成分的摄入量的百分比。

1.3 统计分析 试验数据采用SAS单因素方差分析，用SNK法进行多重比较，P＜0.05表示差异显著。

2 结果与分析

2.1 养分摄入量 由表2可知，与棕榈油酸钙组相比，共轭亚油酸组对干物质、有机物、淀粉和中性洗涤纤维摄入量无显著影响（P＞0.05），同时两组对干物质、有机物、中性洗涤纤维和淀粉的十二指肠流量和瘤胃表观消化率均无显著影响（P＞0.05）。包被共轭亚油酸组较棕榈油酸钙组有降低干物质和有机物消化率的趋势（P=0.08）。

表2 棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸对山羊养分摄入量的影响

2.2 脂肪酸摄入量 由表3可知，包被共轭亚油酸较棕榈酸钙显著降低了脂肪酸总量，C16：0、C18：1 cis -9、C18：2 cis-9，12摄 入 量（P＜0.05），提高了C18：0的摄入量（P＜0.05）。

表3 棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸对山羊脂肪酸摄入量的影响

2.3 十二指肠脂肪酸流量 由表4可知，包被共轭亚油酸和棕榈油酸钙对十二指肠脂肪酸流量无显著影响（P＞0.05），但降低了C16：0和C18：1 cis-9的流量（P＜0.05）。包被共轭亚油酸显著提高了 C18：2 trans-10，cis12、C18：2 cis-9，trans-11和 C18：2 trans-9，11在十二指肠的流量（P ＜ 0.05），降低了 C18：1 trans-4，5流量（P＜ 0.05），有降低 C18：2 cis-9，trans-12和C18：2 trans-9，cis-12在十二指肠流量的趋势（P=0.06）

2.4 多不饱和脂肪酸摄入量 由表5可知，日粮添加包被共轭亚油酸对C18：1 cis-9，C18：2 cis-9，12和 C18：3 cis 9，12，15在 瘤 胃 氢 化作用无显著影响（P＞0.05）。棕榈油酸钙组山羊十二指肠几乎检测不到C18：2 trans-10，cis-12，而包被共轭亚油酸组山羊十二指肠C18：2 trans-10，cis-12血流为0.75 g/d，占到分布的16%。同样，棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸山羊C18：2 cis-9，trans-11十二指肠血流分别为0.22和 0.90，平均占 C18：2 cis-9，trans-11分布的15%。

3 讨论

本研究中，与棕榈油酸钙组相比，包被共轭亚油酸组山羊脂肪酸总摄入量较低，这是因为两组日粮添加的脂肪含量不同。但两种处理的十二指肠脂肪酸摄入量均为正，棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸组山羊十二指肠流量分别占脂肪酸总摄入量的126%和132%。Serment（2012）以三氧化铬为标记物，也报道了十二指肠流量分别占脂肪酸摄入量120%～170%。三氧化铬是一种很方便的标记物，但其会高估营养物质在肠道内的流量。然而，棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸组山羊对十二指肠脂肪酸摄入量无显著影响，说明日粮添加包被共轭亚油酸不影响瘤胃微生物种群或细菌脂质合成（Jenkins等，2007）。

表4 棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸对山羊十二指肠脂肪酸流量的影响

表5 棕榈油酸钙和包被共轭亚油酸对山羊多不饱和脂肪酸摄入量的影响

在棕榈油酸钙组山羊中，C18：2 trans-10，cis-12的十二指肠流量非常低，C18：2 cis-9，trans-11的十二指肠流量为0.22 g/d，与低水平粗饲粮（35%）和高水平精料（70%）的十二指肠流量较低相似（Serment，2012）。相反，影响共轭亚油酸异构体十二指肠流动最重要的因素是日粮中脂质含量和多不饱和脂肪酸分布、精料比例以及这两个因素之间的相互作用。事实上，C18：2 cis-9，tans-11和 C18：2 trans-10，cis-12的十二指肠流量在添加60%浓缩料或玉米油、大豆油时均有增加（Duckett等，2002）。本研究中，棕榈油酸钙组日粮淀粉含量低于180 g/kg，脂肪酸含量约为3.5%，说明棕榈油酸钙组山羊C18：2 trans-10，cis-12产量较低。

本研究中，棕榈油酸钙组C18：1cis-9，C18：2 cis-9，12和 C18：3 cis-9，12，15在 瘤胃内的生物氢化反应分别为61.2%、66.7%和53.1%，但上述脂肪酸不受包被共轭亚油酸的影响，这与Serment（2012）的研究结果相一致。Glasser等（2008）报道 C18：2 cis-9，12和C18：3 cis-9，12，15的瘤胃生物加氢率分别为86%和87%，本试验结果较其低，这可能与上述对这些脂肪酸十二指肠流量高估有关，但也可能与摄入水平有关，摄入水平可通过瘤胃流出量的改变而改变生物氢化率Glasser等（2008）。包被共轭亚油酸组山羊C18：2 cis-9，trans-11和C18：2 trans-10，cis-12在十二指肠的利用大概为0.9和0.75 g/d，其代表了瘤胃15%～16%保护率。但使用植物源饱和脂肪基质保护的共轭亚油酸约65%能到达绵羊十二指肠（Wynn等，2006），这些结果的差异可能与动物品种、生理阶段（泌乳与生长）、采食量、瘤胃发酵理化参数和生物氢化途径以及这些异构体的保护方式有关。

4 结论

与添加棕榈油钙相比，在奶山羊中饲喂不受瘤胃生物氢化包被共轭亚油酸对干物质、有机物、中性洗涤纤维和淀粉摄入量、十二指肠流量及瘤胃表观消化率无显著影响。包被共轭亚油酸增加了十二指肠的流量和C18：2 trans-10，cis-12和C18：2 cis-9，trans-11的比例，使瘤胃生物氢化保护率达到15%～16%。