CXCR7在甲状腺微小乳头状癌中的表达及临床意义

周元 陆宁 蒋红钢 陈治横 陆伯豪 李进

甲状腺微小乳头状癌是甲状腺乳头状癌的一种亚型，其最大直径＜10mm，由于其体积小，发病隐蔽，预后良好，易被忽略，但临床上仍发现淋巴结转移甚至少数远处转移等情况，故早期诊断和早期治疗具有重要意义。近年来趋化因子的研究取得了较大进展，研究显示趋化因子可以趋化细胞的聚集和移动，其与靶细胞膜上的受体结合，从而参与人体的免疫反应、对炎症的应激反应及肿瘤的形成和转移。CXCR7是一种趋化因子受体，其可与趋化因子CXC配体12（CXCL12）结合形成CXCL12- CXCR7生物学轴从而参与多种肿瘤的粘附及转移，如在膀胱癌［1］、骨肉瘤［2］、乳腺癌［3］等组织中呈高表达，而在正常组织中表达较少［4］。CXCR7表达强度与恶性程度、淋巴结转移、远处转移及预后呈正相关。目前有关CXCR7在甲状腺微小乳头状癌中的研究报道较少，作者通过检测CXCR7在甲状腺微小乳头状癌中的表达情况，分析CXCR7与甲状腺微小乳头状癌临床特征之间的关系，旨在探讨CXCR7在甲状腺微小乳头状癌的发生、侵袭和转移中的重要作用。

1 临床资料

1.1 一般资料 收集本院2012年1月至2014年12月甲状腺微小乳头状癌手术石蜡标本共80例，其中男10例，女70例；年龄24～76岁，平均45.8岁。所有病例均行患侧甲状腺腺叶切除+VI区淋巴结清扫术，其中VI淋巴结转移者23例。同时选择同期甲状腺良性病变手术石蜡标本30例用于对照，其中男5例，女25例；年龄25～64岁，平均50.7岁；结节性甲状腺肿17例，甲状腺腺瘤7例，桥本氏甲状腺炎6例。

1.2 方法 所有标本均经福尔马林溶液固定，常规组织处理，石蜡包埋，连续切片，切片厚度4μm，HE染色。采用免疫组化EnVision二步法，严格按试剂盒说明书进行操作。用诊断明确的阳性片作阳性对照，以磷酸盐缓冲液代替一抗体作阴性对照。

1.3 结果判定 CXCR7阳性信号定位于细胞浆或细胞膜，相应区域呈现棕黄色颗粒代表阳性。按阳性细胞数所占细胞总数的百分率计分：＜5%为0分，5%～25%为1分，26%～50%为2分，56%～100%为3分；着色根据Beesley［5］分级方法，根据染色强度评分：无染色为0分，浅染色为1分，中等染色为2分，深染色为3分。阳性细胞百分数评分与颜色强度评分之和作为判定结果：≤2分为不表达（-），3分（+），4分（++），＞5分（+++）。标本切片病理结果及免疫组化结果采用双人双盲法进行判定。

1.4 随访 对所有患者进行随访。形式主要有门诊、电话、微信及信函等，截至日期为2018年6月30日。观察其复发、转移及生存情况。

1.5 统计学方法 采用SPSS17.0统计软件。计数资料组间比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CXCR7在甲状腺微小乳头状癌与甲状腺良性病变中的表达情况 CXCR7在甲状腺微小乳头状癌中阳性率明显高于良性病变（P＜0.01）（见表1、图1）。

表1 甲状腺微小乳头状癌与良性病变CXCR7的表达情况

图1 CXCR7在甲状腺微小乳头状癌与良性病变中的表达

2.2 甲状腺微小乳头状癌中CXCR7的表达与临床特征之间的关系 甲状腺微小乳头状癌中CXCR7的阳性表达与淋巴结转移有关，在有淋巴结转移的癌组织中CXCR7的阳性率明显高于无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05）。CXCR7的阳性率与患者性别、年龄、肿瘤位置、术前TSH水平、肿瘤大小、是否侵犯被膜无关。见表2。

表2 甲状腺微小乳头状癌中CXCR7的表达与临床特征的关系

2.3 随访结果随访时间41～75个月。所有甲状腺微小乳头状癌共存活79例，1例死于其他疾病，其中2例分别于初治后31个月和35个月发生颈部淋巴结转移，且CXCR7均表达阳性，行患侧颈部淋巴结清扫术后存活至今。

2.4 CXCR7对甲状腺微小乳头状癌复发及生存相关性 CXCR7阳性者复发率为3.4%，CXCR7阴性者复发率为0%，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。CXCR7阳性者生存率为98.3%，CXCR7阴性者生存率为100%，两者比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨论

趋化因子是一群具有化学趋化作用的细胞因子，可分为 CC、CXC、C、CX3C 四大类，介导细胞的迁移及趋化，参与恶性肿瘤细胞的生长、增殖和侵袭、转移。CXCL12即SDF-1，是CXC家族中的一个成员，与其受体CXCR4结合形成 CXCL12-CXCR4 轴在多种肿瘤的生长、浸润和转移中起重要作用［6］。长期以来，CXCR4被认为是CXCL12的唯一受体，但近年来发现CXCR7也可以与CXCL12结合形成CXCL12-CXCR7 轴参与肿瘤的增殖、浸润和转移［7］。现有研究表明［8］，CXCR7在恶性组织中高表达，其与肿瘤恶性程度、远处转移、淋巴结转移、TNM分期及生存预后密切相关。

本研究采用免疫组化法，研究结果表明在甲状腺微小乳头状癌中CXCR7的阳性率显著高于甲状腺良性疾病，这和李坤等［9］与刘臻等［10］在甲状腺乳头状癌中的报道基本一致。故提示CXCR7的表达与肿瘤恶性表象相关，CXCR7可能在甲状腺微小乳头状癌形成及发展中发挥作用。本研究中，CXCR7在甲状腺微小乳头状癌中有表达阳性，其表达与年龄、性别、肿瘤位置、术前TSH水平、肿瘤大小、是否侵犯被膜无关，而与淋巴结的转移相关。故提示CXCR7的表达与肿瘤浸润转移密切相关，CXCR7阳性的甲状腺微小乳头状癌可能具有更强的侵袭能力，更容易发生转移。作者认为对于该部分患者，手术范围可适当扩大，积极地进行VI区淋巴结清扫，同时结合其他检查结果，必要时行全甲状腺切除术和颈部淋巴结清扫术，并且告知患者应长期密切随访观察，注意有无局部复发及淋巴结转移，及早处理。本研究随访中CXCR7阳性表达患者术后颈部淋巴结发生转移，阴性患者未见复发及转移，提示CXCR7阳性患者术后可能更易发生复发、转移等情况，是一组高危患者。本组资料比较差异均无统计学意义，可能与入组数量及随访时间等因素相关，有待进一步通过增大样本及长期随访进行探讨证实。

甲状腺微小乳头状癌的发生发展、侵袭转移是一个多阶段的，涉及多基因、多信号通路的复杂过程。本研究中CXCR7的表达与甲状腺微小乳头状癌颈部淋巴结转移密切相关，可能为甲状腺微小乳头状癌患者转移提供重要参考指标。进一步对CXCR7与甲状腺微小乳头状癌生物学特征之间的关系进行深入研究，可能对肿瘤的发生、发展有更深入的认识，为甲状腺微小乳头状癌的治疗方法及病情判断提供新的思路。尽管大多数的甲状腺微小乳头状癌患者术后预后较好，但是对于CXCR7表达阳性者，需要进行长期密切随诊观察，使患者得到更合理、及时、有效的治疗。