无偿献血者HIV初筛检测策略及确证结果对比

施克飞

江苏省常州市中心血站溧阳分站，江苏溧阳 213300

人类免疫缺陷病毒（HIV）是造成获得性免疫缺陷综合征（AIDS）的主要病原体，具有传染性，已经受到全世界的关注[1]。我国目前的艾滋病疫情呈现总体低流行、地区高流行的状态，多由高危人群扩散至低危人群，感染人群多样化。HIV的主要传播途径是血液传播，我国卫计委对血液制品潜在HIV风险也非常重视[2]。根据《献血者健康检查要求》和《血站质量管理规范》中的要求，溧阳分站对血液样本开展了严格的ELISA检测，对于复查结果仍为1种或2种检测试剂均为有反应性，则将标本送常州CDC进行确诊。该文对2012年1月—2015年12月的筛查结果进行回顾性分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取江苏常州市中心血站溧阳分站32 811例标本作为该次研究对象。该研究所选病例经过伦理委员会批准，患者或家属知情同意。

1.2 仪器和试剂

使用酶联免疫吸附法对所有标本筛查，使用人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒（上海科华、北京万泰、英科新创），检测HIV-1型、HIV-2型抗体以及HIV的p24抗原。酶免检测所使用仪器为E-STAR全自动酶免仪。如果检测结果有反应性，则按照《全国艾滋病检测技术规范》的要求，用2种试剂进行复试，若检测结果为1种或2种检测试剂均为有反应性，则将标本送常州CDC进行确诊。

1.3 统计方法

使用Pass Spring System穿越安全输血标准化软件、Liswell实验室系统，建立Excel数据库，使用统计学软件SPSS 23.0统计学软件进行分析处理。

2 结果

2012年1—12月送检标本8 851例，抗-HIV阳性数7例、送检CDC标本数3例、确诊2例，确诊率为66.67%；2013年1—12月送检标本8 293例，抗-HIV阳性数8例、送检CDC标本数6例、确诊3例，确诊率为50.00%；2014年1—12月送检标本8 229例，抗-HIV阳性数5例、送检CDC标本1例，确诊率为20.00%；2015年1—12月送检标本7 438例，抗-HIV阳性数4例、送检CDC标本4例、确诊1例，确诊率为25.00%，见表1。

表1 溧阳分站2012年1月—2015年12月数据统计

3 讨论

近年来我国AIDS患者和HIV感染者数量增加，有部分地区已经呈现HIV快速增长的趋势。目前国内主要采用ELISA法筛查HIV病毒[3]。卫计委《献血者健康检查要求》中明确规定，不同级别采血机构都需要采购不同厂家生产的试剂检测。使用ELISA筛查献血标准，可以提高的血液安全，过去的ELISA技术法有缺陷，灵敏度比较低，加上受病毒的亚型、变异、静默感染和窗口期长等因素，这些都会影响血液安全。HIV窗口期样本的漏检对血液安全有很大的影响[4-5]。现阶段本血站使用的第4代ELISA试剂敏感性、特异性有显著提高，筛查效果更好。当机体感染后HIV后的1～2周，血液中就会出现p24抗原，通过检测HIV1/2抗体和p24抗原，能够将检测的窗口期从过去的45 d缩短至16 d。核酸检测主要是针对病毒核酸，ELISA检测的是病毒产生的抗体和抗原。ELISA检测有很高的特异性，但是仍然受很多影响，①样本问题，由于血液样品溶血和患者自身抗体的交叉反应会干扰检测结果；②操作问题，底物和洗液的配置；③试剂问题，不同的实际检测能力也不同的[6]。核酸检测结果比较准确，但是也无法做到完全可靠，核酸检测窗口期、病毒含量低、病毒核酸变异等问题，都会出现假阳性。《血站技术操作规程》中对于血液检测有明确的要求，在进行核酸检测后，使用血清检测和核酸两种方法各检测1次[7]。若使用ELISA法检测阳性的标本不能再进行核酸检测，可直接判断该项目检测不合格。该站在进行血液标本筛查时，策略是2次ELISA法1次核酸检测。结合该次研究结果，2012年1—12月送检标本8 851例，确诊率为66.67%；2013年1—12月送检标本8 293例，确诊率为50.00%；2014年1—12月送检标本8 229例，确诊率为20.00%；2015年1—12月送检标本7 438例，确诊率为2.005%。可见本血站近三年，通过ELISA法筛查检测合并核酸检测，筛查的HIV阳性患者的准确率可靠，这与周玉芹[8]的研究中，2012年1—12月送检标本，确诊率为65.0%，2013年1—12月送检标本确诊率为51.0%；2014年1—12月送检标本确诊率为22.0%；2015年1—12月送检标本确诊率为26.3%的结果一致。

随着近些年来临床用血的需求量增加，血液的采集次数也不断提高，也增加了安全供血中的风险控制难度，防范经过血液传播疾病的任务也更加艰巨。我国近几年来出现因窗口期经输血感染的HIV的越来越多，部分高危患者借用献血进行体检的行也经常发生，这种行为不仅增加了血液风险，也增加了血液质量监管的难度，成为了受到社会关注的问题。该血站的工作人员在妥善处理血液后，告知献血者可能出现的影响，同时联系江苏省血液中心核实献血者的情况[9]。

ELISA是血站常用的筛查方法，对于检测HBV、HCV、HIV1+2等有很好的特异性[10]。国外推荐检测的方式是先使用1种ELISA试剂先进行血液筛查，出现反应性标本在使用相同的试剂或者是更多的试剂复查，如果复查为阳性，保证实验准确性。近些年来有学者建议，如果初次检验S/CO值非常高，不要重复检验，可直接开展确证检测[11]。ELISA多次检测为阳性的样本，可使用免疫荧光法和蛋白免疫印迹法进一步确诊，仍是诊断HIV-1感染的重要参考标准。不过不同采供血单位为了保证血液安全，尽可能降低输血传播疾病的风险，在初筛血液样本时，都会采用双试剂检测，从而提高检出率，降低风险，但是试剂耗费量较大[12]。该站使用的试剂盒为上海科华、北京万泰、英科新创，筛查呈反应性的样本再次使用原试剂和另外1种不同厂家的试剂再次检查，这样不仅可以节约人力、物力，还可以避免不必要的资源浪费。

综上所述，ELISA法可进行无偿献血HIV的初检，对于HIV抗体不确定的标本可结合核酸结果进行结果汇总。尽可能减少HIV窗口期感染样本的影响。血站工作人员应做好献血者前健康咨询，尽可能将HIV感染者隔离在献血前，规范统一各地区血站初筛结果和规则，提高血液安全性。