原子吸收法血铅检测的实验室内质量控制探讨

康俊辉

铅是具有神经毒素的重金属元素，铅中毒的危害主要表现在对神经系统、血液系统、心血管系统、骨骼系统等的终身性伤害上[1]，血铅是当前最可行的能灵敏反映铅对人体危害的生物指标，血铅测定已成为众多医疗机构开展的常规项目[2]。由于血液机体成分较复杂，影响血铅的检测因素较多，其检测过程中的质量控制，对于保证测定结果的准确性、可靠性和可比性具有极其重要的作用[3-4]。有资料显示[5]有些实验室该项目的精密度和准确度不能满足质量要求，检测结果也无可比性，不能为临床提供有价值的数据，怎样才能做出具有参考价值的实验结果呢？本实验室用钨舟原子吸收光谱法进行血铅测定，经过几年实践，掌握了一定的室内质量控制的方法和防止检测结果偏倚的经验，从而保证了血铅测定结果的可靠性和稳定性，现总结如下。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试剂及耗材 博辉公司提供的配套试剂及定值质控品，采血所需的肝素管及0.5 MLEDTA-K2抗凝管，无铅玻璃微量吸管。

1.1.2 仪器 BH-2101S钨舟原子吸收光谱仪，铅空心阴极灯。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 成人抽取静脉血置于肝素管内，儿童可取末梢血（采血前嘱咐患者洗手，严禁污染，如血铅＞100 μg/L，则重新抽取静脉血复查），将标本混匀，吸取40 UL加入专用试剂中，混匀待检。

1.2.2 质控品制备 定值质控品由厂家提供，混匀后取40 UL加入专用试剂中，混匀后随标本待检。其中中值铅含量为100 μg/L，高值铅含量为300 μg/L。

1.2.3 实验方法 根据仪器操作规程及实验室操作要求进行日常工作：开机预热，能量调整，制定标准曲线（定标），室内质量控制，标本测定，仪器维护保养等。

1.2.4 标准曲线 按操作规程定标，浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，相关系数（r）≥0.99为可接受[6]。

1.2.5 精密度的验证 测定高（220 μg/L）、中（110 μg/L）、低（50 μg/L）值三个浓度水平，每天一次，连续20天，计算CV值。

1.2.6 室内质控 以博晖公司提供的血铅质控品为样品，连续测定20天，计算出平均值、标准差、变异系数，设定上、下警告线和控制线，绘制质控图，用Westgard多规则进行统计分析。每天在测试标本前先进行中、高两个质控水品测试，结果应在控制线以内方可测试标本，且每间隔10个标本加测一次质控品，监视漂移情况，同时，放在最后结束样品前，可检出偏移[7-8]。

平行样本的分析及重复测定：个别标本测定须作平行双样的分析（对于血铅含量大于400 μg/L的样品也要进行平行双样的分析）且两次结果小于分析方法规定的批间精密度或平行样测定允许的最大误差（血铅浓度≥100 μg/L时，允许最大误差10%，血铅浓度20～100μg/L时，允许最大误差15%）[7]。

1.2.7 室间质控 参加卫生部的室间质评，一年3次，一次5个水平。三年来，共45个质控样品，其中43个符合规定，2个发生偏倚，准确率为97.9%。同时，将卫生部公布样品均值与本实验室所测定值进行相关性分析，两者呈显著的线性正相关，r=0.994（P＜ 0.01）。

2 结果

该实验方法精密度、平行样本的分析及重复测定样本的批间精密度实验血铅浓度≥100μg/L时，误差小于10%，血铅浓度20～100 μg/L时，误差小于15%，室间质量控制准确率97.9%，见表1。均在《血铅临床检验技术规范》[6]要求范围内。

表1 方法的精密度结果

3 讨论

工业及现代化的飞速发展造成了环境污染，空气中的铅污染及作业场所铅污染已受到人们的普遍关注，而血铅含量的测定是判断是否受到铅中毒最有力的实验指标[9]，必须保证铅测定的准确性。任何检测项目的质量控制都包括分析前、分析中、分析后三部分，铅的质量控制也不例外，具体表现在以下方面。

铅标本的采集环节非常重要，首先采血场所必须远离铅污染源，使用的所有试剂均应采用最高的纯度级别，所有器皿、用品必须是一次性使用，并需抽样进行空白检验，必要时对所有器皿、用品应先行无铅化处理，分析者必须避免自身因素（化妆品、外敷药物、乳胶手套等）对样品的污染[10-12]。如今，标本来源大部分为儿童，末梢血容易污染，一方面采集时要等到血液流到皮肤表面 ，再放入容器，比静脉穿刺污染的机会大大增加。另一方面，由于毛细血管采血量少，极微量的污染可对血铅水平产生显著的影响，所以儿童手指采血前必须先用肥皂将手洗净，再用EDTA溶液擦洗，最后用酒精棉球反复擦拭表面皮肤，如怀疑铅高，必须采集静脉血。

检测过程中，必须做好标准曲线，质控必须合格，如果失控必须查找原因直到质控合格后方能进行标本检测，同时做好记录分析，批量测试时必须加测质控，血铅值≥400 μg/L时，要重新测定，两次结果允许误差要符合要求。儿童手指血检测血铅超过100 μg/L时，须抽静脉血复检，成人静脉血超过300 μg/L时，本实验室建议重抽血复检。BH-2101S钨舟原子吸收光谱法测定血铅时，钨舟的使用次数会影响测定结果，一般使用300次左右，就须更换，或者质控发生漂移时，重新定标也无法纠正，也要更换，其他检测血铅方法[13-14]也有各自相关要求.

参加室间质控是检验结果的保证，本实验室三年来的正确率为准确率为97.9%，有两次检测结果发生偏倚，可能原因：（1）质控品未混匀或加样不准确；（2）未全程执行质控监督，数据发生漂移未发现；（3）未对质控品进行平行测定取均值或两次测试数据偏差大未处理；（4）室内质控品用完后未及时到位，未做室内质控。所以，室内质控是正确率的保证，一定要严格按操作规程进行质控及失控处理，不能偷工减料，盲目自信。

综上，血铅测定属于微量分析，样品测定影响因素较多，任何细微的内在、外在因素变化都可能影响其结果的可靠性，不是有仪器、会操作就能得到满意结果[15]，从标本采集、保存、到检测全过程，每一个环节都必须严格执行操作规程和采取质控措施，才能保证结果的准确性。