冯云霞,王 路,惠永华
(1.济源市畜产品质量监测检验中心,河南济源 459000;2.济源市动物疫病预防控制中心,河南济源 459000;3.济源市动物卫生监督所,河南济源 459000)
脂肪酸β-氧化是家禽胚胎发育的主要能量来源,是孵化所必需的条件。有研究表明,肉碱能促进脂肪酰基从蛋黄通过卵黄囊膜转移到胚胎小鸡的组织中(喻小琼等,2013)。然而,鸡胚在孵育过程中合成左旋肉碱的能力有限,此外,用植物性原料饲养的蛋鸡新产的鸡蛋含有低浓度的左旋肉碱(马友彪等,2015)。Kidd等(2009)发现,日粮添加40 mg/kg的左旋肉碱可以改变商品肉鸡的代谢,提高大腿组织的产量,随后在20%粗蛋白质的日粮组肉鸡小腿肌肉产量更高。添加25 mg/kg肉碱可以提高青年母鸡所产鸡蛋在孵化18 d后卵黄和肝脏肉碱的浓度,影响鸡胚脂肪酸β-氧化(Peebles等,2007)。在相同肉鸡品种的日粮中添加肉碱可以降低腹脂含量,此外,日粮添加肉碱降低了饲喂高营养浓度日粮肉鸡胴体脂肪,增加胸肌产量(Kidd等,2009)。Zhai等(2008)研究发现,17~18 d鸡胚注射0.05~10 μmol肉碱对肉鸡体重无显著影响,但有改善鸡胚孵化率的趋势。Keralapurath等(2010)发现,受精蛋孵化0~3d注射0.5~8 mg/100 μL肉碱显著降低了肝脏葡萄糖浓度,提高肌肉水分含量。上述研究结果表明,肉碱对肉鸡受精蛋的影响可能与孵化率和后期生长性能有关。因此,本试验利用孵化18 d后的鸡胚通过羊膜注射肉碱,研究其对鸡胚孵化率及出壳后49 d生长和屠宰性能的影响。
1.1 试验处理 试验选择28周龄蛋鸡所产的受精蛋672枚,称重后随机放在4个孵化盘中,每盘168枚。参考李广新等(2012)的方法控制孵化温度、时间、翻单频率和湿度。受精蛋在孵化18 d后进行称重,之后随机分为6组(每组112枚,4个重复)。对照组不进行任何处理,穿孔组仅用注射器进行假注射,稀释组注射100 μL疫苗稀释液,其他3组分别注射0.6,2.4和9.6 mg肉碱/100 μL稀释液。处理组的每盘蛋水平随机排列,不受其在培养箱内位置的影响。注射方法、稀释液配制等参考Keralapurath等(2010)的研究结果。鸡胚注射肉碱后,每组随机选择16枚鸡蛋单独放置在一个盘子上,放在同一孵化箱中,同样,随机选择未注射的对照组鸡蛋,并将其转移到同一孵化器中各自的孵化盘中。在每4个托盘上,每个孵化箱包含6个处理组中1个处理组的16枚鸡蛋,所有6个处理组在每一个托盘再次有代表性样品。在出壳第0天(孵化21.5 d)随机选择出壳仔鸡(每个处理组12只),用记号笔标记,并转移到安有保温灯的围栏中。每个处理组的雏鸡分配在一个平行,因此,在所有4个托盘层上,6个处理组的雏鸡各有24个平行。
1.2 数据收集 每6 h监测孵化19.5~21.5 d每只雏鸡孵化的时间,平均孵化时间为20.5 d后的时间。孵化率为出壳仔鸡数占受精蛋数的百分比。每天记录每个组别的死亡率,每周记录肉鸡饲料用量、体重、鸡只数量,计算整个生长期内的饲料用量,料重比,总增重。试验第49天后,每组随机选择6只鸡禁食12 h后称重然后屠宰,收集腹脂、小腿肌、大腿肌、胸肌和翅膀,计算屠宰率及组织与活体重比值。
1.3 统计分析 本研究的孵育试验部分采用随机完全设计,4个托盘水平上的6个处理均相同。当仔鸡出壳后,来自相同处理组的雏鸡被分配到一个平行,而这些平行被随机分配到每个处理中。仔鸡出壳后也采用完全随机的试验设计,在每个平行中,每只鸡被视为单独一个重复。采用单因素方差分析注射肉碱后对各组指标的影响,用SAS软件One-way分析肉碱注射浓度对孵化时间、受精率、生长性能和屠宰性能均值的影响,各组均值差异采用Tukey法进行多重比较,P<0.05表示组间差异显著。
2.1 鸡胚注射肉碱后对鸡蛋孵化20.5 d后仔鸡出壳时间和孵化率的影响 由表1可知,鸡胚注射不同浓度的肉碱对仔鸡出壳时间和受精蛋孵化率无显著影响(P>0.05),但随着鸡胚肉碱注射浓度的升高,仔鸡出壳时间和受精蛋孵化率表现为二次曲线效应趋势(P=0.07)。仔鸡出壳时间和肉碱的注射浓度具有显著相关性(P<0.05,R2=0.97),鸡胚受精率也和肉碱的注射浓度具有显著相关性(P< 0.05,R2=0.93)。
表1 鸡胚注射肉碱后对鸡蛋孵化20.5 d后仔鸡出壳时间和孵化率的影响
2.2 鸡胚注射肉碱后对仔鸡生长和屠宰性能的影响 由表2可知,鸡胚注射不同浓度的肉碱对出壳后仔鸡的总增重、采食量、料肉比和死亡率均无显著影响(P>0.05)。
表2 鸡胚注射肉碱后对仔鸡生长性能的影响
鸡胚注射肉碱后对仔鸡屠宰性能的影响见表3,结果显示,18 d鸡胚注射不同浓度肉碱对出壳仔鸡屠宰性能指标如屠宰率、大腿肌率、小腿肌率、胸肌率和翅膀重均无显著影响(P>0.05)。
表3 鸡胚注射肉碱后对仔鸡屠宰性能的影响
3.1 鸡胚注射肉碱后对鸡蛋孵化20.5 d后仔鸡出壳时间和孵化率的影响 水是脂肪代谢过程所产生的副产物。众所周知,鸡胚在孵化前必须有足够数量的水从鸡胚中流失,以适应代谢水的产生,而不足的水分流失将延长孵化时间。Zhai等(2008)研究发现,鸡蛋孵化过程卵黄中高水平肉碱会降低卵黄脂肪含量,说明肉碱对发育中鸡胚的脂肪利用具有刺激效应。在本研究中,肉碱浓度与孵化时间和孵化率呈正相关关系,表明肉碱剂量的增加可能刺激了胚胎代谢,增加了卵黄脂肪的利用,进而增加卵内含水量。作者推测,在后续试验中如果增加试验鸡胚的数量及肉碱注射浓度可能显著影响仔鸡出壳时间和孵化率。Keralapurath等(2010)发现,孵化过程给鸡胚注射肉碱发现,孵化后3 d肝脏葡萄糖水平与未注射组无显著差异。由于其结果显示对肝脏和肌肉脂质浓度没有显著影响,这些组织中脂肪酸的氧化率似乎没有受到肉碱注射浓度的影响。
本试验结果表明,鸡胚注射9.6 mg肉碱/100 μL稀释液(每个鸡胚49.6 μmol)对鸡胚无毒副作用,这与Zhai等(2008)的研究结果一致。此外,Sato等(2006)结果显示,鸡胚体外注射8 mg肉碱/100 μL稀释液有延长仔鸡出壳时间和孵化率的趋势,这可能与产蛋与产肉型鸡的脂肪代谢不同有关,从而使其鸡胚对肉碱的反应不同。
3.2 鸡胚注射肉碱后对仔鸡生长和屠宰性能的影响 脂肪酸氧化效率的提高可能会降低孵化前胚胎葡萄糖异生途径和提高肌肉组织蛋白核查,从而导致生长过程中肌肉产量的增加。由于骨骼肌是脂肪酸氧化的主要场所,外源性添加肉碱对脂质利用的影响可能在不同的肌肉组织中表现不同(Klasing,1998)。Kidd等(2009)发现,日粮添加40 mg/kg肉碱可以提高肉鸡肌肉产量,特别是腿肌,但对体重、日增重、采食量、料比和死亡率无显著影响,同时对胸肌产量也无显著影响。Xu等(2003)的研究发现,日粮添加25 mg/kg肉碱可以提高公鸡胸肌脂肪含量。但Peebles等(2007)报道,种鸡日粮中添加25 mg/kg肉碱对鸡胚的发育和代谢无显著影响,同时Kidd等(2005)使用同一品种的种鸡也发现,肉鸡对出壳后仔鸡的生长性能无显著影响。尽管鸡胚注射肉碱,对胚胎期和出壳后仔鸡的生长和屠宰性能无显著影响,但显著降低了屠宰后胴体脂肪的沉积量(Kidd等,2005),其研究结果表明,鸡胚注射肉碱出壳后仔鸡饲喂高营养浓度日粮可以降低腹脂含量,提高胸肌产量。Rabie等(1997)发现,日粮添加50 mg/kg肉碱可以显著改善肉鸡体重,主要原因是肉碱提高脂肪酸氧化效率的结果,从而提高日粮氮的利用率。但与上述所说的肉碱对氮利用率的改善作用相比较,Rodehutscord等(2002)的结果发现,日粮添加肉碱对组织蛋白质利用和氮平衡无显著影响。
鸡胚注射0.6和9.6 mg肉碱/100 μL稀释液对随后仔鸡生长和屠宰性能无显著影响,但鸡胚注射9.6 mg肉碱/100 μL稀释液具有延长出壳和孵化率的趋势。