天枢穴位埋线对肥胖大鼠胰岛素抵抗的影响*

孟祥然,朱雪松,杨彩云,井 傲,谭奇纹,2,于慧娟,2△

(1.山东中医药大学,山东 济南 250014；2.山东中医药大学附属医院,山东 济南 250014)

肥胖作为全球性疾病[1]，其病因除与不良生活方式和先天因素有关外，胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)是导致其最主要的因素[2]。有研究表明，肥胖与IR一般相继发生，大多数IR患者为肥胖型，而几乎所有肥胖者都伴有IR[3]、血脂紊乱以及血清脂联素(Adiponectin,APN)、视黄醇结合蛋白4(Retinol binding protein 4,RBP4)水平的异常。

《素问·六微旨大论曰》：“天枢之上，天气主之；天枢之下，地气主之”。张景岳注：“枢，枢机也。居阴阳升降之中，是为天枢”。天枢穴位于人体上下之气交合处，为升清降浊之枢纽，具有健脾胃、调胃肠的功效。穴位埋线能够纠正脂肪组织的分泌紊乱、缓解代谢性炎性反应状态[4]。天枢穴位埋线可以整体调节机体脂代谢，改善大鼠肥胖指标，但其作用机制有待进一步阐释。因此，本实验通过构建肥胖大鼠模型，从天枢穴位埋线影响肥胖大鼠体重、腹围、Lee's 指数、血清甘油三脂(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)、APN、RBP4、空腹血浆中胰岛素(Fasting plasma insulin,Fins)及IR的角度，阐明其在减肥中的作用，为临床应用提供实验依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

健康雄性Wistar大鼠60只，约230 g,在山东大学实验动物中心进行饲养及观察[许可证号:SCXK(鲁)2013 0009]。

1.2 造模

将实验大鼠分笼，每笼装3～4只。实验开始前先用普通饲料及饮用水喂养7天。7天后将大鼠随机分为两组:①普通组(10只)：给予普通饲料喂养；②高脂饮食组(50只)：给予高脂饲料(普通饲料60%、蔗糖15%、奶粉13%、猪油12%)喂养。4周后，用电子天平(精确度0.5 g)称量体质量 ，超过普通组大鼠体质量20%时，造模成功。

1.3 天枢穴定位

依据《实验针灸学》[5]中大鼠穴位定位方法及模仿人体骨度分寸法。天枢穴的定位:大鼠腹部脐两侧旁开约5 mm[6]。

1.4 实验分组及处理

将造模成功的36只肥胖大鼠随机分为模型组、药物组和穴位埋线组。模型组不做治疗。药物组处理：奥利司他35 mg/kg(规格为0.12 g,重庆华森制药有限公司)，配合使用生理盐水2 mL灌胃，1天1次，连续治疗并观察4周。穴位埋线组处理：大鼠固定鼠台，将约0.5 cm长的羊肠线(山东博大医疗用品有限公司)插入穿刺针(镇江高冠医疗器械有限公司)中，局部消毒后，刺入大鼠双侧天枢穴，顺势将羊肠线留于大鼠脂肪层。出针后，用低致敏型透气胶贴贴于双侧天枢穴体表。埋线1周1次，持续4周。实验期间，各组大鼠自由摄食和饮水，普通组给予普通饲料喂养，其余组均以高脂饲料喂养。

1.5 观察指标

1.5.1 各组动物体质量变化 实验第28天用电子天平(精确度0.5 g)称量体质量。

1.5.2 各组动物的腹围及Lee's指数 实验第28天用卷尺准确测定腹围：大鼠取仰卧位时，测量剑突和后肢间垂直距离中点1周的长度；麻醉后测体长(鼻到肛门的距离)并得出Lee's指数：Lee's指数=[体质量1/3(g)×1 000]/ 体长(cm),反映了体脂含量的多少。

1.5.3 TG、TC检测 实验第28天，收集各组大鼠5 mL左右的血液，静置2～3 h，离心取血清，放于-80℃冰箱，留存检测。试剂盒测定TG和TC的浓度(试剂盒由美国Phoenix公司提供)。

1.5.4 APN、RBP4检测 采用放射免疫法测定(试剂盒由美国Phoenix公司提供)。

1.5.5 胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数检测(IRI) 检测空腹血浆中葡萄糖(Fasting blood glucose,FBG)、Fins，分别计算IRI,IRI=FBG×Fins/22.5；计算ISI,ISI=-ln(FBG×Fins)，即ISI定义为FBG含量与Fins含量乘积的倒数，取其自然对数。采用放射免疫法测定Fins。

1.6 统计学方法

2 结果

2.1 各组肥胖指数比较

药物组和穴位埋线组体质量、腹围及Lee's指数均低于模型组(P<0.05)。穴位埋线组体质量、Lee's指数低于药物组(P<0.05)，两组间腹围差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 各组大鼠肥胖指数比较

注：与普通组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05;与药物组比较,○P<0.05。

2.2 各组血脂成分比较

药物组和穴位埋线组TC、TG均低于模型组(P<0.05)，两组间上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

表2 各组大鼠血脂比较

注：与普通组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05。

2.3 各组APN、RBP4比较

与模型组比较，药物组和穴位埋线组APN增高、RBP4降低(P<0.05)；与药物组比较，穴位埋线组APN增高于药物组、RBP4低于药物组(P<0.05)。见表3。

表3 各组大鼠APN、RBP4比较

注：与普通组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05；与药物组比较，&P<0.05。

2.4 各组胰岛素抵抗相关指标比较

药物组和穴位埋线组FBG、Fins、ISI和IRI均低于模型组(P<0.05)，穴位埋线组上述指标均低于药物组(P<0.05)。见表4。

组别nFBG(mmol/L)Fins(mIU/L)ISIIRI普通组107.9±1.75.0±1.00.66±0.121.8±0.6模型组1212.4±1.3∗13.3±0.8∗1.08±0.17∗7.3±0.5∗药物组1210.1±0.9∗#8.7±0.9∗#0.87±0.12∗#3.9±0.5∗#穴位埋线组129.4±1.3∗#&6.4±1.1∗#&0.79±0.11∗#&2.7±0.8∗#&

注：与普通组比较，*P<0.05；与模型组比较，#P<0.05；与药物组比较，&P<0.05。

3 讨论

3.1 IR与脂代谢

IR是指机体对胰岛素的反应减弱，产生过量胰岛素的病理状态[7]。肥胖是导致IR最主要的原因。在肥胖机体中，脂代谢增强，TG分解释放游离脂肪酸(Free fatty acids,FFA)增多，FFA含量上升，导致IR[8]。

目前研究[9]显示,穴位埋线可以较好地调整机体脂代谢。本课题研究表明,天枢穴位埋线具有减轻体重、腹围的趋势,因此在减肥中作用明显。同时,能更好地减少腹脂,使Lee's 指数、TC及TG 水平下降，改善脂代谢紊乱，Fins亦显著降低，从而有效改善IR[10]，表明穴位埋线对肥胖机体具有减肥、良性调节血脂的作用。

3.2 IR与APN、RBP4

有研究发现，IR与体内APN含量呈负相关，与RBP4含量呈正相关[11]。APN作为内源活性多肽，是机体抗IR过程中最关键的因素。在肥胖引起的IR中，APN表达下调[12]。RBP4作为一种新的脂肪因子,广泛存在于血液、脑脊液中。有研究阐述RBP4在IR过程中的主要机制为:①RBP4可通过对IRS1-Ras-MAPK信号传导通路进行干预，导致IR[13];②RBP4可增加肝糖输出，产生IR。本实验显示,APN降低及RBP4升高后，机体对胰岛素敏感性降低，导致严重的IR；当APN恢复正常以及RBP4含量降低时，IR可改善。埋线法和奥利司他可以有效调控APN、RBP4表达，并且埋线法效果较好。

3.3 天枢穴位埋线的作用机制

姜氏[14]课题研究显示穴位埋线明显降低肥胖机体体重、Lee’s指数(P<0.01),效果优于西药，其机制是通过中枢和外周路线改善机体的IR。在改善肥胖机体和抑制IR方面，穴位埋线法优于西药，并且可以避免西药的不良反应。本实验选用的天枢穴是大肠募穴，可调畅一身气机。天枢穴位埋线既有针刺基本治疗功效,又有“静以留之”的持久刺激。其大致机理为线体在体内分解的过程,对穴位产生的生理和生化刺激至少两周，有别于针刺时不锈钢针暂时的单一物理作用[15]。此种治疗方法将多种刺激结合，在相应中枢节段控制下，良性调整脏腑功能[16]。故本研究推测天枢穴位埋线改善IR的作用机制可能是通过神经-内分泌-体液-免疫等途径，增强各种代谢物质的活性，促进机体对葡萄糖和脂肪的吸收、转化等，提高胰岛素敏感性，从而改善肥胖机体IR。

综上，天枢穴位埋线可以有效减轻肥胖机体的体质量与体脂,良性调整脂代谢以及合理调控机体APN和RBP4表达，增强胰岛素的生理效应，改善肥胖机体IR，具有显著的降血脂、减体脂作用,对于防治肥胖及其并发症有较好的临床效果。当然，其具体作用机制有待于后期在相关研究中进一步探索和完善。