血清学三联筛查联合羊水穿刺在18、21-三体综合征产前诊断中的应用

赵咏梅，张传英，陈俭辉，赵连芳

(遂宁市中心医院产前诊断实验室，四川遂宁 629000)

我国新生儿缺陷率较高，新生儿缺陷率占出生总人数的4%～6%，每年有20～30万缺陷新生儿出生，给家庭和社会带来巨大负担[1-2]。因此，降低新生儿的缺陷率，提高出生人口素质，是我国亟待解决的重大问题。据统计，18-三体综合征(又叫爱德华氏综合征)和21-三体综合征(又叫唐氏综合征)为常见的新生儿缺陷疾病[3]，患儿多表现为智力低下和结构畸形，对患儿后期生活造成极大影响。因此，孕妇在孕期进行科学的产前诊断具有重要意义[4]。目前，临床上主要采取血清学筛查等无创型筛查对孕早、中期孕妇进行产前检查。血清学三联筛查为检测孕妇血清甲胎蛋白(AFP)、β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)及雌三醇(μE3)水平，虽然其具有一定局限性[5-6]，但该法操作简便，为无创型检查，且价格经济合理，已被广大医护人员及孕妇所接受。疑似怀有缺陷及遗传病胎儿的孕妇，可进一步通过羊水穿刺检查。羊水穿刺是目前常见的有创型产前诊断检查，通过培养羊水细胞检查胎儿是否患有染色体疾病[7]。因此，本研究采用血清学三联筛查对孕中期孕妇进行科学的产前检查，对高危孕妇进一步进行羊水穿刺，检查胎儿是否患有染色体疾病，旨在探究血清学三联筛查联合羊水穿刺在18、21-三体综合征产前诊断中的应用价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2015年1月至2017年12月来本院进行血清学三联(AFP、β-HCG、μE3)筛查的26 158例孕妇为研究对象，孕妇年龄20～42岁，平均(27.45±6.86)岁，孕周15～20+6周，平均孕周(17.45±4.54)周。月经正常者，孕周期从末次月经开始计算，月经不正常者，通过B超检测孕周期。排除非单胎妊娠、患重大疾病、慢性疾病的孕妇。以年龄为分组标准，将孕妇分为两组，年龄≥35岁为高龄组，年龄<35岁为低龄组。

1.2仪器与试剂 磁性微粒子化学发光法(贝克曼库尔特公司生产，仪器型号：Access2)和其配套试剂盒及风险评估软件(上海腾程科技制备)；羊水培养基(美国Gibco公司生产)。

1.3检查方法 抽取孕妇肘静脉血3 mL，静置0.5 h后置于4 000 r/min转速下离心5 min，吸取血清，将血清置于-20 ℃下保存。采用磁性微粒子化学发光检测仪及其配套的双标试剂(AFP、β-HCG)及试剂盒(μE3)来检测孕妇血清标志物中AFP、β-HCG及μE3水平，所有检测于1周内完成[8]。血清标志物的生化值结合孕妇的年龄、孕周及体质量信息，采用风险评估软件对孕妇进行筛查风险率评估。设定21-三体综合征高风险临界值(cut-off值)为1/270，cut-off值1/1 000～1/270即为高风险；18-三体综合征高风险cut-off值为1/350，cut-off值1/1 000～1/350即为高风险。筛查后，对高风险孕妇进一步进行羊水穿刺检查[9]。在B超指导下，抽取孕妇羊水20 mL(最初2 mL弃去)均分于2个离心管中，于1 200 r/min转速下离心10 min，弃去上层清液，下层悬浊液接种于2个细胞培养瓶中，向培养瓶中加入3 mL羊水培养液后置于5%二氧化碳恒温培养箱中培育7 d。7 d后更换培养液，继续培养至显微镜下可见分裂期细胞。随后，加入秋水仙碱后继续培育3.5 h，后置于1 200 r/min转速下离心10 min，得到下层细胞沉淀。经低渗、预固定、固定、制片等处理，于显微镜下观察染色体核型。所有孕妇均随访至其产后3个月。

2 结 果

2.1血清学三联筛查结果 通过血清学三联筛查结果发现，26 158例孕妇中，18-三体综合征和21-三体综合征的筛查阳性率分别为0.58%和7.15%，总阳性率为7.73%，见表1。

表1 血清学三联筛查结果

2.2羊水穿刺检查结果 对血清学三联筛查为阳性的孕妇进一步行羊水穿刺检查，共有1 921例高风险孕妇接受羊水穿刺检查(接受率为95.00%)，结果显示，其中21-三体综合征22例，18-三体综合征13例，染色体异常结果见表2。

表2 胎儿染色体异常结果

2.3高低筛查风险孕妇妊娠结局对比 2 022例高风险孕妇中，151例发生不良妊娠结局。其中21-三体综合征22例(1.15%)，18-三体综合征13例(0.68%)，联合B超等其他检查，还有116例孕妇发生不良妊娠结局。24 136例低风险孕妇中，有526例孕妇发生不良妊娠结局。高风险孕妇的不良妊娠结局发生率明显高于低风险孕妇(P<0.05)，见表3。

表3 高低筛查风险孕妇妊娠结局对比

2.4高低年龄孕妇筛查高风险率对比 高龄组孕妇21-三体综合征阳性筛查率为28.28%，18-三体综合征阳性筛查率为3.18%；低龄组孕妇21-三体综合征阳性筛查率为6.36%，18-三体综合征阳性筛查率为0.48%。高龄组孕妇筛查高风险率明显高于低龄组(P<0.05)，见表4。

表4 高低年龄孕妇筛查高风险率对比

2.5不同年龄孕妇21、18-三体综合征发生率对比 高龄组孕妇经羊水穿刺检查，21-三体综合征4例，18-三体综合征3例；低龄组21-三体综合征18例，18-三体综合征10例。高龄组孕妇21-三体综合征和18三体综合征发生率明显高于低龄组(P<0.05)，见表5。

表5 不同年龄孕妇21-三体综合症和18-三体综合征发生率对比

3 讨 论

随着我国二胎政策的开放，新生儿出生率正逐渐升高，18、21-三体综合征等患儿的出生率也呈升高趋势[10]，因此，采取有效且科学的产前筛查和诊断对降低缺陷儿出生率，提高我国人口素质具有重要的意义。血清学三联筛查为无创型检查，且其操作简单，具有经济优势，能有效筛查胎儿染色体异常。对筛查后高风险孕妇进一步行羊水穿刺检查，通过培养羊水细胞检查，可以观察胎儿是否患有染色体疾病[11-12]，血清学三联筛查联合羊水穿刺已成为18、21-三体综合征等染色体疾病产前诊断的主要技术手段之一[13]。

本研究采用血清学三联筛查对孕中期孕妇进行科学的产前筛查，对筛查高风险孕妇进一步行羊水穿刺，检查胎儿是否患有染色体疾病。通过血清学三联筛查结果发现，26 158例孕妇中，18-三体综合征和21-三体综合征的筛查阳性率分别为0.58%和7.15%，总阳性率为7.73%。1 921例孕妇进一步接受羊水穿刺做胎儿染色体检查，其中21-三体综合征22例(1.15%)，18-三体综合征13例(0.68%)。另外，高风险孕妇不良妊娠结局发生率明显高于低风险孕妇(P<0.05)。庞春玉等[14]对5 922例孕中期孕妇进行血清学三联筛查，结果显示，筛查高风险孕妇473例，其中21-三体综合征高风险416例(7.02%)，18-三体综合征高风险5例(0.08%)，高风险筛查组妊娠异常率明显高于低风险筛查组(P<0.05)，本研究21-三体综合征高风险率(7.15%)结果与其相近，18-三体综合征高风险率(0.58%)结果明显高于其研究结果。说明血清学三联筛查对18、21-三体综合征能有效评估孕妇怀有染色体缺陷胎儿的风险性，对高风险孕妇进一步行羊水穿刺检查，观察胎儿是否存在染色体异常，对妊娠结局具有一定的指导意义，从而降低缺陷胎儿出生率。随着孕妇年龄的增长，子宫和卵子均不断老化，更容易造成胎儿染色体异常[15]。因此，本研究还探索了年龄与胎儿染色体异常之间的关系，研究发现，高龄组孕妇21-三体综合征阳性筛查率为28.28%，18-三体综合征阳性筛查率为3.18%；低龄组孕妇21-三体综合征阳性筛查率为6.36%，18-三体综合征阳性筛查率为0.48%。高龄组孕妇筛查高风险率明显高于低龄组(P<0.05)，该结果与朱翔等[9]报道相似。由此可见，血清学三联筛查对预防高龄孕妇发生不良妊娠结局具有积极的意义。

综上所述，血清学三联筛查联合羊水穿刺行胎儿染色体检查对18、21-三体综合征的预防具有较高的应用价值，对不良妊娠结局具有一定的指导，对预防缺陷新生儿具有重要的意义，能提高健康新生儿出生率，提高我国人口综合素质。