骆金红,丁永利,敖 叶,韦仕南,嵇辛勤,阮 涌,陈 祥*
(1.贵州大学高原山地动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,贵州省动物遗传育种与繁殖重点实验室,贵州贵阳 550025;2.贵州大学动物科学学院,贵州贵阳 550025)
同期发情是指利用外源激素或其类似物按照一定的 程序直接或间接作用于母畜卵巢,人为提前或推后卵泡发育波,使群体母畜在预定时间集中排卵并表现发情[1-3]。该技术的应用极大地简化了后续定时输精、批次转群、同期妊娠、分娩、羔羊的集中护理、同期出栏整个生产周期的工作,有利于集约化、工厂化成批次生产[4],可实现母羊1 年2 产或2 年3 产,使饲养管理成本大幅度降低,对提高养羊业的经济效益意义重大。生产实践中,由于受品种[5-6]、胎次、年龄、体况[7-8]等母畜自身因素和季节[5,9-10]、饲养管理、药物质量、处理时间、激素用量[11]、不同处理方法[12-14]等外界因素影响,各地所做同期发情处理结果不尽相同,效果不稳定,重复性较差[15]。为了探究适合努比亚山羊最优的同期发情处理方法,本实验选取前列腺素(PG)+PG、海绵栓+PG、海绵栓+孕马血清促性腺激素(PMSG)、海绵栓+PMSG+PG 4 种处理方法对努比亚山羊进行同期发情实验,对同期发情率、21 d 返情率、24 h 内同期率、价格成本等进行统计分析,以期筛选出最适合努比亚山羊的同期发情方法及对定时输精时间段进行探究,为同期发情技术的推广应用及定时输精的建立奠定基础。
1.1 实验动物 选择1.5~3 岁、体况良好、有正常繁殖史、无生殖道疾病、空怀的经产努比亚山羊母羊234 只进行同期发情实验;羊由贵州册亨海铭巍畜牧业开发有限公司种羊场提供。
1.2 同期发情处理方法 以氯前列醇注射液(PG,上海计划生育研究所,批号:060292200)、注射用血促性素(PMSG,购自宁波市第二激素厂,批号:110044564)、孕酮阴道海绵栓(北京绿欣康农牧科技有限公司)3 种药物为基础,用以下4 种方法进行同期发情处理(表1)。
1.3 母羊的发情鉴定 采用观察和公羊试情结合进行发情鉴定。在处理结束12 h 后,挑选性欲旺盛、无疾病的公羊,腹部捆绑兜布(防止阴茎伸出误配)进行试情,上、下午各1 次。如有啼叫不止、摇尾、主动接近公羊、接受爬跨、阴门红肿且有黏液流出等即判定为发情,油漆标记,登记耳号,记录圈舍、时间。
1.4 定时输精方法 采集种公羊精液,立即检查其活力、密度。对检测合格的精液采用提前预热好的0.9%生理盐水稀释后进行子宫颈人工输精,上、下午连续输精2 次,于输精后18~23 d 观察母羊有无返情,记录21 d 返情率。
1.5 统计分析 用Excel 软件整理数据,用SPSS 19.0软件卡方检验进行显著性分析,以P<0.05 作为差异显著性判断标准。
2.1 不同处理方法的山羊发情时间分布 由表2 可知,冬季时,PG+PG、海绵栓+PG、海绵栓+PMSG、海绵栓+PMSG+PG 4 种处理发情时间主要集中在处理完成后25~48 h,春季海绵栓+PG 处理发情时间主要集中在49~72 h。
2.2 冬季4 种同期发情处理的效果比较 表3 结果表明,经同期发情处理,4 种同期发情处理均具有较高的同期发情率,其中,PG+PG 处理同期发情率(89.58%)、21 d 返情率(18.60%)略高于其他3 种处理(P>0.05),但4 种处理间的同期发情率、21 d 返情率均无显著差异(P>0.05)。PG+PG 处理成本最低,为10 元/只。
2.3 不同季节同期发情的效果比较 由表4 可知,春季时同期发情率略高于冬季(P>0.05),21 d 返情率略低于冬季(P>0.05)。
3.1 不同处理方法对努比亚山羊发情时间的影响 在冬季,PG+PG、海绵栓+PG、海绵栓+PMSG、海绵栓+PMSG+PG 4 种处理方法的山羊发情时间主要集中在处理完成后25~48 h,较李俊杰等[16]和田树军等[11]运用海绵栓+PMSG+PG 法对小尾寒羊处理冬季发情时间主要集中于0~24 h 的结果推后,与包花拉等[5]运用海绵栓+PMSG+PG 法对黑头杜泊羊和小尾寒羊处理发情时间主要集中在25~48 h 的结果一致,说明处理结束后发情主要集中时间段与处理方法没有必然联系。本实验春季海绵栓+PG 处理发情时间主要集中于处理完成后49~72 h,较冬季组推后,提示季节可能是影响发情主要集中时间段的因素。
3.2 不同处理方法对努比亚山羊发情率的影响 常用于同期发情的药物主要有两类,一类是抑制发情的药物,这类药物通过延长黄体期并抑制卵泡发育,形成人为黄体期,间接抑制卵巢上卵泡的发育和成熟,使母畜不出现发情[14],常用药物主要有孕酮、甲孕酮、氯地孕酮等;另一类是促进发情的药物,通过溶解黄体,人为缩短黄体期,解除卵泡发育的抑制,进而使母畜表现发情[1],常用药物有PG、促性腺激素等。
表1 4 种同期发情处理方法
表3 冬季4 种同期发情处理效果
表4 不同季节同期发情效果比较
本实验结果表明,冬季4 种处理方法中,PG+PG处理同期发情率最高,达89.58%,与李鹏程等[10]采用PG+PG 法对黔北麻羊处理得到的发情率(88%)相接近,略高于白元生等[17]对晋岚绒山羊采用PG+PG 法处理得到的同期发情率(86.7 %),远高于林峰等[13]运用相同方法对波尔山羊处理得到的同期发情率(70%)。不同品种PG+PG 处理发情率比较说明,PG+PG 处理方法在努比亚山羊上具有相对较好的应用效果。对于海绵栓+PG 法,春季发情率为92.61%,冬季同期发情率为83.33%,均高于张学勤[18]使用海绵栓+PG 法对小尾寒羊、滩羊、萨寒杂种母羊处理所得到的平均发情率(79.3%)。目前,对母羊采用孕激素+PMSG 法进行处理,得到的同期发情率大多可达90%。冯国献[19]曾采用孕激素+PMSG 法对小尾寒羊进行同期发情处理,使用不同量的PMSG 分为2 次进行,PMSG 用量为200 IU 时同期发情率为94.4%,250 IU 时同期发情率为88.0%。本实验中,PMSG 的使用量为330 IU/ 只,海绵栓+PMSG 法同期发情率为86.67%,略低于冯国献[19]的孕激素+PMSG 法处理,提示在有效范围内,PMSG 用量越低效果可能更好。海绵栓+PMSG+PG 法同期发情率为79.41%,与辛晓玲等[20]使用海绵栓+PMSG+PG法对小尾寒羊处理得到同期发情率(81.1%)、宋玉贵等[21]使用海绵栓+PMSG+PG 法对小东北细毛羊处理得到的同期发情率(81.05%)相近,均低于海绵栓+PMSG 处理,提示PMSG 和PG 联用并不一定能取得好的效果。
3.3 不同季节使用海绵栓+PG 法对努比亚山羊发情率的影响 不同季节,由于光照、温度等不同,同期发情处理效果也会有很大差异。本实验中,海绵栓+PG 法处理春季同期发情率高于冬季(92.61%>83.33%),24 h内同期率更高(72.22%>62.75%),与李俊杰等[16]对承德、唐山、衡水、邢台和邯郸5 个地方山羊品种和小尾寒羊运用海绵栓+PMSG+PG 法处理得到的春季同期发情率和同期率优于冬季研究结果一致,说明春季较冬季更适合开展同期发情。
冬季4 种处理方法中,综合同期发情率、21 d 返情率、24 h 同期率、成本4 个指标,PG+PG 处理综合效果优于其他3 种,操作简单、成本低、效果好,利于生产实践推广应用;4 种处理方法的发情时间主要集中于处理完成后25~48 h,提示冬季最佳定时输精时间可选择在处理完成后25~48 h 进行。春季时,海绵栓+PG处理在春季的效果优于冬季,发情率达92.61%,发情时间主要集中于处理完成后49~72 h,可进行生产试用。