中药方剂联合西药口服治疗慢性牙周炎的效果及对牙龈组织中ICAM-1表达的影响

胡运苑　苏黎　梁惠均　黎惠茹

【摘要】 目的：探討中药方剂联合西药口服治疗慢性牙周炎的效果及对牙龈组织中细胞间黏附分子-1（ICAM-1）表达的影响。方法：选择2017年1月-2018年1月东莞市石碣医院口腔门诊收治的慢性牙周炎患者80例为研究对象，按照随机数字表法分成观察A组和观察B组，每组40例;另选择同期性别年龄相匹配的健康牙龈患者40例为对照组。观察B组采用常规牙周基础及西药口服治疗，观察A组在此基础上，根据患者的中医辨证分型自拟方剂辅助治疗，观察比较两组慢性牙周炎患者的临床疗效，采用免疫组化Elivsion法检测比较三组患者牙龈组织中ICAM-1表达水平。结果：观察A组的治疗总有效率（92.50%）明显高于观察B组（72.50%），差异有统计学意义（P<0.05）。观察A组和观察B组患者的牙龈组织中ICAM-1表达均显著高于对照组（P<0.05），而观察A组和观察B组患者治疗前牙龈组织中ICAM-1阳性表达率比较，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，观察A组患者牙龈组织中ICAM-1阳性表达率明显较治疗前下降（P<0.05），而观察B组患者牙龈组织中ICAM-1阳性表达率变化不明显，观察A组牙龈组织中ICAM-1阳性表达率明显低于观察B组（P<0.05）。结论：中药方剂联合西药口服治疗能有效提高慢性牙周炎的治疗效果;慢性牙周炎患者的牙龈组织中存在ICAM-1过表达，中药方剂能抑制ICAM-1的表达，进而减少炎症反应和组织破坏。

【关键词】 中药; 牙周炎; 细胞间黏附分子-1; 免疫组织化学

【Abstract】 Objective：To explore the curative effect of traditional Chinese medicine prescription combined with western medicine on chronic periodontitis and the expression of ICAM-1 in gingival tissue.Method：A total of 80 patients with chronic periodontitis of Shijie Hospital of Dongguan City from January 2017 to January 2018 were selected as study objects，and they were randomly divided into observation group A and observation group B，40 cases in each group.Another 40 healthy gingival patients with matching gender and age at the same time were selected as the control group.Observation group B was treated with conventional periodontal and oral administration of western medicine.On the basis of observation group B，observation group A was treated with traditional Chinese medicine prescription.The clinical efficacy of two groups was observed and the ICAM-1 expression level in the gingival tissue of three groups were detected by Elivsion method.Result：The treatment efficiency of the observation group A（92.50%）was significantly higher than that of the observation group B（72.50%），there was statistical significance（P<0.05）.ICAM-1 expression in the gingival tissues of both observation group A and B were significantly higher than that of the control group（P<0.05），while the positive expression rate of ICAM-1 in the gingival tissues of observation group A and B before treatment showed no significant difference（P>0.05）.After treatment，the positive expression of ICAM-1 rate of the observation group A reduced significantly than that of before treatment（P<0.05），while the positive expression of ICAM-1 rate of the observation group B changed a little，and the positive expression rate of ICAM-1 of the observation group A was significantly lower than that of the observation group B（P<0.05）.Conclusion：The combination of traditional Chinese medicine prescription and western medicine periodontal can effectively improve the therapeutic effect of chronic periodontitis.ICAM-1 overexpression exists in gingival tissue of patients with chronic periodontitis.Traditional Chinese medicine prescription can inhibit the expression of ICAM-1 and thus reduce the inflammatory reaction and tissue destruction.

【Key words】 Traditional Chinese medicine; Periodontitis; ICAM-1; Immunohistochemistry

First-authors address：Shijie Hospital of Dongguan City，Dongguan 523290，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2019.03.016

流行病学研究显示，慢性牙周炎是成年人牙齿缺失的主要原因，严重影响患者的日常生活质量。目前临床西医治疗主要采用龈上洁治、龈下刮治及根面平整等基础治疗术及抗感染对症治疗，症状改善短期内显著，极易复发，且随之带来的耐药菌群发生及全身不良反应等问题仍无法解决[1-2]。近年来中医药以疗效稳定、毒副作用小、弥补西医偏重局部的缺陷及改善生活质量等优势逐渐被应用辅助治疗牙周炎，受到临床医师的关注[3-4]。本研究采用自制中药方剂辅助治疗慢性牙周炎，观察其治疗效果及对牙龈组织中ICAM-1表达的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2017年1月-2018年1月东莞市石碣医院口腔门诊收治的慢性牙周炎患者80例为研究对象，另选择同期性别年龄相匹配的健康牙龈患者（因正畸需要拔牙）40例为对照组。慢性牙周炎入选对象纳入标准：均符合中重度牙周炎诊断标准[10];口内余留牙≥20颗。排除标准：伴有全身系统性疾病;食物、药物过敏史;近1年内做过牙周治疗及近2个月服用过抗生素、非甾体抗炎药及免疫抑制剂等药物，孕妇或使用避孕药的女性。本研究通过东莞市石碣医院伦理委员会审查，所有研究对象均知情同意并签署知情同意书。80例慢性牙周炎患者按照随机数字表法分为观察A组和观察B组，每组40例。

1.2 治疗方法 观察B组采用常规牙周基础治疗，包括洁治术、刮治术、根面平整术等常规治療，双氧水、生理盐水反复交替冲洗牙周袋，并给予抗生素口服。观察A组在此基础上，加用自制中药方剂辅助治疗。根据患者的中医辨证分型自拟方剂，基本方自拟：苦参15 g、蒲公英30 g、当归12 g、茯苓15 g、甘草5 g。无明显伴证用本方。常见伴证有：风火者加银花、芦根、薄荷，风寒者加细辛、防风、麻黄，虚火、肾虚者加六味地黄丸，气虚者加补中益气汤，胃热者加玉女煎或清胃散，牙龈红肿出血属血分前方加重升麻、丹皮用量升透血分郁热，牙龈不肿偏于气分者加荆芥、防风、细辛以散气分之热，等随证加减运用。1剂/d，水煎服，煎二次服二次，7 d为一疗程，共治疗2个疗程。

1.3 观察指标与评定标准

1.3.1 疗效 治疗结束后，进行疗效评估。治愈：牙龈充血红肿消失，牙周袋消失，牙齿稳固，恢复咀嚼功能，X线片显示牙槽骨吸停止，出现硬骨板;好转：牙龈充血肿胀消失，牙周袋消失，牙齿松动度减轻，咀嚼功能有改善，X线片显示牙槽骨吸收停止;无效：经治疗症状仍存在，牙周袋存在或牙周溢服，牙松动，X线片显示牙槽骨继续吸收。总有效=治愈+好转。

1.3.2 ICAM-1 治疗前和治疗结束后，取观察A组和观察B组患者患牙周边深3 mm，长2 mm的牙龈组织（以不影响治疗为准），对照组于拔牙时切除的沿龈缘至根方深长的正常牙龈组织，4%甲醛溶液固定后进行蜡块包埋，3 μm厚连续切片。采用Elivsion免疫组织化学法检测对照组、观察A组及观察B组患者治疗前后牙龈组织中ICAM-1表达水平。Elivsion试剂盒与DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，多克隆兔抗人ICAM-1抗体购自丹麦Doka公司。严格按照二步法免疫组化试剂盒说明书进行操作。结果判断：ICAM-1蛋白染色阳性均以细胞质或细胞膜出现棕黄色颗粒且颜色浓度高于背景非特异性染色为准。每张切片随机选取5个高倍视野（×400），每个视野数100个细胞，按阳性细胞所占百分比评分，阳性细胞<10%为（-），10%～50%为（+），>50%～80%为（++），>80%为（+++），（+）、（++）及（+++）者判定为阳性表达，阳性率=阳性表达/总例数。

1.4 统计学处理 采用SPSS 21.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。检验水准为α=0.05，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组一般资料比较 观察A组男16例，女24例;年龄24～66岁，平均（41.59±4.75）岁;中度牙周炎21例，重度牙周炎19例。观察B组男17例，女23例;年龄25～65岁，平均（40.05±3.16）岁;中度牙周炎22例，重度牙周炎18例。对照组男16例，女24例;年龄23～64岁，平均（40.82±3.15）岁。三组患者一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组临床疗效比较 观察A组的治疗总有效率（92.50%）明显高于观察B组（72.50%），差异有统计学意义（字2=5.54，P<0.05），见表1。

2.3 三组牙龈组织中ICAM-1表达的比较 治疗前，观察A组和观察B组牙龈组织中ICAM-1表达均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），而观察A组和观察B组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。治疗后，观察A组牙龈组织中ICAM-1阳性表达率较治疗前明显下降（P<0.05），而观察B组变化不明显（P>0.05），观察A组明显低于观察B组（P<0.05）。见表2。

3 讨论

在我国中医药治疗牙周炎已经有悠久的历史。《内经》认为慢性牙周炎与胃火以及肾气等脏器关系密切，归于“牙宣”“齿衄”及“食床”范畴。《素问·上古天真论》和《杂病源流犀烛·口齿唇舌病源流》均证实了牙齿与肾和胃等脏器相关的理论[5]。本研究根据中医辨证施治理论，采用自制中药方剂辅助治疗牙周炎，通过观察治疗前后牙周组织状况指标变化情况对比，来评价中西结合治疗方案的临床疗效。本研究研究结果显示，观察A组的治疗总有效率（92.50%）明显高于观察B组（72.50%），差异有统计学意义（P<0.05），提示中药方剂结合西药牙周基础治疗慢性牙周炎的临床疗效显著，自制中药方剂辅助治疗能够弥补西药的缺陷，治疗上以苦参、蒲公英为主清热解毒，利湿排脓，消肿止痛为主药;当归、茯苓活血健脾扶正，增强主药功效为辅佐;甘草调和诸药，再加临床辨证运用能够显著改善患者的临床疗效，促进牙周组织健康恢复[6-7]。

大量动物实验及临床研究显示，慢性牙周炎发生发展可能与局部牙菌斑细菌、遗传、免疫、细胞因子合成和释放、慢性系统性疾病及异常精神状态均存在密切关系[8-12]。ICAM-1是免疫球蛋白超家族中的一员，介导细胞间黏附，维持组织正常结构，一旦受到病原菌、内毒素等刺激后，ICAM-1可过度表达于多种细胞上，在促进炎性细胞聚集和滞留和损伤修复等方面起着重要的作用[13-15]。近年来ICAM-1被认为在牙周炎的病理过程中起着重要的生理病理作用。有研究发现牙周膜细胞上ICAM-1的高表达，诱导炎症细胞在牙龈组织中的聚集和滞留，促进牙槽骨的吸收，加重牙周组织的破坏[16-17]。在本研究中，观察到正常牙龈组织中几乎没有ICAM-1的阳性表达，而两组慢性牙周炎患者治疗前牙龈组织中均有不同程度的ICAM-1阳性表达，且两组慢性牙周炎患者牙龈组织中ICAM-1表达均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。证明了ICAM-1在牙周炎发生过程中的作用不可忽视，这与其他实验结果相符。病原菌、内毒素等刺激ICAM-1的合成与释放，促进炎性细胞聚集和炎症介质的分泌，进一步加剧了牙龈的炎症反应和牙龈组织的破坏，从而引起一系列慢性牙周炎的病理变化。这也提示了ICAM-1与作为牙周炎药物治疗的靶点的可能性，在牙周炎发生发展过程中对ICAM-1进行调控，抑制其异常表达，有可能为牙周炎的治疗提供一条新途径——抗黏附治疗。

本研究观察了自制中药方剂辅助治疗前后牙龈组织的ICAM-1表达变化，结果发现治疗后，观察A组牙龈组织中ICAM-1阳性表达率明显低于观察B组（P<0.05）。提示牙龈组织中ICAM-1的表达受到了中药方剂的抑制，中药方剂通过对全身整体脏腑的调节作用，稳定牙龈组织中成纤维细胞，抑制其释放ICAM-1，进而减少炎症反应和组织破坏，促进牙龈的健康恢复[18-19]，这也为临床使用中药方剂辅助治疗慢性牙周炎提供可靠的理论依据。

综上所述，中药方剂联合西药口服治疗能有效提高慢性牙周炎的治疗效果;慢性牙周炎患者牙龈组织中存在ICAM-1过表达，中药方剂能抑制ICAM-1的表达，进而减少炎症反应和组织破坏。

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（收稿日期：2018-11-06） （本文编辑：程旭然）