张鲍虎 张 莉 杨书才 周 杰
深圳市坪山区人民医院检验科,广东深圳 518118
呼吸道感染性疾病对人类健康的危害近年来逐渐加重,而引起感染的病原体种类繁多,有病毒、细菌、支原体、衣原体等,这些病原体可能会单一感染,也可能会出现多重感染,临床症状亦呈现多样化[1],而呼吸道感染在人群中以儿童的发病率较高[2-3],对于呼吸道感染病情及时准确诊断需求亦越来越高,且病原体感染后,临床症状往往不够特异,临床医生难以把握病情,所以对患者进行必要的实验室检测越发重要,而实验室检测方法多种多样,如细胞培养、细菌培养、间接免疫荧光法、病原体基因检测等[4],使用间接免疫荧光法检测病原体感染后的血清特异性IgM 能够直接反映患者感染的病原体种类,对临床治疗及时提供理论依据,且此类方法准确高效,成本低廉,操作简便[5-7]。
收集2015 年1 月~2016 年12 月在我院就诊的住院及门诊呼吸道疾病感染患者4014 例,其中男2439 例,女1575 例,依研究设计将年龄分三组:(1)<18 岁组患者3201 例;(2)18 ~50 岁组患者607 例;(3)>50 岁患者206 例,患者主要临床症状表现为发热、咳嗽、流涕、喘息,经听诊有肺部细湿啰音。
奥林巴斯CX41-32RFL/CX-DCD 荧光显微镜,检测试剂盒为西班牙格拉纳达VIRCELL,S,L 公司生产的呼吸道九连检载玻片,检测项目包括腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(INFA)、乙型流感病毒(INFB)、副流感病毒1/2/3型(PIV)、嗜肺军团菌(LP)、肺炎支原体(MP)、Q热立克次体(COX)、肺炎衣原体(CP)。
1.3.1 采样方法 要求患者空腹,离心后分离血清待测。
1.3.2 检测方法 严格按照产品说明书正确操作。
1.3.3 结果判定 阳性结果:ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 的整个孔里有1%~15%细胞的细胞质、细胞膜或细胞核出现苹果绿色荧光,MP 细胞外周出现苹果绿色荧光,LP、COX、CP 中所有菌体呈现苹果绿色荧光。阴性结果:MP、ADV、RSV、INFA、INFB、PIV 中的细胞呈现红色,COX、LP、CP 孔里无荧光。质量控制:每一次检测使用试剂盒配套阴阳性质控品,阴性质控9 项结果均为阴性,阳性质控9 项结果均为阳性才能判断实验合格。
采用SPSS16.0 软件进行数据处理,计数资料以[n(%)]表示,采用χ2检验,P <0.05 为差异有统计学意义。
共检出IgM 阳性1474 例,阳性率36.72%,部分患者呈现多重感染情况,其中排名前三的分别是MP 981 例,LP 203 例,INFB 192 例,阳性率分别为:24.44%、5.06%及4.78%,阳性率构成比分别为:66.55%、13.77%及13.03%。见表1。
表1 九种呼吸道病原体阳性率及阳性构成比
男性患者2439 例共检测阳性结果783 例,阳性率32.10%,女性患者1575 例共检测阳性结果691 例,阳性率43.87%,男性患者人群感染率明显低于女性患者,差异有统计学意义(χ2=57.052,P <0.01)。见表2。
表2 男女患者呼吸道阳性检出率
按照常规惯例将每年的3 ~5 月定为春季,以此为顺序,春和冬季人群感染率明显高于夏和秋,差异有统计学意义(P <0.05),各季节感染人群以MP 为主,其他病原体随季节变换交替流行。见表3。
表3 不同季节呼吸道病原体检测结果
4014 例样本中,<18 岁组的3201 例,检出阳性1288 例,年龄分组人群感染率<18 岁组与>50岁组人群感染率明显高于18 ~50 岁组的人群,差异有统计学意义(P <0.05)。见表4。
表4 不同年龄组呼吸道病原体检测结果
引起呼吸道疾病的病原体较多,感染症状类似,一般不容易直接区分,临床的经验治疗可能会导致抗生素滥用,耽误患者病情治疗,而引起呼吸道感染的因素较多,常见有细菌、病毒、衣原体、支原体等微生物[8],如何快速准确的检测出病原体种类成为呼吸道疾病治疗的关键。
目前呼吸道病原体检测方法较多,常见的有核酸检测、细胞培养及血清病原体抗体检测等方法。核酸检测方法准确高效,但需要购置昂贵的仪器,不适用于基层医院。细胞培养方法,培养呼吸道病原体难度大,操作复杂,检测周期长,不适于临床需求。本实验使用间接免疫荧光法(IFA)检测病原体抗体,可以同时检测9 种呼吸道感染性疾病的常见病原体,检测周期短,结果准确,操作简便,适用于大量标本同时检测,能及时为临床治疗提供理论依据,是一种可靠的呼吸道常见病原体检测方法[9-11]。
呼吸道感染性疾病是一种常见病,本次研究发现4014 例患者呼吸道病原体检测结果,共检出IgM阳性1474 例,总阳性率 36.72%,这与莫伟平、白洁、林传俊等研究一致[12-14],各类病原体检出率以MP为主,与多数报道相符,排名第二的LP 人群感染率为5.06%,明显高于莫伟平、白洁、林传俊等研究结果[12-14],这可能是由于LP 的主要传播方式与社区获得性感染有关,坪山区位列深圳东部,人口相对集中容易导致社区获得性肺炎的传播;另外LP 夏季1153 例呼吸道患者阳性人数68 例,占比5.90%位列四季第一,这可能与炎热的夏季空调使用密切相关,LP 常隐藏于空调制冷装置中,随冷风吹出导致人体感染,研究提示人们即使在炎热的夏季也应该保持室内通风减少呼吸道疾病感染。此次研究发现9 例COX 感染的患者,蜱是COX 传播的主要媒介,而坪山区周边山区较多,容易接触丛林导致感染,提示人们出入丛林时应涂抹驱虫药物以避免感染此类疾病。另外研究发现男女感染比率差异有统计学意义,可能是由于女性体质相对较弱容易发生感染,本次研究统计数据显示女性感染人群明显高于男性,这与王金华等研究相符[15]。
呼吸道疾病可发生于各个年龄段,以老人和儿童发病率较高,是老人和儿童人群的重要死因之一[16-17],而一线城市人口密度大,人员活动范围相对集中,更容易促进呼吸道疾病的传播,另外老人和儿童的免疫力相对低下,易成为呼吸道病原体的感染对象,本次研究发现<18 岁组和>50 岁相对于18 ~50 岁组较易发生感染,人群感染率统计显示:<18 岁组与>50 岁分别为40.24%、34.47%,明显高于18 ~50 岁组18.95%,>50 岁组的人群感染率与王金华等研究结果差异较大[15],这可能与区域差异有关。因季节和地域性差异导致的呼吸道病原体流行性也存在一定变化,因此对本地区的呼吸道感染性病原体流行病学调查和研究尤其重要,研究发现本地区春和冬季人群感染率明显高于夏和秋,差异有统计学意义(P <0.05),提示人们在容易发生呼吸道疾病的春冬季应尽量避开人群密集的场所,以免感染呼吸道病原体,各季节感染病原体数量以MP 为主,其次是LP 和INFB,其他各项病原体感染随季节变换感染情况也有所变化。
综上所述,本研究从性别、季节、环境与年龄等多方面分析了本地区的呼吸道疾病的病原体感染情况,为本地区流行病学调查提供了大量宝贵数据,也为临床对呼吸道疾病的治疗提供高效、准确的理论参考依据。