氧立方胶囊提高缺氧耐受力功能实验研究

张凤清, 陈艳菊， 刘隆基, 董 刚

(1.长春工业大学 化学与生命科学学院, 吉林 长春 130012;2.吉林恒金药业股份有限公司， 吉林 梅河口 135000;3.中国石油西南化工销售公司， 四川 成都 610036)

0 引 言

因高原缺氧而表现出的种种症状，医学上称为高原适应症[1]。中医理论认为高原适应症是由于体内的正气虚损，气虚不能运化水谷之精微，机体组织无精气营养而造成的病态反应；藏医药则认为高原缺氧属于藏医药学“坏血增多”范畴，发病原因是由于高原氧气不足，主要诱发因素是体内的三大基因平衡失调，机体抵抗力下降，影响了胃中“龙”、“赤巴”、“培根”之消化功能，使饮食不能消化为精微而在肝后变成坏血[2]。根据现代生物学对高原适应症而影响机体变化的机理以及中医对高原适应症的观点，认为补益类的药方可以提高机体缺氧耐力，实践证明这个观点是正确的。大多数中药复方是以补气、补血药物为君药，配以补虚药物为臣药，其治则应以益气活血、补虚助阳为法[3]。

氧立方胶囊由枸杞、银杏叶和蜂胶组成，是一种用于提高缺氧耐受力的保健食品，为评价该保健食品的功效，对其耐缺氧能力的改善进行了研究，目的在于证明氧立方胶囊对机体耐缺氧能力的改善进行评价，同时分析其耐缺氧的机制。

1 材料和方法

1.1 样品

氧立方胶囊是由枸杞、银杏叶和蜂胶为主要原料，以淀粉为辅料制成的保健食品。规格：0.5 g/粒(每粒含枸杞、银杏叶和蜂胶的生药量分别为120、120、20 mg)。食用方法及食用量：口服，4粒/次，每日1次。保质期：24个月。贮存方法：常温、密封避光。实验时选用蒸馏水配制受试物，配置后低温保存。

1.2 实验动物

小鼠，昆明种雌、雄各半，18～22 g，SPF级。实验动物提供单位：长春市亿斯实验动物技术有限公司。动物室环境条件：温度为20 ～25 ℃，相对湿度为40%～70%。

1.3 给予方式及剂量

按人体推荐量的 10、20、30 倍的剂量设计，最终设三个剂量组，分别为333.3、666.7、1 000 mg/kg·BW。配制方法：称取受试物8.3、16.7、25.0 g，用蒸馏水定容至 250 mL容量瓶中，混匀，低温保存，每天按20 mL/kg·BW灌胃给药，连续 30天；对照组：蒸馏水。

1.4 主要仪器

电子天平、秒表。

1.5 主要试剂

亚硝酸钠、钠石灰、凡士林。

1.6 实验方法

所有实验的对照组动物为相同剂量的蒸馏水。

1.6.1 常压耐缺氧实验

将末次给予受试物1 h后的小鼠分别放入盛有5 g钠石灰的250 mL磨口瓶内，用凡士林封瓶口后盖严，使之不漏气，观察小鼠因缺氧而死亡的时间(以呼吸停止为指标)。

1.6.2 亚硝酸钠中毒存活实验

将末次给予受试物1 h后的小鼠分别按200 mg/kg·BW剂量腹腔注射亚硝酸钠(注射量为0.1 mL/(10 g))，记录小鼠存活时间(以呼吸停止为指标)。

1.6.3 急性脑缺血性缺氧实验

将末次给予受试物1 h后的小鼠自颈部断头，记录小鼠断头后至张口喘气停止时间。

1.7 数据统计

采用 SPSS 11.0 软件包处理。

1.8 结果判定

按2003版《保健食品检验与评价技术规范》的规定进行判定。

2 结 果

2.1 小鼠30天灌胃毒性观察

实验过程中，小鼠呼吸、皮毛、活动均正常，口鼻处无明显可见分泌物，实验中小鼠无死亡。实验初期常压耐缺氧组小鼠体重差异、亚硝酸钠中毒组小鼠体重差异、急性脑缺氧组中小鼠体重差异分别见表1～表3。

表2 亚硝酸钠中毒组小鼠体重

表3 急性脑缺氧组小鼠体重

表1～表3结果显示，常压耐缺氧组、亚硝酸钠中毒组、亚硝酸钠中毒组小鼠体重与阴性对照组比较，受试物各剂量组实验动物体重均无显著差异。

在实验过程中，小鼠体重正常增长，但动物中期体重和结束时体重与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，表明氧立方胶囊内容物灌胃后小鼠生长发育正常，未见明显与受试物相关的毒性反应。

2.2 氧立方胶囊对小鼠常压耐缺氧时间的影响

小鼠放入磨口玻璃瓶并密封后，活动由正常逐渐减少，呼吸逐渐变得急促，最后抑制，口唇逐渐变得绀紫，临终前反跳，最后死亡。氧立方胶囊对小鼠常压耐缺氧时间的影响见表4。

表4 氧立方胶囊对小鼠常压耐缺氧时间的影响

由表4 可见，三个剂量组小鼠常压耐缺氧时间均长于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。

2.3 氧立方胶囊对亚硝酸钠中毒小鼠存活时间的影响

腹腔注射亚硝酸钠后，起初活动正常、呼吸平稳，随着时间延长，小鼠活动逐渐减少，呼吸先急促后抑制，最后停止呼吸，尾部颜色逐渐变暗。氧立方胶囊对亚硝酸钠中毒小鼠常压耐缺氧时间的影响见表5。

表5 氧立方胶囊对亚硝酸钠中毒小鼠常压耐缺氧时间的影响

由表5可见，各剂量组小鼠亚硝酸钠中毒后存活时间均不同程度延长，与对照组比较，中、高剂量组小鼠亚硝酸钠中毒后存活时间延长有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。低剂量组存活时间虽然长于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。

2.4 氧立方胶囊对急性脑缺血性小鼠耐缺氧时间的影响

氧立方胶囊对急性脑缺血性小鼠耐缺氧时间的影响见表6。

表6 氧立方胶囊对急性脑缺血性小鼠耐缺氧时间的影响

由表6可见，剂量组小鼠急性脑缺血后存活时间均不同程度延长，与对照组比较，中、高剂量组小鼠亚硝酸钠中毒后存活时间延长有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。低剂量组存活时间虽然长于对照组，但差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨 论

氧是维持生命活动所必需的物质。因供氧减少或利用氧障碍引起细胞发生代谢、功能和形态结构异常变化的病理过程称为缺氧。缺氧是造成细胞损伤的最常见原因，也是存在于多种疾病中的基本病理过程之一[4-5]。

亚硝酸盐能使二价铁血红蛋白转变成三价铁血红蛋白，破坏血红蛋白携氧能力，造成组织缺氧而使小鼠死亡。氧立方胶囊能够提高亚硝酸钠中毒小鼠存活时间，表明其可能抑制亚硝酸盐毒性，从而保护血红蛋白携氧能力。断头促使小鼠急性缺血，导致缺氧。氧立方胶囊能够提高急性脑缺血性缺氧小鼠张口喘息时间，表明其可能与降低耗氧量，提高对氧的利用能力有关。

氧立方胶囊是由枸杞、银杏叶、蜂胶组成。现代药理研究证明：枸杞能提高机体耐缺氧能力,减轻缺氧应激对机体造成的损伤;具有抗氧化、抗自由基能力[6-8]。银杏叶能够改善心功能和血管内皮功能,减轻炎性反应;扩张血管、降低阻力,增加血流量,防止缺血、缺氧及脑水肿,促进脑细胞功能恢复；改善肺组织氧化应激、抑制细胞凋亡，具有抗氧化、清除自由基、抗炎、肾脏缺血再灌注损伤保护等多种作用[9-12]。蜂胶具有保护脑损伤、抗氧化、清除自由基、减轻炎细胞对组织损害等作用。这些作用为氧立方胶囊提高缺氧耐受力提供理论依据。