DC-CIK细胞过继免疫治疗联合XELOX方案化疗对进展期结直肠癌患者的疗效分析

王村，温珍平，梁俊青

内蒙古自治区肿瘤医院肿瘤内科，呼和浩特 010000

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）为临床较为常见的疾病，多数患者在确诊时已处于进展期，失去手术机会，因此合理的内科治疗十分重要。化疗为CRC患者的主要内科疗法，可降低患者肿瘤负荷，临床有效率约为50%，但化疗在杀伤肿瘤细胞的同时也会对正常细胞造成损伤，患者的不良反应较大[1-2]。伴随分子生物学的不断发展，细胞过继免疫治疗有不良反应小、适应证广等优点，得到了人们的重视。细胞过继免疫治疗是将异体或者自体免疫效应细胞通过体外活化扩增后输注给患者，杀伤机体内肿瘤细胞。当前临床在肿瘤治疗中普遍应用的细胞过继免疫治疗方法为联合杀瘤功能强大的细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine-induced killer cell，CIK）和抗原呈递作用最强的树突状细胞（dendritic cell，DC）[3-4]。因此，本研究通过分析DC-CIK细胞过继免疫治疗联合XELOX化疗对进展期CRC患者的疗效，为临床治疗提供一些参考，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2015年6月至2017年6月在内蒙古自治区肿瘤医院接受治疗的进展期CRC患者104例。纳入标准：①经病理检查确诊为进展期CRC（Ⅲ期、Ⅳ期）；②至少进行2个周期治疗；③肾、心及肝等脏器功能正常；④体力状况（performance status，PS）评分为1～2分。排除标准：①处于哺乳期或妊娠期者；②合并肾、心及肝等原发性疾病；③有免疫抑制剂、激素药物服用史；④合并其他肿瘤或者免疫相关性疾病者；⑤合并肺炎或者全身感染者。按随机数字表法将104例进展期CRC患者分为两组，观察组（52例）行DC-CIK联合化疗，对照组（52例）行化疗，两组患者基线特征比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）（表1），具有可比性。本研究经内蒙古自治区肿瘤医院伦理委员会批准，患者及家属均知情并签署同意书。

表1 两组患者的基线特征分布

1.2 治疗方法

对照组患者采用奥沙利铂+卡培他滨（XELOX）方案化疗：奥沙利铂130 mg/m²，d 1；卡培他滨1250 mg/m2，d 1～12，21天为1个周期，共治疗6个周期。观察组患者在化疗前收集50 ml外周血，分离单核细胞，在实验室对DC-CIK细胞进行培养，患者采血后第3天开始化疗，化疗方案与对照组一致。细胞培养周期为15天，上清液中检测无真菌、细菌生长且免疫功能检测细胞培养物合格后，采用无菌生理盐水洗涤细胞，将细胞溶于100 ml含2%白蛋白的无菌生理盐水内，分两次给患者输注，1次/月。

1.3 观察指标及评价标准

依据实体瘤疗效评价标准（response evaluation criteria in solid tumors，RECIST）[5]评价患者近期疗效，病灶全部消失并保持4周为完全缓解（CR），病灶最长径之和减少30%以上并保持4周为部分缓解（PR），病灶最长径之和增大20%以上并保持4周为疾病进展（PD），介于PR和PD之间为疾病稳定（SD），缓解率（response rate，RR）=（CR+PR）例数/总例数×100%，疾病控制率（disease control rate，DCR）=（CR+PR+SD）例数/总例数×100%。检测患者治疗前后血清糖类抗原242（carbohydrate antigen 242，CA242）、糖类抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）及癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）水平。流式细胞仪检测患者治疗前后T淋巴细胞亚群[自然杀伤性T（natural killer T，NKT）细胞、自然杀伤（natural killer，NK）细胞、CD4+、CD3+、CD8+]和白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）、白细胞介素-2（interleukin-2，IL-2）、干扰素-γ（interferon-γ，IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）水平。观察记录患者不良反应发生情况。

1.4 统计学分析

采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数及率（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 近期疗效的比较

观察组患者的RR为61.54%（32/52），DCR为75.00（39/52），分别高于对照组的40.38%（21/52）和55.77%（29/52），差异均有统计学意义（χ2=4.656、4.248，P＜0.05）。（表2）

表2 两组患者的近期疗效 [n（%）]*

2.2 治疗前后血清肿瘤标志物水平的比较

治疗后两组患者血清CEA水平均较治疗前降低，差异均有统计学意义（P＜0.05）。治疗前后两组患者CA242、CA19-9、CEA水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。（表3）

2.3 治疗前后 T淋巴细胞亚群水平的比较

治疗前，两组患者CD4+、CD3+、CD8+、NK及NKT水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，观察组患者血清CD4+、CD3+、CD8+及NKT水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。（表4）

注：*与同组治疗前比较，P＜0.05

表4 治疗前后两组患者 T淋巴细胞亚群水平的比较

2.4 治疗前后血清细胞因子水平的比较

治疗前，两组患者血清 IL-6、IL-2、IFN-γ及TNF-α水平比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，观察组患者血清IL-2、IFN-γ及TNF-α水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.01）。（表5）

表5 治疗前后两组患者血清细胞因子水平的比较

2.5 不良反应发生情况的比较

观察组有3例患者发生轻、中度发热，体温为37.6～38.5℃，及时对症处理后缓解。两组患者均未出现神经毒性、胃肠道反应及骨髓抑制等不良反应。

3 讨论

进展期CRC患者的主要治疗方法为化疗，使用细胞毒药物联合的化疗方案，中位生存时间只有10个月左右[6-7]。DC-CIK细胞过继免疫治疗是通过CIK与DC结合对恶性肿瘤进行治疗，体内CIK群主要效应细胞为CD56+和CD3+[8]。DC-CIK不但可以激发、加强患者机体内特异性肿瘤免疫应答，将体内残留病灶清除，还可以在机体内引起免疫记忆，使抗肿瘤效应持续时间更长，为一种有效、特异且全新的治疗方式[9-10]。本研究结果显示，观察组患者RR为61.54%，DCR为75.00%，对照组患者RR为40.38%，DCR为55.77%，差异均有统计学意义（P＜0.05），说明DCCIK联合XELOX化疗方案可提升对进展期CRC患者的化疗有效率。相关研究显示，CRC患者体内肿瘤标志物特别是CEA能够作为疗效预测和监测病情的指标，在诊断及评估CRC患者疗效中联合检测肿瘤标志物要比任何单一检测指标价值更高[11-12]。本研究结果显示，治疗后两组患者血清CEA水平均较治疗前降低，差异有统计学意义（P＜0.05），但组间比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。细胞免疫在抗肿瘤免疫治疗中起着重要作用，细胞因子和T淋巴细胞亚群水平可以较好地反映患者机体内细胞免疫状况。T淋巴细胞亚群包含CD8+和CD4+两类T细胞，其中均存在免疫抑制性细胞与抗肿瘤免疫细胞，Th2、Th1及Th0为CD4+所分泌的3种不同细胞因子，Th0细胞为未成熟的前体细胞，成熟后可分化为Th2和Th1细胞，Th2分泌的细胞因子包含IL-6、IL-4等，Th1分泌的细胞因子包含TNF-α、IL-2及IFN-γ等。健康人机体内Th1/Th2维持动态平衡，但CRC患者机体内由于免疫功能被抑制，Th1/Th2比值会失去平衡，Th1转变为Th2，抑制负性免疫调节，不利于自身免疫细胞清除肿瘤细胞[13-16]。本研究结果显示，治疗后，观察组患者血清CD4+、CD3+、CD8+、NKT、IL-2、IFN-γ及TNF-α水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），说明化疗在杀灭患者体内肿瘤细胞的同时对抗肿瘤免疫效应细胞和细胞因子也有影响，减轻化疗造成的免疫抑制，调整机体抗肿瘤免疫。综上所述，CRC患者行DC-CIK细胞过继免疫治疗联合XELOX化疗可改善机体免疫功能，减轻单纯化疗所造成的免疫抑制，为安全有效的疗法。