血清Chemerin和NGAL在慢加急性肝衰竭患者中的表达及其对预后评估的意义

肝病是目前困扰人们健康的主要问题之一[1]。当肝脏疾病进展至一定程度时，患者可能有严重的慢加急性肝衰竭(ACLF)。虽然ACLF患者在行肝移植术后能获得较好的预后，但其病死率仍居高不下[2-3]。因此，及时了解ACLF患者的病情并评估其预后对于ACLF的治疗至关重要。

趋化素(Chemerin)是一种脂肪因子，广泛参与机体代谢，与炎性反应、肥胖、多囊卵巢综合征及糖尿病等密切相关[4]。目前有研究证实，非酒精性脂肪性肝炎患者的Chemerin表达水平升高[5]。此外，Chemerin还与非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎患者的肝坏死程度及肝纤维化程度相关[6]。中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)可参与多种免疫反应，尤其是抗菌反应，已被证实是失代偿性肝硬化患者急性肾损伤的生物标志物[7]。本研究采用酶联免疫吸附法检测血清Chemerin和NGAL的表达水平，分析两者与ACLF患者预后的关系，以期为ACLF患者的预后评估提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2015年6月至2018年9月在绵阳市第三人民医院就诊的118例ACLF患者作为研究对象(设为ACLF组)。根据《肝衰竭诊治指南(2012年版)》[8]对ACLF进行诊断。纳入标准：(1)患者临床表现为黄疸[总胆红素(TBIL)>85 μmol/L]、凝血功能障碍[国际标准化比值(INR)>1.5]及低蛋白血症等；(2)近4周内出现腹水或并发肝性脑病。排除标准：(1)合并肿瘤；(2)合并自身免疫性疾病；(3)合并严重细菌或病毒感染；(4)未签署知情同意书。ACLF组男性76例，女性42例，年龄35～64岁，平均年龄(49.23±10.26)岁；ACLF的病因包括酒精性肝病18例，乙型病毒性肝炎79例，非酒精性脂肪性肝病16例，丙型病毒性肝炎5例。择同期健康体检者58例作为对照组。对照组男性32例，女性26例，年龄32～58岁，平均年龄(48.33±9.40)岁。两组受试者在性别(χ2=1.399，P=0.237)、年龄(t=0.562，P=0.575)方面的差异无统计学意义，具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 信息收集

收集受试者的性别、年龄、血清Chemerin和NGAL的表达水平，以及是否合并感染的情况。

1.3 血清指标的检测

采集受试者晨起空腹静脉血，离心并提取上层清液，保存于低温环境中待验。采用酶联免疫吸附法检测受试者血清Chemerin表达水平(试剂盒购自美国BioLegend公司，货号XYEA945Hu)和NGAL表达水平(试剂盒购自德国BioVendor公司，货号RD191102200R)。

1.4 随访

通过复诊、住院观察及电话随访等方式了解ACLF患者出院后90 d的预后情况，并记录其生存时间。

1.5 统计学方法

2 结果

2.1 两组血清Chemerin和NGAL表达水平比较

ACLF组血清Chemerin表达水平低于对照组，血清NGAL表达水平高于对照组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表1。

表1 两组血清Chemerin和NGAL表达水平比较()

2.2 ACLF生存组和死亡组患者血清Chemerin和NGAL表达水平比较

118例ACLF患者出院后90 d内共有58例(49.15%)死亡(设为死亡组)，60例(50.85%)存活(设为生存组)。死亡组血清Chemerin表达水平低于生存组，血清NGAL表达水平高于生存组，差异均有统计学意义(P均<0.05)。见表2。

表2 两组患者血清Chemerin和NGAL表达水平比较()

2.3 血清Chemerin和NGAL评估ACLF患者预后的效能

单指标评估ACLF患者预后时，Chemerin的评估效能高于NGAL，但差异无统计学意义(Z=0.982，P=0.326)。Chemerin联合NGAL评估ACLF患者预后的Logistic回归方程为F=-5.882+0.173Chemerin-4.612NGAL。Chemerin联合NGAL评估ACLF患者预后的效能高于 Chemerin和NGAL单独评估的效能(Z=2.838，P=0.005；Z=3.489，P=0.001)。Chemerin和NGAL单独评估ACLF患者预后的效能均低于MELD评分，但差异均无统计学意义(Z=0.916，P=0.360；Z=1.864，P=0.062)。Chemerin联合NGAL评估ACLF患者预后的效能高于MELD，但差异无统计学意义(Z=1.231，P=0.218)。详见图1和表3。

表3 Chemerin和NGAL评估ACLF患者预后的效能比较

注：“—”表示无数据

图1 Chemerin和NGAL评估ACLF患者预后的ROC曲线

2.4 不同血清Chemerin和NGAL表达水平的ACLF患者的预后情况

血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者的平均生存时间为30.56 d，低于血清Chemerin>79.64 ng/mL者(81.09 d)，差异有统计学意义(χ2=103.102，P<0.001)，详见图2A。血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者的平均生存时间为82.72 d，高于血清NGAL>2.23 ng/mL者(35.42 d)，差异有统计学意义(χ2=77.782，P<0.001)，详见图2B。

图2不同血清Chemerin和NGAL表达水平的ACLF患者的生存曲线A不同血清Chemerin表达水平的患者B不同血清NGAL表达水平的患者

2.5 影响ACLF患者预后的相关因素

将可能影响ACLF患者预后的因素如年龄、性别、是否合并感染、血清Chemerin和NGAL表达水平纳入Cox单因素分析，结果显示合并感染、血清Chemerin和NGAL的表达水平可能与ACLF患者的预后有关。将合并感染、血清Chemerin和NGAL表达水平纳入Cox多因素分析，结果显示合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者的预后较差。详见表4。

表4 影响ACLF患者预后的相关因素分析

注：“—”表示无数据

3 讨论

肝衰竭是一种常见的临床急重症，可导致肝脏合成、排泄、解毒及生物转化等功能障碍，严重危害人们的健康[9-10]。ACLF是肝衰竭的重要类型之一，其病死率较高[11]。影响ACLF患者预后的相关因素尚未完全明确，目前国内外学者提出的评估终末期肝病患者预后的模型如MELD、MELD-Na和iMELD未考虑并发症及相关重要生物标志物[12-14]。有研究表明，MELD、MELD-Na和iMELD等6种预测模型均不能对终末期肝病患者的预后进行准确预测[15]。ACLF患者的病情进展迅速，常规临床治疗收效甚微，因此及时评估患者预后并采取积极有效的治疗具有重要意义[16-18]。本研究通过检测118例ACLF患者血清Chemerin和NGAL的表达水平，并探究两者与ACLF患者预后的关系，以期为ACLF的预后评估奠定基础。

本研究结果表明，ACLF组血清Chemerin表达水平低于对照组，而血清NGAL表达水平高于对照组，提示血清Chemerin和NGAL可能参与ACLF的发生、发展。本研究进一步比较了ACLF生存组患者和死亡组患者血清Chemerin和NGAL的表达水平，结果发现ACLF生存组患者血清Chemerin表达水平高于死亡组患者，而血清NGAL表达水平低于死亡组患者。以上结果均提示Chemerin和NGAL共同参与了ACLF的发病和进展，且与ACLF患者的预后密切相关。本研究结果表明，单指标评估ACLF患者预后时，Chemerin的评估效能高于NGAL。Chemerin联合NGAL评估ACLF患者预后的效能高于两者单独评估的效能。MELD评分是评价终末期肝病患者预后的常用指标，具有较高的信度和效度。本研究发现，Chemerin和NGAL诊断ACLF患者预后的效能均低于MELD评分，但差异均无统计学意义。Chemerin联合NGAL评估ACLF患者预后的效能高于MELD评分，但差异亦无统计学意义。上述结果表明血清Chemerin和NGAL在ACLF患者预后评估中具有较高价值。此外，本研究发现，血清Chemerin≤79.64 ng/mL的ACLF患者平均生存时间短于血清Chemerin>79.64 ng/mL者；血清NGAL≤2.23 ng/mL的ACLF患者平均生存时间长于血清NGAL>2.23 ng/mL者。通过Cox单因素和多因素回归法分析影响ACLF患者短期预后的相关因素，结果发现合并感染、血清Chemerin≤79.64 ng/mL和血清NGAL>2.23 ng/mL的ACLF患者预后不良风险较高。

综上所述，血清Chemerin和NGAL的表达水平与ACLF患者的预后密切相关。联合检测血清Chemerin和NGAL的表达水平可辅助评估ACLF患者的预后。然而，本研究仍存在样本量偏小、仅为单中心研究等不足。期望今后能够扩大样本量，并进行多中心研究，同时分析血清Chemerin和NGAL的表达水平与ACLF患者病情严重程度的关系，以期为ACLF的临床治疗提供更多帮助。