延胡索中重金属及有害元素的测定

李雅萌，王亚茹，周柏松，李平亚，刘金平，杨娜

（吉林大学药学院，长春 130021）

延胡索为罂粟科植物延胡索（Corydalis yanhusuo W.T.Wang）的干燥块茎，性味辛、苦、温，是传统的止痛类中药材，在我国用药历史悠久，毒性低、安全性高、无成瘾性，为非麻醉性镇痛药[1]。延胡索中含有生物碱、甾醇、三萜类等多种化学成分[2-6]，生物碱类化合物为其主要活性成分[7-9]，现已发现这些生物碱类化合物具有活血、利气、止痛等多种药理活性[10-11]。此外，现代研究发现，延胡索还具有催眠、抗心肌缺血[12]、扩张冠状动脉、降压以及抗胃肠溃疡[13]、抗肿瘤[14]、抗炎、抗菌、抗病毒、提高抗应激能力等[15-16]药理作用。

生长在土壤中的植物类药材含有有害残留物质或污染物质的概率较高，其种类主要是残留农药、重金属和生物毒素等。重金属及有害元素在人体内代谢缓慢，容易积累，对人体产生危害[17]，因此，重金属及有害元素是评价中药材及中药饮片安全性的重要指标之一。药材中的重金属及有害元素主要是指铅（Pb）、汞（Hg）、镉（Cd）、铜（Cu）、铋（Bi）、锑（Ti）、锡（Sn）、砷（As）等。本实验采用电感耦合等离子体-质谱（ICPMS）法测定延胡索药材中重金属及有害元素含量，为延胡索的进一步研究和应用提供科学依据。

1 材料

1.1 试验材料

延胡索药材由吉林金宝药业股份有限公司提供，经吉林大学药学院李平亚教授鉴定为罂粟科植物延胡索（C.yanhusuo W.T.Wang）的干燥块茎。

1.2 仪器与试剂

7500a型电感耦合等离子体质谱仪（美国Agilent公司）；AL104型电子天平（瑞士Mettler2Toledo公司）；Milli-Q超纯水机（美国Millipore公司）；720电热板（浙江省诸暨县马剑电热仪器厂）；标准检验筛200目筛（浙江上虞市张兴纱筛厂）。

Cu、镍（Ni）、铬（Cr）、Pb、Cd、Sn、钴（Co）、Hg、As 9 种元素标准溶液（10 mg/L），铟（In）、铑（Rh）单元素内标溶液（50mg/L），锂（Li）、钇（Y）、Co、铋（Bi）质谱调谐液（10mg/L）（Agilent公司）；超纯水为18.2M/cm，硝酸为优级纯，氢氟酸为色谱纯。

试验用器皿均用10%硝酸浸泡过夜，用超纯水冲洗后备用。本实验所用各种酸均经亚沸腾2次蒸馏后使用。

2 方法

2.1 仪器工作参数

用 Li、Y、Co、Bi调谐液（10mg/L）对仪器进行最佳工作条件的选择，使仪器的各项参数均达到测量指标，条件参数见表1。

表1 仪器工作条件参数Tab.1 Working condition parameter of instrument

2.2 供试品溶液的制备

将延胡索样品粉碎，精密称取样品0.2 g于5 mL聚四氟乙烯溶样弹中，加入1.0 mL硝酸及0.5 mL双氧水，在120℃的电热板上加热至液体呈湿盐状，加入1.4 mL氢氟酸、1.6 mL硝酸，加盖，放入恒温干燥箱，190℃保持48h。在箱内自然冷却至室温后，在120℃的电热板上，蒸至溶液呈湿盐状，冷却，加50%硝酸3.0mL，加盖，放入恒温干燥箱，150℃保持12h。冷却后，将消解液移至50 mL聚氯乙烯样品瓶，用高纯水定容至刻度，即得供试品溶液。按照上述同样的方法制备空白试样。

2.3 标准溶液的制备

精密吸取9种元素标准溶液，分别用3%HNO3溶液逐级稀释成各系列浓度的标准溶液。

2.4 内标溶液的制备

精密吸取In、Rh标准溶液，用3%HNO3溶液稀释制成1µg/L的内标溶液。

3 结果与讨论

3.1 线性关系与检出限

在设定的工作参数下，测定各元素标准溶液绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程。测定空白溶液10次，根据10次测定结果计算出标准偏差，以3倍标准偏差作为仪器检出限，结果各元素的检测限在0.001 6～0.022 7之间。见表2。

表2 线性关系及检出限Tab.2 Linear relationship and Detection limit

续表2

3.2 精密度试验

在表1条件下，取同一标准品溶液平行测定6次，计算出各元素的精密度，所测各元素RSD在1.13%～3.16%之间，表明仪器的精密度良好。

3.3 重复性试验

取延胡索样品粉末6份，按照“2.2”项下方法平行制备供试品溶液，“2.1”项下仪器条件进行测定，6次重复进样的测定结果，各元素RSD在1.02%～3.25%之间，表明重复性良好。

3.4 加样回收试验

为验证方法准确性，对延胡索样品中各元素做加样回收试验。制备低、中、高3个浓度的供试品溶液，分别加入混合标准溶液，测定结果如表3所示，加样回收率为96.0%～100.4%。

表3 加样回收率Tab.3 Recovery of sample （%）

3.5 样品测定结果

将“2.2”项下制备的各供试品溶液，按照“2.1”项下仪器条件进行测定，结果见表4。

表4 延胡索中重金属及有害元素含量测定结果Tab.4 Content of 9 kinds of heavy metals and harmful elements in corydalis rhiozoma

4 结论

中药材生长周期较长，重金属及有害元素易在药材体内蓄积，尽管Mn、Cu、Zn等重金属是生命活动所需要的微量元素，但Hg、Ag、Cd等大部分重金属并非生命活动所必须。控制中药中重金属及有害元素的含量是确保中药“安全、有效、可控”的首要问题之一[18]。我国《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》[19]中限定含量 Pb≤5.0g/g、Cd≤0.3g/g、Hg≤0.2g/g、As≤2.0g/g、Cu≤20.0g/g。本试验采用ICP-MS法测定延胡索药材中9种重金属及有害元素含量，结果表明，实验药材中 Pb、Cd、Hg、As、Cu 5 种有害金属含量均低于限量值，符合标准，可用于进一步的研究。