自体疣包埋疗法联合ALA-PDT治疗外阴部尖锐湿疣的疗效分析

黄邦高 徐智慧 王彦彬 诸靖宇 李军华

尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒（HPV）感染引起的一种常见的性传播疾病。近年来，我国尖锐湿疣发病率逐年升高，占性传播疾病的第3位[1]。自体疣包埋疗法是一种免疫疗法，通过自体疣包埋使疣体与机体免疫系统接触，激发机体针对HPV的细胞免疫反应，有利于机体打破对HPV的免疫耐受，降低尖锐湿疣复发率。光动力疗法是通过光敏剂特异性地积聚在病变组织，并结合相应波长的激光照射来激发光敏剂的光化学反应，产生多种活性氧，选择性地杀伤生物细胞而达到治疗目的。本研究对3组外阴部尖锐湿疣患者分别采用自体疣包埋疗法联合盐酸氨基酮戊酸光动力疗法（ALA-PDT）、单纯自体疣包埋疗法、单纯ALA-PDT治疗，观察并比较3组患者免疫系统变化及临床疗效，现将结果报道如下。

1 对象和方法

1.1 对象 选取90例会阴部尖锐湿疣患者为研究对象，其中杭州市第三人民医院70例，浙江省人民医院20例。纳入标准：（1）皮损原发于会阴部皮肤；（2）经HPV-DNA 检测为尖锐湿疣；（3）无淋巴结转移；（4）签署知情同意书。排除有严重光过敏反应者。将90例患者按抽签法随机分成3组，每组30例，分别采用自体疣包埋疗法联合ALA-PDT（A组）、单纯自体疣包埋疗法（B组）、单纯ALA-PDT（C组）治疗。本研究经医院医学伦理委员会审批通过。

1.2 方法

1.2.1 主要材料及设备 0.25%氯霉素溶液（0.25g氯霉素针剂溶于100ml 0.9%氯化钠溶液），外用ALA（118mg/瓶，上海复旦张江生物医药股份有限公司）；XD-635AB型光动力激光治疗仪（桂林市兴达光电医药器械有限公司）。

1.2.2 自体疣包埋疗法 患者新鲜疣体常规消毒、局麻，使用蚊式钳夹住疣体基底部，手术刀切取约米粒大小的湿疣组织1个，压迫止血。将分离的湿疣组织浸泡在0.25%氯霉素溶液中备用。患者左上臂三角肌区常规消毒、局麻，使用手术刀纵向切开皮肤1cm左右，深达浅筋膜。将浸泡在0.25%氯霉素溶液中的湿疣组织取出，用0.9%氯化钠溶液冲洗后，小心置入切口，埋置于皮下组织，注意勿触及上皮。缝合皮肤切口，局部用无菌纱布包扎。予抗生素口服3d，术后10d拆线。

1.2.3 ALA-PDT 使用灭菌0.9%氯化钠溶液清洗皮损部位，新鲜配制的20%ALA均匀涂在皮损部位及其周围2cm皮肤，塑料薄膜封包3h，使用波长为635nm的光动力激光治疗仪照射，选择最大输出功率150mW，根据光斑大小及照射时间计算激光照射总能量，使其达60～100J/cm2。7～10d重复治疗1次，共治疗5次。

1.2.4 观察指标 （1）治疗前及治疗1、3、6个月时外周血T淋巴细胞亚群（CD4+、CD8+T淋巴细胞）及血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平，计算 CD4+/CD8+。（2）治疗后6个月HPV复发率：采用局部皮损HPV-DNA检测及光敏试验检查复发情况。

1.3 统计学处理 应用SPSS 13.0统计软件。计量资料用表示，两组比较采用两独立样本t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 尖锐湿疣患者外周血T淋巴细胞亚群及血清免疫球蛋白水平与正常参考值比较 90例外阴部尖锐湿疣患者外周血CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+以及血清 IgG、IgA、IgM 水平分别为（30.86±5.42）%、1.12±0.21和（7.53±0.82）、（1.17±0.32）、（0.97±0.38）g/L，均低于正常参考值；CD8+T淋巴细胞百分比为（35.26±5.51）%，高于正常参考值。

2.2 3组患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及血清免疫球蛋白水平变化 与治疗前比较，治疗后1、3、6个月时3组患者外周血CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均明显升高，CD8+T淋巴细胞百分比明显下降，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。A组患者治疗后1、3、6个月CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均高于B、C组，CD8+T淋巴细胞百分比均低于B、C组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）；B组患者治疗后1、3、6个月外周血CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA水平均高于C组，差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表 1。

表1 3组患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及血清免疫球蛋白水平变化

2.3 3组患者治疗后6个月HPV复发率比较 经治疗后，所有患者去除疣体。A组患者治疗后6个月HPV复发率为0，低于B组的10.0%和C组的16.7%，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

3 讨论

尖锐湿疣是临床上常见的性传播疾病，具有传染性强、复发率高等特点[2]。加上患者感染HPV后，机体免疫功能出现紊乱，会导致尖锐湿疣的病情延长，增加治愈难度[3]。因此，选择合适的治疗方法具有重要意义。自体疣包埋疗法是一种主动免疫疗法，将含有大量HPV颗粒的疣组织移植于患者皮下组织，疣体分解后，缓慢释放大量HPV抗原，刺激机体产生针对HPV的特异性免疫反应，增强患者的免疫功能[4]。Usman等[5]从血清免疫球蛋白水平及T淋巴细胞计数等方面进行评价，发现自体疣包埋疗法能增强尖锐湿疣患者的机体细胞免疫及体液免疫功能。ALA-PDT是一种安全、有效的新型治疗方法。外源性ALA能被疣体及周围受HPV感染的组织选择性地吸收，经特定波长红光照射后发生光敏反应，产生活性氧而杀死受感染的细胞，对周围正常组织损伤轻微[6]。此外，ALA-PDT对尖锐湿疣的效果也可能与诱导机体局部产生免疫反应有关[7-8]。

相关研究表明，尖锐湿疣患者机体细胞免疫及体液免疫功能受到抑制[9-10]。而CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+及免疫球蛋白是衡量细胞免疫及体液免疫功能的主要指标。本研究采用3种疗法治疗外阴部尖锐湿疣，观察并比较3组患者治疗前后外周血CD4+T淋巴细胞百分比、CD8+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平，结果显示自体疣包埋疗法联合ALA-PDT治疗外阴部尖锐湿疣的患者，其细胞免疫及体液免疫功能较单纯自体疣包埋疗法及单纯ALA-PDT治疗的患者均明显增强；且单纯自体疣包埋疗法的疗效优于单纯ALA-PDT。进一步比较术后6个月HPV复发率，结果显示自体疣包埋疗法联合ALAPDT治疗组明显低于其他两组。这说明自体疣包埋疗法联合ALA-PDT治疗外阴部尖锐湿疣能提高患者机体细胞免疫及体液免疫功能，并降低HPV复发率，其疗效优于单一疗法。

综上所述，自体疣包埋疗法联合ALA-PDT治疗外阴部尖锐湿疣的疗效明显，能增强患者机体免疫功能，降低HPV复发率，可作为临床上治疗外阴部尖锐湿疣的首选方案。