乌药制剂干预膝骨关节炎IL-33及MMP-13炎症因子含量的研究

李建春 庄汝杰

膝骨关节炎（knee osteoarthritis，KOA）是一种好发于中老年人，临床主要表现为膝关节活动不利、疼痛乃至畸形，以破坏软骨及软骨下骨，关节间隙改变为主要病理表现的疾病［1］。有关KOA的病因、发病尚不明确，近年来有一些证据表明，一些炎症因子，如：白细胞介素、基质金属蛋白酶和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在膝骨关节炎的软骨细胞及其基质破坏中发挥着重要作用［2-3］。本研究旨在通过对在本院骨科门诊就诊KOA患者资料进行分析，对口服乌药前后患者血清中炎症因子含量的变化进行研究，从而初步了解乌药制剂对早期KOA的治疗作用。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院骨伤科门诊符合疾病诊断的KOA患者共80例，其中男32例，女48例；45～79岁，平均年龄65.2岁。采用随机数字表法分为治疗组和对照组，每组各40例。治疗组中男15例，女25例；平均年龄64.9岁。对照组中男17例，女23例；平均年龄65.5岁。两组患者年龄、性别、病程情况等比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。收集其基本资料，治疗组予口服乌药制剂（浙江天台山乌药生物工程有限公司提供），服用方法：3g/袋，2袋/次，3次/d），用温水冲服；对照组予口服塞来昔布胶囊（辉瑞制药有限公司提供），服用方法：1粒/（次·d），口服0.2g。两组患者用药前、用药后3个月、用药后6个月分别采集静脉血，测定并比较其血清中IL-33及MMP-13的含量。诊断标准：采用美国风湿病学会2001年制定的膝骨关节炎诊断标准（符合其中≥3项）：（1）年龄≥50岁。（2）晨僵＜30min。（3）关节活动时有骨擦声。（4）膝部检查示骨性肥大。（5）有骨压痛。（6）无明显滑膜升温。（7）放射学检查有骨赘形成。纳入标准：（1）满足诊断标准的膝骨性关节炎患者并知情同意；（2）经本院医学伦理会审核通过；（3）近期未使用本研究中使用药物以外其他药物治疗者。排除标准：（1）肝肾功能及凝血功能严重障碍者；（2）精神病不配合治疗者；（3）哺乳期患者或孕妇患者；（4）合并风湿性关节炎或类风湿性关节炎等膝关节疾病者；（5）未遵医嘱退出研究者；（6）受试药物过敏者。

1.2 方法 （1）实验方法：随机分组后，治疗组予口服乌药制剂（浙江天台山乌药生物工程有限公司提供），服用方法：3次/d，2袋/次（3g/袋），用温水冲服；对照组予口服塞来昔布胶囊（辉瑞制药有限公司提供），服用方法：1次/d，0.2g/1粒/次，口服。两组患者用药前、用药后3个月、用药后6个月分别采集静脉血，采用酶联免疫吸附法测定并比较其血清中IL-33及MMP-13的含量水平。（2）观察指标：①两组患者用药前、用药后3个月、用药后6个月测定并比较其血清中IL-33及MMP-13的含量水平。②VAS 疼痛评分。（3）IL-33及MMP-13的测定：采用美国R＆D公司提供的酶联免疫吸附试剂盒，双抗体夹心ELISA法进行测量IL-33和MMP-13的浓度水平。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，组内治疗前后采用配对t检验，组间比较采用独立样本t检验。计数资料以%表示，组间比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后血清中IL-33、MMP-13含量比较 见表1。

表1 两组患者治疗前后血清中IL-33、MMP-13含量比较［ng/L,（x±s）］

2.2 两组患者治疗前后VAS疼痛评分比较 见表2。

表2 两组患者治疗前后VAS疼痛评分比较［分，（x±s）］

3 讨论

KOA是一种以破坏关节软骨、软骨下骨为主要病理表现的慢性疾病，但其发病机制仍不完全明确。KOA发生发展的病理过程中，炎性因子及软骨的破坏在其中扮演重要的角色［4-6］。研究表明随着KOA患者病程的进展，其血清中IL-1和MMP-13含量随病程进展而显著增加［7］。Mahmoud RH等［8］认为炎症细胞因子如IL-33和MMP-13通过复杂的作用机制参与软骨基质Ⅱ型胶原纤维的降解、破坏和炎症反应之中，诱导和促进软骨、软骨下骨的破坏，最终导致疾病进一步进发展。而陈巍等［9］认为细胞因子白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-α是KOA炎症反应中的主要驱动因素。白细胞介素（interleukin，IL）能够通过与免疫细胞相结合，进一步促进免疫细胞的增殖与分化，诱发免疫反应急性发作，导致炎症加重；而在KOA形成的过程之中，IL通过与免疫细胞的结合促进KOA炎症反应的形成，破坏软骨与软骨下骨。Heraud等［10］研究表明IL-1通过结合巨噬细胞等炎症细胞，释放金属蛋白酶，抑制软骨胶原和蛋白多糖的合成，促使软骨胶原和蛋白多糖的降解，使软骨无法正常的代谢，导致软骨结构的进一步破坏。因此，尽可能降低炎症因子对KOA患者关节软骨的破坏有重要的意义，能有效的延缓KOA患者病情的发展，提高关节的使用寿命。

乌药属于樟科植物乌药的块根，主要产于浙江、湖南等地，其中以浙江天台所产的乌药为优。《本草纲目》有记载：“乌药生岭南邕州容州及江南……。今台州雷州皆有产之，以天台产者为胜”。近年来研究发现，乌药提取物有抗炎和镇痛活性［11］。乌药中的主要活性成分为乌药抗炎活性组分（LEF）（抗炎活性组），其主要成分为缩合鞣质类成分，该成分可以有效的抑制组织中前列腺素E2生成［12］，提示乌药具有抑制炎症反应的潜能。王婵等［13］研究显示：乌药生物碱显著抑制了大鼠足部的肿胀；同时其体外实验进一步揭示乌药总生物碱可以抑制巨噬细胞释放一氧化氮（NO）和白细胞介素-1（IL-l），有效的抑制了炎症反应。因此得出结论：乌药总生物碱（TARL）可能通过抑制集体巨噬细胞等炎症细胞释放炎症因子的功能来抑制炎症反应。本研究采用口服乌药制剂，通过对KOA患者口服乌药前后炎症因子含量水平的比较发现，乌药能有效降低KOA患者体内炎症因子水平的表达，降低炎症因子对关节软骨的破坏作用，从而达到延缓KOA患者病情发展的目的。