王一峰
(陇南师范高等专科学校农林技术学院,甘肃 成县 742500)
核桃(JuglansregiaL.)又名胡桃,属于胡桃科植物,是重要的油料和坚果树种,位列世界四大干果之首[1],也是我国重要的经济林树种之一[2]。核桃在我国分布广泛,除个别省区市外,全国各省区市都有种植[3],我国核桃种植面积和产量均居世界第一[4]。甘肃是中国核桃的7大主产区之一[5],成县地处甘肃南部,是甘肃核桃的主产县,是中国核桃之乡[6]。成县核桃种质资源丰富,核桃生产优势突出,但核桃育种起步较晚,育种手段相对单一,品种良莠不齐,良种化程度较低。因此,创新核桃育种材料,培育适合当地气候条件的优良种质材料,选育出优质、高产、高抗的优良品种已成为成县核桃产业发展的关键。
杂交育种是利用不同遗传性状的种质材料,通过人工授粉、选择,获得新品种的育种方法。相对选择育种,杂交育种富有创造性和预见性[7],已成为改良核桃品质的重要手段[8-9]。中国开展核桃育种已有多年,并取得了一定的成果,李少雄等[10]、马贯羊等[11]用美国黑核桃和魁核桃作母本,中国铁核桃和普通核桃作父本,通过杂交育种分别选育出了产量、抗逆性高于亲本的核桃品种。另外,我国育成辽宁系列、云新系列、香玲、丰辉、鲁光等杂交品种,已成为部分产区的主栽核桃品种[12]。
为创新成县核桃育种材料,改良现有核桃品质,成县于2009年成立了核桃新品种杂交选育课题组,开启了核桃杂交育种的探索之路,经过多年的不断实践,不断改进,期望利用有性杂交创造变异,再利用无性嫁接固定变异的办法,选育出具有树势健壮、高产稳产、抗逆性强、品质优良的新品种。
于2009年以丰产性较好的当地核桃品种陇南15为母本,以陇南755、香玲、薄丰、辽核2号、辽核3号为父本,在成县观光园进行杂交试验。所用亲本核桃基本情况如表1。
表1 杂交亲本基本信息
1.2.1 套袋 选择树势健壮、无病虫害的壮龄期母树(陇南15)作母本,在雌花显蕾初期随机选择发育良好的雌花,用硫酸纸袋套住,并编号挂牌,每株套袋30个,作3个重复。
1.2.2 花粉采集 选择树势健壮、无病虫害的核桃单株,于雄花散粉初期的晴天上午8:00~10:00点采摘雄花穗,装于干燥的硫酸纸袋中置于室内阴干散粉,并对花粉进行过筛和活力测定,将测定合格的花粉装在棕色瓶中用纱布封口后置于4 ℃冰箱中备用。
1.2.3 人工授粉 待雌花柱头呈“V”字形时,于晴天上午8:00~10:00进行人工授粉,授粉时用软毛刷蘸取花粉,均匀抖落到雌花柱头上,随后用硫酸纸袋套住授完粉的植株,并挂牌记录。授粉后1~2 d观察授粉结果,对授粉未成功的植株进行补充授粉。
1.2.4 杂种实生苗培育 于2009年9月将杂交组合F0代种子进行处理后,播种在育苗钵中,每钵1~2粒,放置于温室中培育,生长1 a后移栽到试验田中继续培育。
1.2.5 杂种后代选育 于2011在F1代实生苗中,选择性状优良的植株剪取接穗,按株行距2 m×8 m高接进行培育。系统观测记载,选择树势健壮、短枝型、侧花芽结实率高、萌芽迟、雌花可授期晚、抗逆性强的植株作为中选株保苗,未中选株淘汰。同时对中选株生长和结果习性、坚果性状进行观察鉴定或测量比较。
于2016年9月核桃成熟时,在高接的杂交种核桃树冠的上、中、下不同部位随机采收100粒(不足100的全部采摘)坚果作为供试样品,统一脱皮晾干,从各样品中随机抽取20粒作为试验样品,依据国家核桃坚果质量等级标准(GB/T20398-2006)进行性状指标的测定。
所测坚果性状指标数据用Excel2003处理,用SPSS17.0进行方差分析和多重比较。
本试验将2009年人工授粉杂交所获得的种子进行了播种,经过1 a的实生苗培育后于2011年春季高接到5 a生的砧木上,并逐年观察嫁接苗的生长和结实特性,观察结果如表2。
表2 杂交种F1代开花、结果习性
由表2可知,以陇南15作母本,以薄丰、辽核2号、辽核3号作父本进行杂交,所得F1代在嫁接定植后的第2年(2013年)便开始结果,改变了母本陇南15结果较晚的特点,而以陇南15作母本,以陇南755和香玲作父本进行杂交,所得F1代在嫁接定植后的第4年(2015年)开始结果。同时,以陇南15作母本,以香玲、薄丰、辽核2号、辽核3号作父本进行杂交,所得F1代开花习性表现为雄先型,改变了母本陇南15雌先型的开花习性。
本研究于2016年9月对所有杂交组合所得杂交种F1代坚果果实特性进行了鉴定,结果如表3。
表3 杂交种F1代果实特性
由表3可知,除“陇南15×薄丰”组合F1代果实为长圆形外,其他组合F1代果实均为圆形;所有杂交组合果壳较为光滑(壳窝浅);“陇南15×辽核2号”果壳缝合线及密度较弱,“陇南15×辽核3号”缝合线及密度居中,其他组合果壳缝合线紧密度都强;所有组合F1代果实横膈膜均为膜质;除“陇南15×辽核2号”“陇南15×辽核3号”核仁较饱满外,其他组合核仁都饱满;除“陇南15×辽核2号”F1代果实核仁颜色较深(褐色)外,其他组合F1代果实核仁颜色均较浅(浅黄色)。
本研究于2016年9月对所有杂交组合所得杂交种F1代坚果的主要经济指标进行了测定,结果如表4。
注:同列不同小写字母表示差异显著(p<0.05)。
由表4可以看出,不同杂交组合F1代坚果主要经济性状差异显著(p<0.05),表明在母本相同的情况下,用不同的父本与之杂交,所获得的杂交种果实差异较大。对照(陇南15)相比,组合“陇南15×陇南755”所得杂交种果实变大,单果重增加,果壳厚度减小,出仁率降低;组合“陇南15×香玲”所得杂交种果实变小,单果重减小,果壳厚度减小,出仁率增高;组合“陇南15×薄丰”所得杂交种果实大小、单果重变化不大,果壳厚度减小,出仁率降低;组合“陇南15×辽核2号”所得杂交种果实大小、单果重、果壳厚度变化不大,出仁率增高;组合“陇南15×辽核3号”果实变小,单果重降低,果壳厚度变小,出仁率降低。
通过杂交能使基因分离和重组,使杂交性状出现多样性,产生可遗传的变异,从亲本优良性状获得杂种优势,进而得到更加优良的品种。因此,获得可遗传的变异是遗传育种的关键,本试验对以陇南15作母本,其他核桃品种作父本杂交所获得的F1代果实表型性状的多样性进行了分析,结果如表5。由表5可知,以陇南15作母本和不同品种进行杂交,所得杂种F1代果实性状存在多样性,变异系数在6.98%~21.01%之间,变异最大的是果壳厚度,变异系数为21.01%,其次是出仁率和单果重,果实大小差异较小。
表5 不同杂交组合F1代果实表型性状多样性分析
陇南15是从甘肃省陇南市当地实生核桃中选育的优良品种,2008年通过甘肃省陇南市科技局品系鉴定,该品种果实大,丰产性和适应性强,但是结果较晚,开花习性为雌先型,容易遭受低温冻害,尤其遇到晚霜冻害时减产严重。基于此,本研究以陇南15作母本,选择丰产性强、结实早、抗寒性较强的核桃品种作父本进行杂交,欲达到对陇南15不良性状改良的效果。其中,陇南755为陇南市选育的优良品种,在当地表现优良,结实早,丰产性、抗寒性较强,薄丰、香玲、辽核2号、辽核3号都是陇南市引种表现优良的核桃品种,都为早实性核桃品种。试验结果表明,选择薄丰、辽核2号、辽核3号等早实性核桃与晚实性核桃陇南15杂交,杂交种表现为早实性,改变了母本陇南15的晚实性,同时,以雄先型核桃香玲、薄丰、辽核2号、辽核3号等为父本与陇南15杂交,杂交种的开花习性表现为雄先型,改变了陇南15为雌先型的开花习性。
本试验所选亲本的果实表观特征都很优良,不同杂交组合所得的杂交种F1代的果实表观特征总体表现良好,表明核桃果实表观特征能够稳定遗传。另外,不同杂交组合产生的杂种后代坚果的主要经济性状差异显著(P<0.05),多样性分析结果也表明,不同组合产生的杂种后代坚果经济性状存在多样性,表明通过杂交,可以产生丰富的遗传变异,丰富了成县核桃育种的材料。