高危型人乳头瘤病毒感染与阴道常见微生物感染的相关性研究

王荣祺，李 岩，边春红，张 委，潘 玥

（北京市海淀医院，1.检验科，2.病理科，北京100080）

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）尤其是高危型人乳头瘤病毒（high-risk human papillomavirus，HR-HPV）持续感染是宫颈癌和癌前病变发生的重要原因［1-2］。大约70% ～90%的HPV感染为一过性的，可通过自身免疫力将其从体内清除，不会引起任何组织的异常。只有一部分HPV感染不能被消除而成为持续感染，女性长时间持续感染HPV，部分患者会逐步发展为宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN），如果未及时发现和处理，最终约1%进展为宫颈癌［3］。目前研究发现，阴道感染和HR-HPV持续感染存在某种联系。细菌性阴道病（bacterial vaginosis，BV）、外阴阴道假丝酵母菌病（vulvovaginal candidiasis，VVC）、滴虫性阴道炎（trichomonal vaginitis，TV）、解脲支原体（ureaplasma urealyticum，UU）、人 型 支 原 体（mycoplasma hominis，MH）的感染为常见的阴道感染性疾病。因此，本研究通过收集并分析同时进行阴道分泌物常规、支原体培养及HR-HPV分型检测的妇科门诊患者的检查结果，着重分析上述5种阴道常见微生物感染及阴道混合感染与HR-HPV感染的相关性。现将具体内容报道如下。

材料和方法

1 一般资料

选择2018年1月至4月在北京市海淀医院妇科门诊就诊，同时行阴道分泌物常规、支原体培养及HR-HPV分型检测的患者共1999例。1999例患者的年龄为19～76岁。所有患者均满足以下标准：①3d内无阴道冲洗及阴道内置药；②24h内无性生活；③非月经期；④近期未行HPV分型检测。

2 仪器与试剂

HPV PCR检测试剂盒（上海之江生物科技股份有限公司），细菌性阴道病检测试剂盒（广州江元医疗科技有限公司），解脲支原体和人型支原体选择分离培养、鉴定、药敏试剂盒（众爱生河北生物科技有限公司），Light Cycler 480II实时荧光定量PCR仪（罗氏诊断产品上海有限公司）、OLYMPUS公司的超高倍显微镜。

3 方法

3.1 阴道分泌物常规检查 采用一次性无菌拭子从患者阴道后穹窿将分泌物取出，在生理盐水湿片上均匀涂抹，超高倍显微镜下观察有无阴道加德纳杆菌、线索细胞、滴虫及假丝样酵母菌等；采用唾液酸酶法检测BV。

3.2 阴道分泌物支原体培养 采用一次性无菌拭子从患者阴道后穹窿将分泌物取出，将标本拭子头插入解脲支原体和人型支原体选择分离培养基液体中，充分洗涤后将培养基接种至药敏板内，36±1℃培养箱中培养，48 h观察结果。

3.3 HR-HPV分型检测 首先用棉拭子擦拭干净宫颈口处分泌物，用特制的HPV宫颈刷在宫颈2 cm处顺时针方向旋转5圈，然后慢慢抽出宫颈刷，其上获得足够宫颈上皮细胞样本，随后放入含有细胞保存液的样本管中，封盖后4℃冰箱保存，1周内行HR-HPV检测，检测15种高危型HPV，HPV16、18和其他13种HR-HPV（HPV31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68和82），其中有任何一种高危型HPV检测阳性，即为阳性结果。

4 统计学处理

所有数据均使用SPSS 16.0软件进行统计学处理，计数资料的组间比较采用χ2检验。计算OR值及其95%CI描述相关危险因素与HPV感染发生的风险。以P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

1999例患者中，HR-HPV 阳性组434例，占21.71%（434/1999），HR-HPV阴性组1565例，占78.29%（1565/1999）。阴道分泌物检测BV、VVC、TV、UU、MH。阴道混合感染指感染两种或两种以上微生物病原体引起的女性生殖道感染。

1 各种阴道微生物病原体指标感染及混合感染的比率

各种阴道微生物病原体指标感染及混合感染的比率见表1。

表1 各种阴道微生物病原体指标感染及混合感染的比率（%）（n＝1999）

2 HR-HPV感染与阴道常见微生物感染及混合感染的关系

HR-HPV感染与阴道常见微生物感染及混合感染的关系见表2。

表2 HR-HPV阳性组和阴性组阴道微生物病原体及混合感染指标比较［n（%）］

讨 论

宫颈癌是世界卫生组织认可的由感染引起的恶性肿瘤，在世界妇女中的发病率仅次于乳腺癌。大量的研究证明，HR-HPV持续感染与高级别宫颈上皮内瘤变密切相关，且为发展成宫颈癌的重要因素［4-5］。由于HPV感染后通常没有明显的临床症状和体征，因此很难评估HPV感染的危险因素。目前，学者们认为，除了性行为习惯外，其他可能的危险因素包括口服避孕药、妊娠、免疫功能受损及阴道微环境改变等［6］。

BV是指阴道内乳酸杆菌减少，其竞争菌群如阴道加德纳杆菌、厌氧菌大量繁殖导致的阴道菌群失调的混合感染，是妇女最常见的阴道感染之一。本研究显示：HR-HPV感染与BV感染呈正相关（OR＝1.84，95%CI为1.08～3.15，P＝0.02），这与GILLET等［7］在一项BV感染与宫颈HPV感染的Meta分析的结果一致，与国内柳双燕等［8］的研究显示BV是HR-HPV感染的危险因素的结果一致。陈婉珍等［9］发现革兰阴性短杆菌与HPV感染显著相关，乳杆菌与HPV感染负相关。同时也有研究［10-11］发现BV与HPV清除延迟显著相关。以上均表明BV与HPV感染，特别是HR-HPV感染密切相关。

目前，VVC、TV与HPV感染是否有相关性尚存在争议。有研究认为，VVC、TV 与HPV 感染无关［8，12-13］，但也有研究显示VVC和TV与HR-HPV感染相关。本研究发现，VVC、TV感染与HR-HPV感染并无相关性，但确定性的结论仍需大量临床研究进一步证实。

本研究显示：UU、MH感染与HR-HPV感染无相关性，这与MENDOZA 等［14］研究结果一致。而SUDOLSKA等［15］对387名女性进行研究，结果表明HPV感染与UU感染明显相关。UU、MH与HPV共感染的生物学作用仍然不明确，因此HR-HPV感染与UU、MH感染的关系仍待进一步研究。

有研究显示［16-17］，阴道混合感染会增加HPV感染的几率，但本研究却发现混合感染与HR-HPV感染无相关性，因此仍需要大量临床研究进一步明确两者之间的关系。

综上所述，BV与HR-HPV感染密切相关，建议对HPV感染的患者开展阴道感染性疾病的检查，尤其积极治疗BV阳性患者，提高HPV的转阴率，以进一步降低宫颈癌前病变及宫颈癌的发生。